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西尼罗病毒NS1基因的原核表达与抗原性鉴定: 通过PCR方法扩增西尼罗病毒(WNV)NY99株NS1基因,并将其克隆至原核表达载体pMAL-c2X上,构建出重组表达质粒pc2X-NS1,经IPTG诱导得到可溶性的麦芽糖结合蛋白(MBP)-NS1融合蛋白(MBP-NS...; 马健男吴东来杨涛王群张维军徐青元田野林燕宋红梅步志高; 关键词：西尼罗病毒原核表达融合蛋白; 文献传递

猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定被引量：2: 2010年; 为重组表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白,本研究将RT-PCR获得的PRRSV CH-1a株M蛋白基因,克隆于pMD18-T载体中,经测序鉴定正确后,亚克隆至牛痘病毒重组转移质粒pSC11中,构建了转移重组质粒pSC11-PRRSV-M。将pSC11-PRRSV-M在脂质体的介导下转染WR株牛痘病毒感染的TK-143细胞,在含有X-gal的琼脂培养基上通过蓝斑筛选含有PRRSV M基因的重组病毒rWR-PRRSV-M。Western blot与IFA检测表明,重组病毒成功表达了PRRSV M蛋白,而且所表达的蛋白保持了良好的免疫原性。动物实验表明,rWR-PRRSV-M所表达的PRRSV M蛋白在免疫小鼠体内诱生了抗PRRSV的抗体。rWR-PRRSV-M的构建,为进一步探讨PRRSV M蛋白免疫原性提供了基础数据,也为PRRS重组活载体疫苗的研究奠定了基础。; 张维军田野林燕王群徐青元孙庆歌刘霓红杨涛田志军步志高童光志李文京吴东来; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白

猪附红细胞体实验动物模型的建立被引量：19: 2007年; 为建立一种合适的猪附红细胞体病动物模型,利用摘除脾和/或注射地塞米松的昆明小白鼠,以腹腔注射方式人工感染猪附红细胞体,通过血液涂片镜检、PCR检测、临床症状观察及病理剖检对感染情况进行了鉴定。结果显示,猪附红细胞体能够经腹腔注射感染昆明小白鼠,且感染鼠表现出与猪附红细胞体病相似的临床症状。结果表明,猪附红细胞体实验动物模型已成功建立,并证实啮齿类动物在附红细胞体的传播过程中发挥着重要作用。; 刘冰张守发于龙政贾立军田野; 关键词：猪附红细胞体实验动物模型 PCR

PRRSV GP5蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定被引量：1: 2009年; 为构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5重组牛痘病毒,本研究通过RT-PCR获得PRRSVCH-1a株GP5蛋白基因,将其克隆至pMD18-T载体。经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚克隆至转移质粒pSC11中,构建重组转移质粒(pSC11-GP5)。将pSC11-GP5转染WR株牛痘病毒感染的TK-143细胞,与牛痘病毒进行同源重组。在含有X-gal的琼脂培养基上进行蓝斑筛选,获得了含有PRRSV GP5基因的重组病毒(rWR-PRRSV-GP5)。IFA及动物试验表明,重组病毒表达了PRRSVGP5蛋白,并在免疫小鼠体内诱生了较强的PRRSV抗体。实验表明,该重组病毒所表达的PRRSV GP5蛋白保持了良好的抗原性,为进一步研究PRRSV GP5蛋白免疫原性提供了基础数据,也为PRRS重组活载体疫苗的研究奠定了基础。; 田野张维军林燕王群杨涛步志高童光志张守发吴东来; 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒 GP5蛋白

西尼罗病毒NS1蛋白单克隆抗体及其识别的B细胞表位和应用: 本发明公开了一种西尼罗病毒NS1蛋白单克隆抗体及其识别的B细胞表位和应用。本发明筛选得到一株稳定分泌抗WNV-NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其微生物保藏号是：CGMCC No.4242。该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆...; 吴东来杨涛刘霓红王群孙恩成林燕田野; 文献传递

西尼罗病毒NS1蛋白单克隆抗体及其识别的B细胞表位和应用: 本发明公开了一种西尼罗病毒NS1蛋白单克隆抗体及其识别的B细胞表位和应用。本发明筛选得到一株稳定分泌抗WNV-NS1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其微生物保藏号是：CGMCC No.4242。该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆...; 吴东来杨涛刘霓红王群孙恩成林燕田野

新激酶基因p93转基因鼠模型的建立及功能初探: 为了寻找和研究与心血管有关的重要功能基因及其表达模式，本室通过构建正常成人心脏和主动脉cDNA文库，并在大规模分离筛选新的ESTs的基础上，克隆到一个心肌特异性表达的新蛋白激酶TNNI3K。该基因定位在1号染色体短臂3区...; 田野; 关键词：转基因鼠表型分析心肌酶谱免疫共沉淀房室间隔缺损; 文献传递

犬新孢子虫NcSRS2基因原核表达质粒的构建被引量：2: 2008年; 根据已发表的犬新孢子虫NcSRS2基因序列,设计1对含有EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点的引物。以提取犬新孢子虫虫体基因组DNA为模板,应用PCR扩增获得NcSRS2 ORF基因片段,将此基因片段克隆到pMD18-T Simple载体上,用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切该片段,回收得到含有两个酶切位点黏端的Nc-SRS2 ORF基因,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的PGEM-4T-2原核表达载体中,获得重组质粒pGEX-NcSRS2,经PCR鉴定,限制性内切酶分析和克隆片段序列测定比较,证实了重组质粒的正确性。; 丁德梁晚枫田野田万年贾立军张守发; 关键词：犬新孢子虫聚合酶链反应 NCSRS2基因

东北亚地区史前石构墓葬研究——以中国辽海与朝鲜半岛西北部为中心: 本文借鉴和运用近年世界史研究兴起的区域史研究理念和研究范式,以东北亚腹心地域的中国辽海与朝鲜半岛北部地区的史前石构墓葬为研究内容。所谓石构墓葬,是指全部或部分采用石质建材构筑墓室或地面标志的墓葬,主要包括积石冢、石棺墓、...; 田野; 文献传递

PRRSV GP5蛋白基因重组牛痘病毒的构建及免疫学初步研究: 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由PRRS病毒引起的猪的一种高度传染病，主要以妊娠母猪发生早产、流产、死胎、木乃伊胎、弱胎及各年...; 田野; 关键词：同源重组牛痘病毒; 文献传递

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