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胡琦: 作品数：11 被引量：38H指数：3; 供职机构：重庆医科大学检验医学院更多>>; 发文基金：四川省自然科学基金四川省卫生厅研究基金四川省卫生厅科研基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌基因型分析被引量：1: 2008年; 目的了解我院临床分离大肠埃希菌产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率和基因型分布情况。方法确证试验鉴别临床分离大肠埃希菌中产ESBLs株,PCR扩增CTX-M耐药基因,PCR-RFLP和DNA测序确定CTX-M基因型。结果确证实验证明,88株大肠埃希菌中有57株ESBLs阳性,其中54株CTX-M基因扩增阳性。PCR-RFLP分析发现,10株携带CTX-M-1组基因,39株携带CTX-M-9组基因,另外5株同时携带CTX-M-1和CTX-M-9组基因。测序证实7株CTX-M-9组扩增产物均为CTX-M-14型,3株CTX-M-1组扩增产物均为CTX-M-3型。结论大肠埃希菌中产CTX-M型ESBLs的检出率较高,其基因型以CTX-M-14和CTX-M-3型为主。; 肖代雯杨永长喻华刘华黄文芳廖维金胡琦黄波; 关键词：超广谱Β-内酰胺酶大肠埃希菌基因型

结核分枝杆菌蛋白标志物的筛选: 目的：研究分枝杆菌菌体蛋白表达，筛选特征性蛋白，研究结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌分泌蛋白表达，筛选差异蛋白。方法：1.培养分枝杆菌标准菌株，灭活菌株，观察比较灭活效果。2.提取分枝杆菌菌体蛋白，干化学法测蛋白...; 胡琦; 关键词：结核分枝杆菌蛋白标志物非结核分枝杆菌蛋白筛选; 文献传递

大肠埃希菌蛋白指纹图谱的建立被引量：5: 2008年; 目的建立大肠埃希菌（Escherichia coli，E．coli）蛋白指纹图谱，为Ecoli感染快速诊断奠定基础。方法收集临床分离E.coli88株，提取细菌DNA，PCR检测Ecoli 16S rRNA。蛋白提取液提取细菌蛋白，干化学法测蛋白浓度，应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS）检测Ecoli蛋白，采用Ciphergen Pro-teinchip软件自动采集数据。重复测定20次Ecoli混合标本，评价SELDI检测Ecoli蛋白分子量的重复性。结果E．coil标准菌株ATCC 25922和临床分离株均可检出16S rRNA。AU芯片能捕获近30个E．coli蛋白峰，其中19个蛋白峰构成E．coli特征性蛋白指纹图谱，各蛋白峰在临床分离E．coli间分子量变异系数≤0．2％。SELDI重复检测20次E．coli混合标本显示同一蛋白峰的分子量变异系数≤0．05％。结论E．coli在分子量3～20kD范围内具有特征性蛋白指纹图谱，为快速诊断E.coli感染提供了新思路。; 肖代雯杨永长喻华刘华黄文芳黄波胡琦廖维金; 关键词：大肠埃希菌表面增强激光解析电离飞行时间质谱

ERK参与裸鼠体内辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的调控作用被引量：2: 2008年; 目的:探讨辛伐他汀(simvastatin)作用于裸鼠体内K562细胞后Ras-MAPK信号转导通路胞外信号调节激酶(extra-cellular signal-regulated protein kinase,ERK)分子水平的变化,以说明ERK参与裸鼠体内辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的调控作用。方法:体外培养慢性髓细胞白血病(CML)细胞株K562细胞,构建BALB/c-nu/nu裸鼠的K562细胞移植瘤模型。流式细胞术(FCM)检测对照组和两个辛伐他汀处理组的K562细胞周期变化,TUNEL法检测K562细胞晚期凋亡情况。采用RT-PCR检测K562细胞中Ras-MAPK信号通路N-Ras、ERK1 mRNA的差异表达。免疫组织化学标记葡聚糖聚合物(labbled dextran polymer,LDP)法检测P-ERK蛋白水平变化。结果:辛伐他汀能够明显抑制裸鼠K562移植瘤组织的增长,随着辛伐他汀剂量的增加,K562细胞移植瘤体积和质量明显减小(P<0.05,P<0.01)。每次注射0.05mg的辛伐他汀能够诱导裸鼠体内K562细胞发生明显的G0/G1期停滞,不同剂量的辛伐他汀能够诱导K562细胞发生明显的凋亡,并随剂量的增加,凋亡率逐渐增高(P<0.01);不同剂量的辛伐他汀能够引起N-Ras、ERK1 mRNA的表达下调(P<0.01)。与对照组相比,两个处理组的p-ERK蛋白分别出现表达下调(P=0.01,P<0.01)。结论:辛伐他汀在体内可能依赖Ras-MAPK信号转导通路ERK基因和蛋白水平的表达下调诱导K562细胞凋亡发生。; 周定安黄文方刘华杨永长黄波胡琦; 关键词：辛伐他汀 ERK 细胞凋亡

应用SELDI-TOF-MS技术诊断2型糖尿病肾病被引量：3: 2009年; 目的比较2型糖尿病（T2DM）肾病和对照人群血清蛋白质指纹图谱的差异，建立T2DM肾病诊断模型，探讨此技术对该病诊断的价值。方法采用表面增强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术检测51例T2DM肾病患者和66例对照人群血清，获得蛋白质指纹图谱。结合人工神经网络软件建立诊断模型并进行验证。结果在相对分子量2000-30000范围内共检测到175个蛋白峰，其中有17个蛋白峰明显表达差异（P〈0．01）。筛选其中质荷比（m／z）分别为5420、5782、6472、6666、10277和11770的6个蛋白峰作为标志蛋白建立人工神经网络诊断模型。利用该模型对T2DM肾病进行盲法预测，结果表明其对该病的诊断敏感性和特异性分别为81．0％和96．2％。结论利用SELDI-TOF-MS和生物信息学技术建立了敏感性和特异性均较高的T2DM肾病诊断模型，为该病诊断提供了新途径。; 黄波黄文方刘华杨永长肖代雯姜伟胡琦冯文莉; 关键词：蛋白质指纹图谱糖尿病肾病

分枝杆菌特征性蛋白的筛选被引量：3: 2008年; 目的研究分枝杆菌蛋白表达,筛选分枝杆菌特征性蛋白,为分枝杆菌的快速鉴定奠定基础。方法选取分枝杆菌标准菌株,提取细菌蛋白,干化学法测蛋白浓度,应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)检测分枝杆菌蛋白表达,和非分枝杆菌蛋白指纹图谱比较,筛选分枝杆菌特征性蛋白。重复测定20次分枝杆菌蛋白标本,评价SELDI检测分枝杆菌蛋白分子量的重复性。结果耻垢分枝杆菌ATCC 14468有约20个蛋白峰,结核分枝杆菌ATCC 25177、土地分枝杆菌ATCC 15755、胞内分枝杆菌ATCC 13950、耻垢分枝杆菌ATCC 607有近40个蛋白峰。与非分枝杆菌蛋白指纹图谱相比,4个蛋白峰为分枝杆菌所特有。SELDI重复检测20次分枝杆菌蛋白标本显示同一蛋白峰的分子量变异系数≤0.05%。结论分枝杆菌有其特征性蛋白峰,可能有助于分枝杆菌的快速鉴定。; 胡琦杨永长黄文芳刘华喻华肖代雯黄波冯文莉; 关键词：分枝杆菌表面增强激光解吸电离飞行时间质谱

尿蛋白标志物模型早期诊断糖尿病肾病的临床应用被引量：15: 2009年; 目的寻找基于蛋白质组学技术早期、快速诊断糖尿病肾病的尿蛋白标志物模型，并探讨其临床应用价值。方法应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱（surface-enhanced laser desorption-ionization time of flight mass spectrometry，SELDI-TOF-MS）技术及Au芯片（proteinchipgoldarray）检测292例患者尿蛋白质谱，包括129例糖尿病肾病和163例对照者（61例糖尿病及102名健康体检者）。获得的蛋白质谱数据用Biomaker Wizard3．1软件筛选差异蛋白，通过生物标志模型软件（biomarker patterns software，BPS）建立决策树辨别分析模型，评价其临床诊断价值。对部分筛选的差异蛋白通过比对标准蛋白质谱数据，根据分子量大小进行初步鉴定。结果糖尿病肾病患者与对照者尿液中差异表达的蛋白质峰有40个，其丰度值两组间比较差异均有统计学意义（t值为-9．81～24．52，P均〈0．05），通过BPS自动筛选66916质荷比（m／z）蛋白建立的模型诊断糖尿病肾病敏感度为98．7％（78／79），特异度98．2％（111／113）。对糖尿病和糖尿病肾病患者尿蛋白质谱图分析后得到24个差异蛋白质峰，其丰度值两组间比较差异均有统计学意义（t值为-6．95～14．45，P均〈0．05），BPS筛选4008、11619、66916m／z蛋白建立模型区分糖尿病与糖尿病肾病的敏感度（129／129）和特异度（61／61）均为100％。通过比对标准蛋白质谱数据，糖尿病肾病患者尿差异蛋白中m／z 11619、23529、66916和79378，可能为β2-微球蛋白、α1-微球蛋白、白蛋白和转铁蛋白。结论基于SELDI-TOF-MS及Au芯片技术检测尿蛋白质谱在鉴别蛋白尿来源、糖尿病肾病的早期快速诊断及肾脏损害评估具有重要应用价值。; 姜伟杨永长肖代雯黄波胡琦黄文芳; 关键词：糖尿病肾病光谱法基质辅助激光解吸电离 TAU蛋白质类蛋白质阵列分析

尿蛋白标志物模型诊断糖尿病肾病的初步研究被引量：5: 2009年; 目的探索基于Au蛋白芯片的尿蛋白标志物模型早期快速诊断糖尿病肾病(DN)的应用价值。方法应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术及Au芯片检测86例DN患者、40例糖尿病(DM)患者及55名健康人(对照组)尿蛋白质谱。获得的谱图用Biomaker Wizard3.1软件筛选差异蛋白,通过BPS软件建立决策树辨别分析模型,评价其临床诊断价值。部分筛选的差异蛋白通过比对标准蛋白质谱数据进行鉴定。结果DN患者与对照组尿差异蛋白质峰有37个(P<0.05),BPS筛选66 916质荷比(m/z)蛋白建立的模型诊断DN敏感度100%,特异度97.78%。对DM和DN患者尿蛋白质谱图分析后得到24个差异蛋白质峰(P<0.05),BPS筛选4 008、11 619、66 916 m/z蛋白建立的模型区分两者的灵敏度和特异度均为100%。比对标准蛋白质谱数据,DN患者尿中11 619、23529、66 916、79 378 m/z蛋白,可能分别为β_2-微球蛋白、α_1-微球蛋白、白蛋白、转铁蛋白。结论利用SELDI及Au芯片检测尿标志蛋白在鉴别蛋白尿来源、DN快速诊断及肾损害评估中具有重要应用价值。; 姜伟杨永长肖代雯黄波胡琦黄文芳; 关键词：糖尿病肾病蛋白标志物

结核杆菌蛋白质组学研究进展被引量：3: 2008年; 胡琦黄文芳冯文莉; 关键词：结核杆菌蛋白质组结核疫苗亚细胞蛋白质组

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌表型及基因型分析: 目的了解我院临床分离的大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型分布情况。方法对2007年1月- 2007年10月我院临床分离的88株大肠埃希菌进行耐药分析,采用双纸片扩散法检测超广谱β-内酰胺酶,PCR扩...; 肖代雯喻华传良敏杨永长刘华黄文芳廖维金胡琦; 文献传递

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