罗轶奇
- 作品数:4 被引量:21H指数:2
- 供职机构:海南大学农学院苦丁茶研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 与苦丁茶冬青雄性性状连锁的RAPD标记被引量:3
- 2012年
- 通过正交试验设计对影响苦丁茶冬青RAPD-PCR反应的5种因素4水平进行优化试验,最终确定苦丁茶冬青RAPD-PCR的最佳反应体系为:在25μL反应体系中,DNA模板20ng,Mg2+2.5mmol·L-1,引物浓度为0.3μmol·L-1,Taq聚合酶浓度为2.0U,dNTPs浓度为200μmol·L-1。最佳的RAPD-PCR扩增程序为:94℃预变性5min,然后94℃变性30s,36℃退火30s,72℃延伸120s,进行40个循环,最后72℃延伸10min;4℃保存。然后通过RAPD技术筛选了91条随机引物,共计有24条引物能在雌/雄DNA/样品池间显示多态性,其中引物S164和S191分别扩增得到2个雄性特异标记S164-900和S191-800。经多次重复实验,RAPD标记均能在雄性个体中稳定出现,故此标记可应用于苦丁茶冬青性别的早期鉴定。
- 罗轶奇李娟玲刘国民成善汉潘学峰翟丽艳
- 关键词:RAPD标记性别鉴定
- 与苦丁茶炭疽病抗性基因连锁的RAPD标记被引量:2
- 2013年
- 为了研发出与苦丁茶炭疽病抗性基因紧密连锁的RAPD-SCAR特异标记,本研究中首先利用92条RAPD随机引物对苦丁茶冬青中已知对炭疽病高抗或高感的不同种质材料进行RAPD分析,并从中寻找到4个与苦丁茶炭疽病抗性基因紧密连锁的RAPD特异标记特异性片段S69-300,S227-300,S227-2000和S247-400。后续的研究可对这些RAPD特异片段进行回收,扩增和测序,并将测序结果作为开发与苦丁茶炭疽病抗性基因紧密连锁的SCAR标记的基础。
- 翟丽艳李娟玲刘国民谢俊罗轶奇成善汉潘学峰
- 关键词:RAPD
- 利用单因子和正交设计双重实验法优化鹧鸪茶RAPD-PCR反应体系被引量:14
- 2011年
- 为了建立鹧鸪茶RAPD-PCR的优化反应体系,首先通过单因素试验选定其各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验设计方法,对影响鹧鸪茶RAPD-PCR反应的5种因素进行4水平优化试验。并运用SAS软件对试验结果进行了分析,最后确定优化的RAPD-PCR反应体系为:10×Buffer缓冲液2.5μL+Mg2+2.5mmol/L+dNTPs0.2mmol/L+TaqDNA聚合酶1.5U+S28引物0.48mmol/L+80ng模板,定容至25μL。PCR扩增程序为:94℃预变性4min,然后按94℃变性30s,38℃退火45s,72℃延伸120s,进行45个循环,最后72℃延伸10min;16℃保存。该优化的RAPD-PCR反应体系具有良好的稳定性和重现性,可应用于鹧鸪茶不同居群间亲缘关系和遗传多样性分析。
- 李娟玲刘国民曹嵩晓罗轶奇
- 关键词:RAPD
- 与苦丁茶冬青性别相关的RAPD-SCAR标记的研究
- 苦丁茶冬青(Ilex kudingcha C. J. Tseng)是雌雄异株的多年生乔木,其老叶和嫩芽均可饮/药两用,具有多种保健作用和药用功效。此外,该种植物还是一种良好的园林观赏树种;其优良的雌性植株可用于观果,优良...
- 罗轶奇
- 关键词:性别分子标记RAPDSCAR