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肌球蛋白轻链激酶在肿瘤转移中的作用及其分子机理研究: 叶丽虹张晓东吴莲英尤嘉琮秦宵然; 近年来发现肌球蛋白轻链激酶(MLCK)与肿瘤的转移和浸润有密切的关系，但其相关的分子机制及信号转导途径尚不清楚。在前期研究获得了高转移乳腺癌细胞株LM-MCF-7和相应动物模型基础上，该项目检测了MCF-7和LM-MCF...; 关键词：; 关键词：MLCK 肿瘤转移信号途径

原肌球蛋白、波形纤维蛋白和热休克蛋白70在肝癌转移亚细胞中表达上调被引量：17: 2005年; 建立并应用人H74 0 2肝癌细胞SCID鼠肿瘤转移模型 ,从转移肺组织经原代细胞培养 ,筛选并建立转移亚细胞系M H74 0 2 ,进而运用蛋白质组学技术筛选肿瘤转移相关蛋白 .通过二维电泳技术检测 ,比较M H74 0 2细胞和亲本H74 0 2细胞的总蛋白 ,从多个差异蛋白质点中选择出 3个在M H74 0 2细胞中表达明显上调的蛋白质点进行ESI QUAD TOF质谱分析 ,并在MSDB公共蛋白数据库中进行同源比较和分析鉴定 .初步确定这 3个蛋白质分别为原肌球蛋白 (tropomyosin) ,波形纤维蛋白 (vimentin)和热休克蛋白 70 (heatshock 70protein ,HSP70 ) .这些蛋白质参与细胞骨架构成、蛋白质折叠和蛋白质相互作用等许多正常生理活动 ,并有报道原肌球蛋白和波形纤维蛋白与肿瘤转移有关 .利用蛋白质组学方法发现 ,在肝癌转移亚细胞M H74 0 2中 ,原肌球蛋白、波形纤维蛋白和热休克蛋白 70表达明显上调 ,进一步揭示它们在肿瘤转移中具有重要的作用 .; 叶丽虹秦宵然张晓东齐众钱令嘉侯志波王洪辉徐少峰; 关键词：肝癌蛋白质组学原肌球蛋白热休克蛋白70

非磷酸化肌球蛋白在血小板衍生生长因子诱导的血管平滑肌细胞迁移中的作用被引量：2: 2007年; 为了阐明非磷酸化肌球蛋白在平滑肌细胞迁移中的作用,研究探讨了非磷酸化肌球蛋白是否介导了血小板衍生生长因子(PDGF)诱导豚鼠脑基底动脉平滑肌细胞(GbaSM-4)的迁移。研究结果显示,20ng/ml以下剂量的PDGF可诱导GbaSM-4细胞发生迁移,此时肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化水平无变化。该迁移作用可被肌球蛋白特异性抑制剂blebbistatin所拮抗。应用RNA干扰技术抑制肌球蛋白轻链激酶表达,经免疫印迹检测经果显示,MLC20的磷酸化水平发生了显著下降;但对PDGF诱导的迁移作用无影响;在RNA干扰后blebbistatin也可抑制其迁移作用。体外ATP酶活性测定结果显示,blebbistatin对从平滑肌中提取的非磷酸化肌球蛋白的ATP酶活性有明显的抑制作用,其主要作用位点位于肌球蛋白头的头部S1。上述结果提示,非磷酸化的肌球蛋白参与了PDGF诱导的平滑肌细胞迁移。; 秦宵然张晓东叶丽虹; 关键词：平滑肌细胞 ATP酶活性

Dkk-1/Wnt/β-catenin信号途径在肝癌细胞转移中的作用及其分子机制的研究: 本文对Dkk-1/Wnt/β-catenin信号途径在肝癌细胞转移中的作用及其分子机制进行了研究。主要内容及结果过如下： ①将人肝癌细胞H7402接种联合免疫缺陷(SCID)鼠，60天后在SCID鼠身体赢弱时，...; 秦宵然; 关键词：肝癌转移蛋白表达病理细胞学; 文献传递

人肝癌转移亚克隆细胞系及其建立方法: 本发明公开了一种人肝癌转移亚克隆细胞系及其建立方法，所述人肝癌转移亚克隆细胞系是用下述方法建立的：将人肝癌细胞H7402单细胞悬液接种于SCID鼠；确认转移部位为肺脏；原代培养；传代培养，当细胞传代到第三代以后，将培养液...; 叶丽虹张晓东秦宵然朱惠芳王洪辉; 文献传递

肝癌转移亚细胞系的建立及分离肝癌转移相关基因和蛋白的研究: 该研究采用人肝癌细胞H7402,腋后背部皮下接种SCID鼠,接种后7天时成瘤,接种后66天时,在荷瘤鼠赢弱时引颈处死,取其肺组织,进行原代和传代细胞培养,传代10代以后,细胞形态不变,且可以连续传代,将该细胞系命名为M-...; 秦宵然; 关键词：肝癌肿瘤转移蛋白质组学肿瘤转移相关基因; 文献传递

应用SCID鼠筛选肝癌转移性亚克隆及M-H7402亚细胞系的建立被引量：6: 2004年; 本研究应用人肝癌细胞SCID鼠转移模型,筛选和建立肝癌转移细胞系,旨在为肝癌转移研究提供实验材料.采用人肝癌细胞H7402,腋后背部皮下接种SCID鼠,接种后66天时,在荷瘤鼠羸弱时引颈处死,取其肺组织,进行原代细胞培养和传代培养,获得肝癌细胞H7402的亚细胞克隆,命名为M-H7402.然后,对M-H7402细胞进行了生物学鉴定,检测了细胞形态、染色体、细胞动力学、细胞周期、甲胎蛋白表达、癌基因表达和转移相关基因表达等指标.结果显示,M-H7402细胞的生长、增殖和形态等与亲本细胞H7402十分相近,其染色体形态仍为人类核型,众数维持在72～80之间,占75.0%.RT-PCR检测结果显示,M-H7402细胞甲胎蛋白表达为阳性.Western blot检测结果显示,与亲本细胞H-7402相比,癌基因C-myc表达水平较高,转移抑制基因nm23的表达水平明显下调.从肺组织中获得的肝癌转移细胞系M-H7402,在体外可连续传代培养,细胞形态不变.应用SCID鼠筛选获得的亚细胞克隆,与亲本细胞形成配对关系,可为肝癌细胞转移的研究提供新的实验材料.; 叶丽虹秦宵然张晓东王洪辉蒋斯明王长晔吴晶辉朱惠芳赵轼轩蔡兵; 关键词：肝癌肿瘤转移 SCID鼠细胞系癌基因

肝癌转移相关基因的分离及其基因疫苗的研究: 叶丽虹张晓东吴莲英秦宵然刘新元王洪辉尤嘉琮吴晶辉王长晔徐少峰; 采用SCID（Severe Combined Immunodeficiency，SCID）小鼠，建立了人肝癌SCID小鼠转移模型，从转移的肺组织中经原代培养获得了新的人肝癌高转移倾向的细胞系（M-H7402），并进行了生...; 关键词：; 关键词：肝癌转移相关基因基因疫苗

人肝癌转移亚克隆细胞系及其建立方法: 本发明公开了一种人肝癌转移亚克隆细胞系及其建立方法，所述人肝癌转移亚克隆细胞系是用下述方法建立的：将人肝癌细胞H7402单细胞悬液接种于SCID鼠；确认转移部位为肺脏；原代培养；传代培养，当细胞传代到第三代以后，将培养液...; 叶丽虹张晓东秦宵然朱惠芳王洪辉; 文献传递

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秦宵然