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重组菌株及其构建方法与在产菜油甾醇中的应用: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及重组菌株及其构建方法与在产菜油甾醇中的应用。本发明构建了表达DHCR7基因且ERG5基因失活的重组菌株，该菌株还过表达乙酰CoA代谢相关基因，该重组耶氏解脂酵母底盘菌株通过调节胞质内乙...; 王颖张羽姚明东肖文海刘宏周晓元英进; 文献传递

一种重组酵母菌株及其构建方法和应用: 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种重组酵母菌株及其构建方法和应用。所述重组酵母菌株敲除gal1、gal7、gal10和ypl062w基因，且包含经酵母同源重组整合到基因组上的9个基因片段。本发明构建四敲酵母菌株，为生...; 肖文海陈艳李霞元英进

一种工程菌及其构建方法与在制备藏红花酸中的应用: 本发明涉及基因工程领域，尤其涉及一种工程菌及其构建方法与在制备藏红花酸中的应用。本发明提供的工程菌中过表达CrtZ基因和CCD基因。相对于现有技术中的通过组织培养等方法进行藏红花酸的生物合成具有更为环保、成本低廉的优势，...; 肖文海梅雪昂陈艳王颖元英进; 文献传递

产蒎烯人工酵母细胞的构建被引量：7: 2019年; 蒎烯可衍生为高能量密度燃料,但在酿酒酵母中的全生物合成却未见报道。酿酒酵母由于拥有强大的蛋白表达和翻译后修饰系统以及完整的内膜系统,相比于大肠杆菌等原核生物更适于P450等蛋白的表达,因此将酿酒酵母作为宿主细胞,对于蒎烯或者其他物质实现如"疯狂碳环"的高能量化是至关重要的。本研究在酿酒酵母底盘中表达内源焦磷酸香叶酯合成酶(ERG20)的突变体ERG20ww和火炬松来源的蒎烯合酶(PtPS)构建了蒎烯的合成路径。通过截短PtPS N端2～51位氨基酸残基(tPtPS),蒎烯产量较初始产量(0.329 mg·L^(-1))提高了2.23倍。在过表达异戊二烯焦磷酸异构酶(IDI1)和RNA聚合酶Ш负调控因子(MAF1)的基础上,表达ERG20ww和tPtPS的融合蛋白,蒎烯产量进一步提高了5.16倍。通过将内源基因ERG20启动子原位替换为弱启动子HXT1,下调ERG20的转录,蒎烯的产量提高了26.0%。最终通过调节发酵过程中的培养基pH使蒎烯产量达11.7 mg·L^(-1),较初始产量提高了34.5倍。本研究在酿酒酵母中实现蒎烯的从头合成,并获得已知蒎烯摇瓶水平的最高产量。; 陈天华张若思姜国珍姚明东姚明东王颖刘宏元英进; 关键词：代谢工程合成生物学蒎烯酿酒酵母

影响多步脱氢酶CrtI功能的关键结构特征探索: 2019年; 在生物体内存在可催化多步连续反应的通用酶,对生物代谢过程具有重要作用。八氢番茄红素脱氢酶(CrtI)作为典型代表,可以催化多步连续脱氢反应,生成番茄红素等具有重要价值的产物。本文以酿酒酵母为底盘研究CrtI的催化功能特征。首先通过组合设计与筛选番茄红素合成路径中的三种外源酶CrtE、CrtB和CrtI,发现CrtI是主要的限制因素,且三孢布拉氏霉菌来源的CrtI (BtCrtI)表现出优异的催化功能。通过生物信息学与蛋白结构分析发现BtCrtI的S311残基是连接和稳定活性中心结构的关键。随后通过分析该位点的饱和突变结果,揭示了该位点的氨基酸残基类型对活性中心结构和功能的显著作用,为酶的设计和改造提供了新的思路。同时发现CrtI的活性差异未对合成路径中的类胡萝卜素的代谢流造成扰动,表明CrtI是番茄红素的产量和纯度的决定因素。; 陈琛王颖王颖陈艳刘宏肖文海; 关键词：合成生物学生物催化八氢番茄红素脱氢酶

产紫杉二烯的菌株与构建方法: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及产紫杉二烯的菌株与构建方法。本发明研究发现，紫杉二烯产量低与宿主中表达的紫杉二烯合成酶(TS)的降解密切相关。通过敲除糖基化酶，避免了TS的错误糖基化修饰，从而使TS降解问题得到了改善...; 元英进张成龙姚明东肖文海王颖周晓咸良

一种重组酵母菌株及其应用: 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种重组酵母菌株及其应用。本发明所述重组酵母菌株为发酵生产香叶醇、香叶基香叶醇、青蒿二烯、脂肪酸、酵母固醇中一种或两种以上产物的酵母菌株，并且敲除YPL062W基因。本发明发掘了酵母中Y...; 李霞陈艳肖文海王颖姚明东元英进

一种重组耶氏解脂酵母菌株及其构建方法和应用: 本发明涉及基因工程技术领域，具体公开了一种重组耶氏解脂酵母菌株及其构建方法和应用。本发明所述重组耶氏解脂酵母菌株基因组包含SEQ ID NO:1-3任意一项所示的核苷酸序列。本发明通过OE-PCR方法构建单基因表达盒表达...; 肖文海杜昊星王颖元英进; 文献传递

酿酒酵母工程菌及其构建方法与应用: 本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及酿酒酵母工程菌及其构建方法与应用。本发明提供的保藏编号为CGMCC No.26221的酿酒酵母，是在底盘菌酿酒酵母SyBE_Sc14D18的基础上经过定点突变、常压室温等离子体诱变和过...; 元英进周魁姚明东肖文海王颖梁楠

生产β-月桂烯的重组酵母及方法: 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种生产β‑月桂烯的重组菌株及其方法，本发明在强化MVA路径的底盘菌的基础上，通过β‑月桂烯合酶MS来源的筛选、亚细胞器定位、酶融合以及底盘细胞和发酵过程优化的研究，利用基因工程手段实现了...; 元英进舒钰洁肖文海姚明东王颖周晓咸良李霞

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肖文海