王新利
- 作品数：9 被引量：26H指数：3
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 镍接触工人中Cap43蛋白的过表达：一个潜在的筛查指标
- 2008年
- 目的通过检测钙激活蛋白43(Cap43)在镍接触工人尿液及血清中的蛋白表达情况,探讨Cap43表达在镍接触人群与非镍接触人群之间有无差异,及其表达高低与镍接触检体标本之间的关系。方法采用双抗夹心ELISA法检测150例镍接触工人[尿镍超标(>0.17μmol/ml)17例,尿镍未超标133例]及10例正常人群尿液及血清中Cap43的表达。结果尿液中Cap43的表达:尿镍超标组为(1.138±0.236)ng/ml,尿镍未超标组为(0.987±0.098)ng/ml,正常人群组为(0.609±0.012)ng/ml。血清中Cap43的表达:尿镍超标组为(2.4145±0.3475)ng/ml,尿镍正常组为(1.5614±0.5101)ng/ml,正常人群组为(1.2127±0.4135)ng/ml。结论Cap43表达与镍接触直接相关,尿中Cap43含量高低与血清中Cap43含量有正相关关系(r=0.7755,P<0.01),Cap43检测应以血清标本为宜,本实验结果为Cap43蛋白作为镍接触人群一个普查和疾病预防指标提供了有力的依据。
- 吴迪曹春燕王大庆张志强付立业王新利姜又红
- 关键词：镍血清尿液
- 树突状细胞分泌的exosomes体外诱导特异性CTL抗肾癌的初步研究被引量：1
- 2010年
- 目的提取树突状细胞外来体(DC)分泌的外来体(exosomes),检测其体外刺激同源T细胞活化和诱导特异性细胞毒性T细胞(CTL)抗肾癌769-P的免疫效应。方法从健康志愿者外周血单个核细胞中诱导培养DC,流式细胞术检测DC的表型;通过超速离心法结合超滤法制备DC分泌的exosomes,透射电镜观察exosomes的形态,MTT法检测DC分泌的exosomes诱导T细胞的增殖和特异性CTL对769-P的体外杀伤活性。结果超速离心法结合超滤法能从DC上清中分离exosomes,并且肿瘤抗原致敏DC分泌的exosomes能有效促进T细胞的增殖及特异性CTL抗769-P效应,T细胞增殖倍数达(1.68±0.22)%,CTL杀瘤活性为(38.23±2.16)%。结论抗原致敏DC分泌的exosomes能有效诱导激活具有较强杀瘤活性的肿瘤特异性CTL。
- 王新利李卿高婷付立叶王扬蒋涛姜又红
- 关键词：外来体细胞毒性T细胞肾癌
- 镍接触工人肺癌与矽肺患者血清中Cap43的表达情况被引量：1
- 2008年
- 目的探讨钙激活蛋白(Cap43)在镍接触肺腺癌患者和矽肺患者血清中的表达情况及其表达与镍接触之间的关系。方法采用双抗体夹心ELISA法检测5例镍接触肺腺癌患者血清、20例镍接触矽肺患者血清、23例镍接触工人血清、10例正常人群血清中Cap43的表达。结果血清中Cap43的表达情况:镍接触工人肺腺癌组(n=5)为(1.988±0.048)ng/ml;镍接触矽肺患者组(n=20)为(0.886±0.391)ng/ml;镍接触工人组(n=23)为(0.580±0.119)ng/ml;正常人群对照组(n=10)为(0.260±0.086)ng/ml。结论Cap43表达量随正常人群组→镍接触工人组→镍接触矽肺组→镍接触肺腺癌组走势呈上升趋势,且各组之间Cap43表达差异均有统计学意义。
- 吴迪曹春燕宋皆张志强王大庆王新利付立业姜又红
- 关键词：镍肺癌矽肺酶联免疫吸附试验
- DC-CIK共培养细胞联合索拉菲尼对肝癌细胞体内外的杀伤效应被引量：14
- 2010年
- 目的:观察DC、CIK共培养细胞(DC-CIK)联合索拉菲尼(sorafenib)对肝癌细胞BEL-7402的体内外杀伤效应。方法:取健康人外周血单个核细胞,加入不同细胞因子促进DC及CIK细胞成熟并混合共培养。CCK8试剂盒检测DC-CIK共培养细胞联合索拉菲尼对BEL-7402细胞的体外杀伤效应,Annexin V-FITC试剂盒检测两者联合对肝癌细胞凋亡率的影响。用肝癌细胞BEL-7402建立裸鼠皮下移植瘤模型,分为生理盐水对照组、索拉菲尼组、DC-CIK组、DC-CIK+索拉菲尼组,观察它们对裸鼠移植瘤生长的抑制作用。结果:联合组对肝癌细胞的杀伤率及诱导凋亡率均明显高于各单独治疗组,联合组杀伤率高达(75.24±1.91)%,是DC-CIK组的1.8倍,是索拉菲尼单药组的2.1倍(P<0.01);联合组诱导肝癌细胞凋亡率达(78.32±2.54)%,与单独治疗组相比差异有统计学意义(P<0.05)。体内实验表明,DC-CIK+索拉菲尼组可明显抑制裸鼠BEL-7402移植瘤的生长,抑制率为(83.37±0.16)%,与单独治疗组相比差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:DC-CIK共培养细胞联合索拉菲尼在体内、外可显著抑制肝癌细胞的生长,分子靶向治疗联合细胞免疫治疗可能成为肝癌综合治疗的方法之一。
- 李卿王新利王杨隋承光
- 关键词：树突状细胞索拉菲尼
- 索拉菲尼联合化疗对肝癌细胞株的抑制作用研究
- 2010年
- 研究索拉菲尼联合不同化疗药物对肝癌细胞株的体外抑制作用。
- 李卿王新利王红兵隋承光
- 关键词：肝癌索拉菲尼生物化疗
- 索拉菲尼联合细胞因子活化的杀伤细胞对肝癌的杀伤效应研究被引量：4
- 2009年
- 目的探讨索拉菲尼联合细胞因子活化的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)对肝癌细胞的体外杀伤效应。方法取健康人外周血单个核细胞,经IFN-γ、IL-1、IL-2和抗CD3单抗诱导CIK细胞成熟,流式细胞仪检测培养第1、7、14天的CIK细胞表型。Cell Counting Kit-8试剂盒(CCK-8)检测索拉菲尼、CIK细胞及两者联合对肝癌细胞BEL-7402的体外杀伤效应,并用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测肝癌细胞的凋亡率。结果CIK细胞经多种细胞因子诱导培养后,CD3+CD56+细胞比例明显上升,14d时CD3+CD56+细胞比例达(46.83±2.53)%,与第1天比差异有显著性(P<0.01),细胞量扩增了近1000倍。索拉菲尼和CIK细胞在适当浓度及效靶比联合应用时表现出杀伤活性增强(P<0.01)。索拉菲尼联合CIK细胞诱导的肝癌细胞BEL-7402凋亡率达(70.56±2.58)%,明显高于索拉菲尼组(45.38±1.76)%和CIK组(52.18±8.63)%(P<0.05)。结论索拉菲尼与细胞因子活化杀伤细胞疗法联合应用能明显增强对肝癌细胞的体外杀伤效应。
- 李卿王新利隋天博蒋涛隋承光
- 关键词：肝癌索拉菲尼
- 不溶性镍化合物对人肺癌A549细胞镍含量影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨不溶性镍化合物对细胞中镍含量的影响。方法用不同浓度的水不溶性氧化镍(NiO)和二硫化三镍(Ni3S2)分别处理人肺癌A549细胞,用原子吸收分光光度计(AAS)检测染毒48 h后细胞内镍含量并估算其摄取率。结果经过终浓度为0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3μg/cm2的Ni3S2处理后,平均每105个细胞中含镍量为0.002 4,0.077 1,0.015 7,0.226 8,0.475 4,0.7,0.988 2μg;终浓度为0,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0,16μg/cm2的NiO处理后,平均每105个细胞中含镍量为0.003,0.07,0.108,0.255,0.628,1.543,6.571μg;相同浓度(0.5,1.0,2.0μg/cm2)镍颗粒物处理下,Ni3S2处理组细胞镍含量分别为(0.077 1±0.006 6,0.157 4±0.019 0,0.475 4±0.112 1)μg/105个细胞,均高于NiO处理组(0.070 1±0.003 2),(0.108 1±0.015 9),(0.255 2±0.041 5)μg/105个细胞,各剂量组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论人肺癌A549细胞对不溶性镍化合物的摄取与其染毒剂量成正比,且相同浓度下对NiS的摄取率高于NiO。
- 高婷王大庆王晓华王新利李妍李超王扬姜又红
- 关键词：人肺癌A549细胞原子吸收分光光度计
- NK细胞杀瘤活性与肿瘤细胞表面MICA/B表达的相关性研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨自然杀伤NK细胞杀瘤活性与肿瘤细胞表面MICA/B表达的相关性。方法采用流式细胞术检测人红白血病细胞K562、乳腺癌细胞Bcap37、肾癌细胞769P及肺癌细胞A549表面MICA/B的表达,RosetteSep誖改进法分离人外周血NK细胞,MTT法检测不同效靶比时NK细胞对几种肿瘤细胞的杀伤活性。结果K562、Bcap37、769P及A549细胞表面MICA/B的表达阳性率分别是(60.35±0.50)%、(90.72±0.64)%、(55.59±0.55)%、(3.84±0.10)%;RosetteSep誖改进法分选出的NK细胞纯度为(96.52±2.42)%,在同一效靶比时,NK细胞对K562、Bcap37及769P的杀伤活性较强,与A549相比有显著性差异(P<0.01),其中K562与Bcap37之间无显著性差异(P>0.05);效靶比为5∶1、10∶1、20∶1时,NK细胞的杀伤活性与4种肿瘤细胞表面MICA/B表达均呈正相关关系(P<0.01),随着效靶比增加,相关性增强。结论NK细胞的杀伤敏感性与肿瘤细胞表面MICA/B的表达水平相关,肿瘤细胞表面MICA/B的表达水平影响NK细胞的杀伤活性。
- 王新利李卿蒋涛王扬付立叶高婷姜又红
- 关键词：自然杀伤细胞肿瘤细胞细胞毒性实验
- 一种经济高效的人外周血NK细胞纯化方法的建立被引量：5
- 2010年
- 目的:建立一种经济并且纯化率高的人外周血NK细胞分离方法。方法:对用RosetteSep(法直接从全血分离NK细胞的方法进行改进,先从全血中获得单个核细胞(PBMC),与红细胞按比例混合后再进行分离,利用流式细胞仪检测纯度,并且用CCK-8法检测NK细胞对K562细胞的杀伤活性。结果:改进后分离每毫升血所需RosetteSep抗体复合物用量仅为直接分离法的1/50;NK细胞的纯度由纯化前的(11.02±3.15)%提高到(96.52±2.42)%,细胞回收率为(70.24±10.51)%;纯化的NK对靶细胞K562有较强的杀伤作用,与直接分离法比较杀伤活性差异无统计学意义(P>0.05)。结论:改进后的方法可以获得高纯度的NK细胞,该分离方法不影响NK的杀伤活性,同时极大的降低了分离成本。初步建立了一种经济高效,快速简便,并且纯化率高的人外周血NK细胞纯化方法。
- 王新利李卿高婷姜又红
- 关键词：外周血NK细胞纯化
