衡凤燕
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
- 供职机构:中国医学科学院中国协和医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国医学科学院基金卫生部科技专项基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人IL-2Rα链基因负调控元件结合蛋白的分离纯化
- 1999年
- 淋巴细胞表面高亲和力IL-2R的出现受IL-2Ra基因的诱导表达控制,而IL-2Ra链基因的表达受到严格的时空的调控。在IL-2Ra基因上游除存在正调控元件外还存在负调控元件(-391TCATCCCAGG-381,NRE)及其下游不完全反转重复序列(-153CCTGGTTTGA-143NIRS)。本组曾通过紫外交联实验发现Jurkat细胞有一种蛋白质与NIRS和NRE特异结合。本文利用肝素-亲和柱层析及序列特异DNA亲和层析认1010Jurkat细胞中获得了分子量约为75kD的NRE特异结合蛋白。EMSA实验表明,纯化后的蛋白与NRE所形成的结合物能被NIRS及HIVLTR的负调控元件所竞争,提示该NRE结合蛋白不仅可能参与IL-2Ra基因的转录调控,而且可能在HIV基因表达过程中起某种作用。
- 张玉健邢光新莽锐程小款衡凤燕吴宁华沈琲
- 关键词:结合蛋白DNA
- 白细胞介素2受体α亚基参与Jurkat细胞凋亡的调节被引量:4
- 2001年
- T淋巴细胞表面的高亲和力白细胞介素 2受体 (IL 2R)由α ,β及γ三种亚基组成 ,其中只有IL 2Rα亚基具有特异结合IL 2的活性 ,目前对IL 2Rα亚基的确切的功能尚不清楚。我们将IL 2RαcDNA反意表达质粒转染Jurkat细胞后 ,经Western印迹 ECL分析发现 ,细胞内出现了细胞凋亡早期特异的多聚二磷酸腺核糖聚合酶 [Poly(ADP ribose)polymerase ,PARP]的 89kD断裂片段 ,此结果提示 ,IL
- 胡晶晶李宏帆程小款衡凤燕吴宁华沈珝琲
- 关键词:细胞凋亡T淋巴细胞
- 检测4种热休克基因表达水平的RT-PCR体系的建立及其应用被引量:1
- 2002年
- 目的建立能同时检测人Jurkat细胞中4种热休克基因mRNA表达水平的RT-PCR体系。方法采用基因克隆、基因重组、体外转录、RT-PCR技术,建立能同时检测细胞中4种热休克基因的RT-PCR体系,并将此体系用于检测SW13细胞中热休克基因的表达。结果构建了用于4种热休克基因mRNA检测的内参照质粒,并经体外转录成内参照RNA(i-RNA);用于SW13细胞中结果显示:hsp70、hsp90α呈典型的热诱导表达,hsp60和hsp90β具有较高水平的组成性表达,并且呈不同程度的热诱导表达。结论新构建的RT-PCR体系可以用于检测人Jurkat细胞中4种热休克基因mRNA的表达水平。
- 李宏帆刘兴荣衡凤燕吴宁华沈珝琲
- 关键词:基因表达热休克基因逆转录一聚合酶链反应JURKAT细胞
- 人分泌型白细胞介素2受体α链基因的克隆及其在真核细胞中的表达被引量:4
- 1995年
- 删除人白细胞介素-2受体α链cDNA中编码胞质内13个氨基酸及跨膜区19个氨基酸残基的DNA片段后,接上人工合成的终止寡核苷酸片段,改建后的cDNA与真核表达载体pRc/CMV重组成质粒pCMV/rsIL2R。用电打孔及磷酸钙法将此质粒转染CHO细胞,经G418筛出表达Neo基因的克隆20株,通过mRNA狭缝杂交及ELISA检测,有5株能稳定表达分泌型α链mRNA及蛋白,其中4株细胞培养上清中的IL2Rα链的含量达1400U/ml以上。
- 程小款杜恺衡凤燕吴宁华沈珝琲
- 关键词:白细胞介素2受体重组克隆
- 白细胞介素2受体α基因表达中两组近端启动子活性的研究
- 2002年
- 程小款衡凤燕刘觉辉吴宁华沈珝琲
- 关键词:启动子转录调控基因表达