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蒋琼
作品数:
12
被引量:39
H指数:3
供职机构:
中国科学院上海生命科学研究院生物化学研究所
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
郑仲承
中国科学院上海生命科学研究院生...
刘新垣
中国科学院上海生命科学研究院生...
戈凯
中国科学院上海生命科学研究院生...
许德华
中国科学院上海生命科学研究院生...
孙兰英
中国科学院上海生命科学研究院生...
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作者
6篇
刘新垣
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蒋琼
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郑仲承
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戈凯
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曹蕾
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孙兰英
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生物化学与生...
2篇
实验生物学报
2篇
生物化学杂志
年份
3篇
1998
1篇
1997
2篇
1996
共
12
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重组含HSV-TK基因腺病毒的构建及对肿瘤细胞的杀伤作用
被引量:2
1998年
构建含CMV启动子和HSV-TK基因的复制缺陷型重组腺病毒载体(AdCMVTK),用PCR及Southern杂交筛选鉴定阳性空斑,证实AdCMVTK含HSV-TK基因。纯化的Ad-CMVTK滴度达10^(12)pfu/ml。GCV对经Ad-CMVTK感染(M.O.I.=100)的HeLa等3种肿瘤细胞的IC50<4μmol/L,同时观察到明显的旁杀伤效应。AdCMVTK/GCV系统的建立为肿瘤基因治疗的研究提供了新的手段。
许德华
戈凯
郑仲承
蒋琼
刘新垣
关键词:
腺病毒载体
HSV-TK基因
基因治疗
CEA启动子控制HSV-TK基因表达对人结直肠癌细胞的杀伤作用
被引量:1
1998年
构建了以CEA启动子控制的HSV-TK基因表达质粒pCEA-TK。转染pCEA-TK的人结肠癌细胞LoVo对GCV的敏感性提高了1300倍。同样条件下,人宫颈癌细胞HeLa对GCV的敏感性仅提高8倍,且对低于血药浓度(20μmol/L)的GCV不敏感。以上结果显示在GCV存在时,CEA启动子控制下HSV-TK基因的表达使CEA阳性的人结直肠癌细胞获得专一性杀伤。此外,DNA片段分析和电镜观察表明GCV诱导转染pCEA-TK的LoVo细胞发生凋亡可能是这个系统杀死肿瘤细胞的机制之一。本工作还讨论了癌胚抗原(CEA)基因启动子用于人结直肠癌专一性自杀基因治疗的可能性。
戈凯
蒋琼
许德华
郑仲承
刘新垣
关键词:
HSV-TK基因
结直肠癌
基因治疗
组织专一性表达自杀基因治疗人结肠癌的研究
被引量:10
1996年
构建了以癌胚抗原(CEA)基因启动子控制的HSV-TK和ECCD的表达质粒PCEA-TK和pCEA-CD.将它们分别与pSV2-neo共转染人结肠癌细胞株LoVo和人宫颈癌细胞株HeLa,G418筛选得到细胞克隆LoVo/CEA-TK、toVo/CEA-CD、HeLa/CEA-TK和HeLa/CEA-CD.与野生型LoVo细胞相比,LoVo/CEA-TK和LoVo/CEA-CD形态无明显改变,生长曲线也相似,但对GCV或5-FC的细胞毒的敏感性分别提高了2000倍或700信而HeLa/CEA-TK(或HeLa/CEA-CD)仍对低浓度GCV(或5-FC)不敏感.以上结果显示了应用组织专一性表达的自杀基因治疗人结肠癌的可能性.
蒋琼
戈凯
许德华
郑仲承
刘新垣
关键词:
结肠肿瘤
基因治疗
转TK基因的人结肠癌细胞对多种原药敏感性的研究
被引量:3
1997年
构建了含有单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(HSV-TK)的重组逆转录病毒载体LTKSN.经PA317细胞包装后,感染人结肠癌细胞株LoVo.用G418筛选到稳定表达HSV-TK基因的细胞克隆LoVo/LTKSN.LoVo/LTKSN与野生型LoVo细胞相比,生长曲线无明显差异,细胞形态亦无改变.细胞毒试验证明LoVo/LTKSN对GCV的敏感性很高,半杀伤浓度IC50为0.5μmol/L,比野生型细胞提高了4000倍以上.三种不同的原药GCV,ACV和BVDU对LoLo/LTKSN具有效果不等的杀伤作用.BVDU和GCV联合作用效果更好.旁杀伤效果十分明显,低浓度GCV就可以将合10%LoVo/LTKSN的混合细胞中的大部分肿瘤细胞杀死.
蒋琼
戈凯
许德华
郑仲承
刘新垣
关键词:
结肠肿瘤
癌细胞
HSV-TK基因
大鼠实验性帕金森病的基因治疗
被引量:3
1996年
将稳定转染了大鼠酪氨酶羟化酶(Tyrosinehydroxylase,TH)基因的大鼠成肌细胞移植于帕金森病大鼠模型的纹状体,进行基因治疗研究。RT-PCR和免疫组织化学检测都证明转基因细胞可在纹状体内存活并表达TH,动物的不对称旋转行为明显改善,而且疗效可维持半年以上。
曹蕾
蒋琼
郑仲承
孙兰英
刘新垣
关键词:
基因治疗
动物实验
震颤性麻痹
腺病毒载体介导CEA基因元件调控自杀基因治疗
被引量:2
1998年
构建以CEA启动子控制HSVTK基因表达的复制缺陷型腺病毒载体(AdCEATK).纯化的重组腺病毒滴度达1×1012pfu/ml.CEA阴性的HeLa细胞感染AdCMVTK后对丙氧鸟苷(GCV)很敏感,而感染了AdCEATK后不被GCV杀伤.与此相反CEA阳性的LoVo细胞中AdCMVTK和AdCEATK都有很好的表达活性,说明CEA启动子有良好的细胞专一性.AdCEATK/GCV系统还有明显的旁杀伤效应.此载体将有助于实现对CEA阳性肿瘤的专一性自杀基因治疗.
许德华
戈凯
蒋琼
郑仲承
刘新垣
关键词:
腺病毒载体
基因治疗
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