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人工合成人恶性疟原虫58肽抗原基因在大肠杆菌中的表达被引量：3: 1991年; 使用DNA合成仪合成的人恶性疟原虫58肽抗原基因,与大肠杆菌表达性载体质粒PWR450—Ⅰ重组,转化到大肠杆菌JM83中。用斑点杂交技术和电泳分析DNA方法筛选出阳性重组转化菌株,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳分析,证明合成基因在大肠杆菌中表达,产生与β—半乳糖苷酶融合的多肽。; 马维芳金福军钟雄林陈仕荣王昌才王启松闵永洁; 关键词：DNA合成恶性疟原虫抗原基因

三链DNA的形成抑制转录因子与乙肝病毒核衣壳启动子的结合: 1997年; 合成的寡核苷酸可缠绕于DNA双螺旋大沟内并以氢键与其相互作用形成三链DNA结构,这类寡核苷酸常简称为TFO(triplex-form-ing oligonucleotide)。通过TFO与靶基因结合形成局部的三链结构来抑制基因转录的技术被称为反基因策略(antigene strategy)。我们选择乙肝病毒(HBV)核衣壳启动子(Cp)内一近似同聚嘌呤·同聚嘧啶序列(1734～1754,ayw亚型,以EcoR Ⅰ切点为+1)为靶序列。; 刘定燮王昌才钟雄林; 关键词：乙肝病毒三链DNA 启动子核衣壳脱氧寡核苷酸 DNA双螺旋

离子对嘌呤·嘌呤-嘧啶型三链DNA稳定性的影响: 1997年; TFO(triplex-forming oligonucleotide)缠绕于Waston-Crick双螺旋大沟中并以Hoog-steen或反Hoogsteen氢键与其相互作用所形成的三股螺旋结构称为三链DNA。根据结构及碱基组成的不同可将它分为嘌呤(R)·嘌呤(R)-嘧啶(Y)(R·RY)和嘧啶·嘌呤-嘧啶(Y·RY)两种类型。离子对Y·RY型结构稳定性的影响已较为清楚,但对R·RY型尚未作系统研究。我们以乙肝病毒(HBV); 王昌才刘定燮钟雄林; 关键词：三链DNA 离子对嘧啶脱氧寡核苷酸分子生物学研究

乙肝表面抗原及恶性疟疾杂合抗原基因的重组克隆: 1997年; 乙型肝炎及疟疾流行全世界,是严重危害人类健康的传染病。由于疟疾的抗药性不断出现,乙肝缺乏有效的治疗措施,对于两种疾病疫苗的研究具有重要意义。我们将乙肝表面抗原与恶性疟杂合抗原基因串联,再与质粒pCITE2b重组,构建重组质粒,试图通过基因工程的方法得到既能对抗乙肝又能对抗恶性疟疾的疫苗。首先用PCR方法从HBV(adr亚型)基因组中扩增出编码HBsAg的S基因。; 于欣欣钟雄林王昌才陈仕荣刘定燮; 关键词：乙肝表面抗原恶性疟疾抗原基因重组克隆分子生物学研究重组子

一种钢包炉控制系统的设计与实现: 随着科学技术的发展,市场的国际化,企业的竞争日益加剧,宝钢股份不锈钢工程配备了LF精炼炉,以提高高品质不锈钢的生产能力及生产水平,应对越来越激烈的市场竞争。计算机控制水平的高低将直接影响LF工程投产后的生产运行及产品质量...; 王昌才; 关键词：钢包炉不锈钢生产 PLC控制现场总线工业以太网; 文献传递

恶性疟原虫杂合抗原基因的表达及其产物免疫功能的研究被引量：4: 1997年; 化学合成的人恶性疟原虫杂合多肽抗原 AB 基因,编码子孢子 CSP重复序列 NANP、CSPTh2R和红内期spf35.1、spf83.1、spf55.1、spf83.18、pf155/RESA-5’端重复区共7个不同免疫功能表位,与大肠杆菌质粒pWR450-1重组,构建成pWR450-1/AB表达载体。在乳糖操纵子调控下以β-半乳糖苷酶-恶性疟原虫杂合多肽抗原融合蛋白形式,在大肠杆菌中高效表达。表达产物经SDS-PAGE电泳分离纯化后,加福氏佐剂免疫家兔,诱导产生较高滴度的抗血清。抗血清对人恶性疟原虫体外生长有明显的抑制作用,24h抑制率为65.92％;72h的抑制率为72.63％。对照血清无抑制作用。分离纯化的表达产物能与鼠抗恶性疟原虫和疟疾患者抗血清起免疫反应。这些结果表明合成基因的表达产物具有较好的免疫原性。; 王昌才钟雄林陈仕荣胡亚芳马维芳王启松闵永洁; 关键词：恶性疟原虫抗原

乙肝反义抑制治疗的研究进展: 1996年; 反义RNA是一种能与mRNA分子互补的RNA,可特异抑制某一mRNA的加工、翻译以及DNA的复制,特异阻断该基因的表达。反义RNA最早在原核细胞中被发现,随后证实反义抑制为原核细胞基因表达调控的一种方式。在真核细胞中,直到1986年Williams等才首次在小鼠基因组中观察到RNA互补区,证实了真核细胞中反义抑制的存在。反义RNA的主要作用位点如下:①mRNA5’端非编码区,包括SD序列及核糖体结合位点;②mRNA5’编码区,包括起始AUG;③mRNA5’末端cap形成位点;④pre-mRNA外显子与内含子结合部位;⑤mRNApoly-A形成位点;⑥DNA复制的RNA引物;⑦外显子内部等。反义RNA通过与RNA互补结合,在RNA的转录、蛋白质的翻译。; 黄建生王昌才; 关键词：乙型肝炎

三链DNA的形成抑制DNA结合蛋白与启动子的结合被引量：3: 1998年; 电泳迁移分析方法及ＤＮａｓｅⅠ足迹实验表明２１ｎｔ脱氧寡核苷酸Ｇ３ＴＧ２ＴＧＴ２Ｇ５ＴＧ２ＴＧＴ（ＣＰ１）与乙肝病毒（ＨＢＶ）核心启动子（Ｃｐ）片段之间三链ＤＮＡ的形成有较高的特异性及稳定性．凝胶滞留实验显示，在大鼠肝细胞核提取物体外转录系统中，ＣＰ１可特异地抑制ＤＮＡ结合蛋白与Ｃｐ片段的结合，而不能与Ｃｐ结合形成三链ＤＮＡ的脱氧寡核苷酸ＣＰ３（ＴＧＴＧ２ＴＧ５Ｔ２ＧＴＧ２ＴＧ３）对蛋白与Ｃｐ的结合并无抑制作用．这些结果表明，三链ＤＮＡ的形成有可能抑制ＨＢＶＤＮＡ的转录．; 刘定燮王昌才; 关键词：三链DNA DNA 结合蛋白启动子乙型肝炎病毒

丙肝疫苗研究的困惑与希望被引量：1: 1995年; 约80％的非甲非乙型肝炎为丙型肝炎病毒(HCV)所致。与甲肝、乙肝不同的是,约有60％的丙肝呈慢性化,且容易发生肝硬化,并与肝细胞肝癌关系密切”,危害很大。长期以来,对丙肝的治疗一直悬而未决。近几年采用基因工程产物IFN-α、IFN-β等治疗,但很不理想。因此对丙肝的预防很重要。除了加强对抗-HCV及HCV RNA的检测外,人们已注意到HCV疫苗,但由于多种因素的影响,该疫苗的研制并不顺利。; 黄建生王昌才任大明; 关键词：疫苗研究基因转移丙肝非甲非乙型肝炎基因工程产物核衣壳蛋白

恶性疟口服活菌苗的免疫原性及安全性的初步研究被引量：2: 1995年; 在减毒鼠伤寒沙门氏菌ＳＬ３２６１中表达了人工合成的恶性疟杂合４５肽抗原基因，并在ＢＡＬＢ／ｃ小鼠及家兔中诱发出一定水平的特异性体液免疫及细胞免疫。在减毒菌中表达的融合抗原ＧＺ－Ａ可特异地识别兔抗ＧＺ－Ａ血清、鼠抗Ｐｆ血清及恶性疟患者血清，滴度分别为１：６４００、１：１０２４０及１：４。小鼠口服（ｐｏ）重组疫苗图ＳＬ３２６１（ｎＷＲＡ）后，细菌在肠道至少可寄生１月以上，且在体外仍然可以表达目的抗原。静脉注射（ｉｖ）活菌后首日可见菌血症。１０￣８ｃｆｕ量全身免疫（ｉｐ、ｉｖ）后可致小鼠死亡。ｉｐ、ｉｖ组脾脏肿大１～２倍，肝脏轻度肿大，而ｐｏ组则未见明显改变。清理切片显示肝脏轻度充血，汇管区有淋巴细胞聚集，枯否氏细胞轻度增生等；脾小体增生扩大，巨细胞明显增生等，上述改变以ｉｐ及ｉｖ组较为明显。结果说明，ＳＬ３２６１（ｐＷＲＡ）所表达的恶性疟原虫杂合抗原可特异地被抗Ｐｆ抗体所识别，活菌苗口服后可在肠道较长久地寄生，且不引起明显的毒副作用。; 黄建生王昌才任大明李全贞钟雄林; 关键词：鼠伤寒沙门氏菌减毒恶性疟原虫活菌苗

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