聂作明
- 作品数:115 被引量:138H指数:6
- 供职机构:浙江理工大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划浙江省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 蛹虫草口服片剂及其制备方法
- 本发明提供一种蛹虫草口服片剂,该片剂为固体片剂,含水量在5%以下,固体成分包括以下重量百分比的各组分:60-90%蛹虫草、5-20%虫草素提取物、0-20%腺苷提取物,其中虫草素提取物、腺苷提取物为从蛹虫草中提取所得。该...
- 陈剑清张耀洲吕正兵陈健聂作明
- 文献传递
- 家蚕JAB1/CSN5蛋白的基因克隆表达及亚细胞定位被引量:4
- 2009年
- JAB1/CSN5是COP9信号复合体(constitutive photomorphogenic signalosome CSN)的第5个亚基,内嵌的JAMM基序是CSN参与蛋白的泛素化降解途径并调控生物体生长发育过程的异构酶活性位点。在家蚕蛹cDNA文库中筛选到的一条基因序列,其ORF长度为1047 bp,预测编码蛋白含有JAB1/CSN5保守结构域JAB-MPN,因此命名为BmJM。将BmJM基因的ORF插入到载体pET-28a(+)的多克隆位点,构建重组表达质粒pET-28a(+)-BmJM,于E.coliRosetta菌中进行原核表达,重组蛋白以包涵体形式存在。以纯化后的重组蛋白为抗原免疫大白兔获得BmJM的多克隆抗体,采用RT-PCR、Western blotting方法对BmJM基因在家蚕不同发育时期和组织中的转录及蛋白表达水平进行分析,发现BmJM蛋白在家蚕5龄幼虫的生殖腺表达量最高,而在其他组织中表达量较少,由此初步揭示了JAB1/CSN5在家蚕生长发育过程中的作用。亚细胞定位测定表明BmJM蛋白在细胞质近核区域含量最高,在细胞核中也有分布。
- 许红姚斐盛清吕正兵陈健聂作明王丹刘立丽沈红丹舒建洪舒特俊陈剑清吴祥甫张耀洲
- 关键词:家蚕基因克隆荧光定量PCR亚细胞定位
- 家蚕组织中异柠檬酸脱氢酶的原核表达及其乙酰化的研究
- 乙酰化修饰发生在蛋白质赖氨酸残基的侧链上,这种修饰作用不仅中和了赖氨酸残基侧链上的正电荷,增加了侧链的疏水性和体积,而且破坏了它形成氢键的能力,发生乙酰化修饰的蛋白质会改变其生化特性或构象。因此当蛋白质受到可逆的乙酰化修...
- 程旭升聂作明盛清
- 关键词:家蚕异柠檬酸脱氢酶原核表达
- 文献传递
- 家蚕BmTRAPα基因的原核表达及功能研究
- BmTRAPα属于TRAP家族,是典型的一次跨膜蛋白,主要分布在内质网上。最早发现的TRAPα是1个糖基化蛋白,大小为34KD,它受到Ca的调控,分布在内质网膜和核被膜,在人类骨髓细胞系中,TRAPα的mRNA转录本受到...
- 朱立明童富淡张耀洲刘俊郑青亮吕正兵聂作明陈健于威
- 文献传递
- 灵芝子实体microRNAs的鉴定
- 目的:MicroRNAs在许多生物学过程的调节中起着重要的作用,灵芝则是著名的药食两用药材,对灵芝microRNA进行初步研究,为深入了解灵芝microRNA的作用机制和生物学功能奠定基础。方法:采用Direct-zol...
- 李斌程旭升汤滢邱银平刘立丽聂作明盛清
- 关键词:高通量测序QRT-PCR
- 文献传递
- 利用家蚕杆状病毒体外表达系统合成蛋白质的方法
- 本发明公开了一种利用家蚕杆状病毒体外表达系统合成蛋白质的方法:在家蚕杆状病毒提取液中加入pUC19-P10-GFP重组质粒及蛋白酶抑制剂,25-29℃水浴,即得目的蛋白的表达。本发明所述的方法不受细胞的限制,可在短时间内...
- 张耀洲夏佳音陈健吕正兵陈琴聂作明盛清
- 文献传递
- 生物化学课程中助力学生思维能力提升的教学方法探索与实践被引量:1
- 2021年
- 提升大学生的思维能力,对培养国家创新驱动发展亟需的创新型人才具有重要性和迫切性,也是"两性一度"课程建设的必然要求。本文立足于生物化学课程教学,秉持"以学生为中心"理念,围绕思维能力培养的策略,针对大学生逻辑思维、批判性思维、创新思维等思维能力的培养,创新教学方式,运用多元教学方法进行了长期的探索与实践。
- 盛清欧文斌徐向群聂作明代琦梁宗锁
- 关键词:思维能力教学方法逻辑思维批判性思维创新思维
- 幼年大鼠和老年大鼠肠道菌群结构及多样性分析
- 2021年
- 为研究幼年大鼠和老年大鼠肠道菌群的结构及多样性,对7只幼年大鼠(1.5月龄)和5只老年大鼠(24月龄)肠道菌群的构成进行了比较,收集相同环境下饲养的幼年组和老年组大鼠的粪便,对其进行16S核糖体RNA基因V3+V4区的测序以分析肠道菌群的构成。结果表明:幼年组大鼠个体间肠道菌群结构差异较大,而老年组大鼠相对较集中,两组大鼠肠道菌群在门级水平上相对丰度相似;幼年组大鼠乳杆菌科下的微生物所占丰度高于老年组大鼠(p<0.05),而梭菌目瘤胃菌科下微生物丰度低于老年组大鼠(p<0.05);老年组大鼠的肠道生物多样性高于幼年组大鼠,老年组大鼠的肠道菌群多样性较高,菌群种类丰富,但其中有害菌比例显著升高。该结果填补了不同年龄大鼠肠道菌群结构研究的空白,为改善实验用大鼠的健康状况以延长其寿命提供一定的理论基础。
- 孙亦阳顾超广华小庆王凯旋盛清聂作明王丹
- 关键词:老年大鼠
- 家蚕脂围蛋白(PLIN)基因的序列分析及表达与亚细胞定位研究
- 2009年
- 脂围蛋白(perilipin)与脂肪细胞脂类代谢的调节有关。从家蚕蛹cDNA文库中筛选到一条cDNA开放阅读框(ORF)序列长度为918 bp的基因,预测其编码305个氨基酸残基,蛋白分子质量约32.5 kD。经NCBI比对发现该蛋白具有部分脂围蛋白的保守结构域,因此将该ORF序列命名为BmPLIN基因。将该基因插入到载体pET-28a(+)的多克隆位点,构建重组表达质粒pET-28a(+)-BmPLIN,并转化大肠杆菌中进行原核表达得到带有His标签的融合蛋白,表达的融合蛋白以包涵体形式存在。用纯化后的融合蛋白为抗原免疫大白兔获得多克隆抗体,ELISA间接法测定抗体的效价达到1∶12 800以上。通过荧光定量PCR和Western blotting技术对BmPLIN基因及其编码蛋白在家蚕5龄幼虫各个组织器官中的转录、表达水平进行分析的结果是:BmPLIN基因mRNA在家蚕5龄幼虫各组织器官中的转录水平由高到低依次为生殖腺(卵巢和睾丸)、脂肪体、肠、表皮、头部、马氏管、丝腺、气门,在家蚕5龄幼虫的生殖腺(卵巢和睾丸)中有明显的BmPLIN蛋白特异条带。以家蚕Bm5细胞进行免疫细胞实验的结果显示,BmPLIN蛋白在细胞质和细胞核中均有分布。
- 姚斐许红舒特俊盛清吕正兵陈健聂作明王丹刘立丽沈红丹舒建洪陈剑清吴祥甫张耀洲
- 关键词:家蚕蛋白纯化亚细胞定位
- 家蚕孤雌生殖差异脂蛋白30K lipoprotein precursor基因的克隆与生物信息学分析被引量:5
- 2008年
- 应用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离家蚕孤雌生殖蚁蚕总蛋白,并和正常蚁蚕总蛋白进行比较,得到46个可能与家蚕孤雌生殖相关的差异蛋白点。对这些差异蛋白点进行胶内酶解后基质辅助激光解吸电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF-TOFMS)分析,经数据库搜索鉴定,确定其中一个差异蛋白点为脂蛋白30Klipoprotein precursor(30KLPP)。通过5′-RACE技术克隆到30KLPP脂蛋白的全长cDNA序列。生物信息学分析显示该差异蛋白基因全长917bp。编码261个氨基酸,理论分子质量为30.013kD,等电点为7.193;结构域和三级结构预测显示该蛋白包含1个Lipoprotein_11结构域和12个β-折叠。预测其信号肽概率为1.000,定位在1~20aa区域,即可能存在信号肽。细胞定位预测显示该蛋白可能分泌到胞外(SP值为0.934)。分析结果有助于进一步研究30KLPP脂蛋白结构与功能的关系。
- 王丹聂作明龙晓辉刘立丽陈健吕正兵陈芳吴祥甫张耀洲
- 关键词:家蚕孤雌生殖LPP