目的探讨IL-1β对人真皮成纤维细胞(human dermal fibroblast,HDF)的细胞抑制率、促血管生成因子和炎症因子分泌的影响。方法 CCK8法检测不同浓度IL-1β对HDF的细胞抑制率,ELISA法检测3,10ng/m L IL-1β处理HDF24h后上清中血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、IL-6的表达。结果 0.3、1、3、10ng/m L IL-1β对HDF的抑制率分别为(1.22±0.78)%,(3.72±1.21)%,(9.10±2.60)%,(14.42±3.36)%。3、10ng/m L IL-1β作用于HDF 24h后,两组上清的VEGF、FGF水平较空白对照组均升高(FGF P<0.05,VEGF P<0.01),3,10ng/ml IL-1β两个浓度组间无统计学差异。3、10ng/m L IL-1β两组HDF上清中IL-6浓度较空白对照组均增加(P<0.05,P<0.001),且10ng/m L IL-1β组较3ng/m L组IL-6浓度更高,有统计学差异(P<0.001)。结论 IL-1β可促进HDF分泌VEGF、FGF和IL-6,提示IL-1β可能通过促进成纤维细胞分泌促血管生成和炎症因子,进而促进肿瘤生成、浸润和转移。
目的探索新生隐球菌GXM能否影响脑微血管内皮细胞基因的表达,为进一步研究隐球菌嗜中枢性的分子机制提供线索。方法使用Roche Nimble Gen 12×135K小鼠基因表达谱芯片,筛选小鼠脑微血管内皮细胞系b End.3与不同浓度新生隐球菌GXM作用后差异表达的基因;结合基因本体论(Gene Ontology),使用top GO进行差异基因GO分析,结合GO语义挖掘与隐球菌侵袭中枢神经系统能力相关的差异表达基因的信息;采用荧光实时定量PCR对重要基因PIK3C2G和ADAMDEC1的表达水平变化加以验证。结果 b End.3细胞与新生隐球菌GXM作用前后基因表达对比发现,实验组GXM(90μg/m)组总共有402个基因表达上调,296个基因表达下调,GXM(180μg/m)组总共有421个基因表达上调,564个基因表达下调,细胞膜、细胞骨架、磷酸肌醇-3-激酶活化、1-磷酸肌醇-3-激酶活化、细胞紧密连接等生物过程差异表达基因较为富集;对PIK3C2G基因和ADAMDEC1基因表达水平变化进行荧光定量PCR验证,结果与芯片结果一致,基因表达水平不同程度上升,且与GXM浓度正相关。结论新生隐球菌GXM能够影响脑微血管内皮细胞基因表达,PIK3C2G基因、ADAMDEC1基因表达上调可能和隐球菌穿越血脑屏障有关。
