王志刚
- 作品数：12 被引量：21H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院特产研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 重组牛分支杆菌ESAT-6基因的表达与鉴定
- 2009年
- 在前期工作的基础上,构建了pGEM-TE-ESAT6重组载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经诱导表达得到了20kD左右大小的重组蛋白,SDS-PAGE/Western Blot显示该重组蛋白是上清表达。为重组ESAT-6抗原的应用奠定了基础。
- 李海涛刘艳环张广雷李庆超王志刚刘慧洋苗利光
- 关键词：牛分支杆菌
- CpG-DNA免疫佐剂作用研究进展被引量：2
- 2006年
- CpG-DNA是一些具有免疫激活功能的以未甲基化的CpG基序(CpGmotif)为核心的DNA序列,它包括含CpG基序的人工合成的寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides,ODN)和自然界中细菌、病毒、无脊椎动物等低等生物的基因组DNA。随着对CpG基序的DNA和寡核苷酸免疫学特性的深入了解,人们对CpG特征结构在DNA免疫学中的重要作用有了逐步的认识,并在DNA疫苗、肿瘤免疫、病毒免疫等方面进行了临床应用。本文就CpG的特征结构、免疫活性、佐剂效应以及应用前景作一简要介绍。
- 刘艳环苗利光王志刚
- 关键词：免疫佐剂
- 坏死梭杆菌FN(A)型毒力株保护性抗原筛选及初步鉴定被引量：2
- 2008年
- 通过胰蛋白酶裂解坏死梭杆菌FN(A)型毒力菌株菌体,分别以菌体裂解物上清和沉淀作为抗原免疫家兔制备血清。利用SDS-PAGE/Western-blot技术在菌体中筛选出4种具有免疫原性的组分,通过免疫后的攻毒试验,筛选出1种具有免疫保护性的抗原。抗原分离纯化后,进行N端氨基酸序列测定、免疫试验及生物学特性研究,据试验结果可初步判定该抗原为溶血素类似物或一种新发现的抗原物质。该抗原不仅能使机体产生保护性免疫反应,而且不同菌株中此种抗原间可产生明显的交叉免疫。
- 苗利光杨福合刘艳环王志刚李艳王克坚肖佳美
- 关键词：坏死梭杆菌保护性抗原
- 检测和鉴别流产布鲁氏菌与猪布鲁氏菌的复合PCR方法的建立被引量：5
- 2008年
- 将GenBank上登录的流产布鲁氏菌(Br.abortus)和猪布鲁氏菌(Br.suis)外膜蛋白omp2基因序列进行比对,设计了流产布鲁氏菌特异性引物对A1/A2、猪布鲁氏菌特异性引物对S1/S2,分别用引物A1/A2和S1/S2进行PCR,进而将引物A1、A2、S1、S2置于同一体系内进行复合PCR,建立了一种能区分流产布鲁氏菌和猪布鲁氏菌的复合PCR鉴别诊断方法。应用该方法从流产布鲁氏菌和猪布鲁氏菌染色体基因组中扩增出了大小分别为424bp和535bp的1条特异性片段,从两种染色体基因组混合物中扩增出了大小为424bp和535bp的2条特异性片段。但对大肠杆菌、结核杆菌、坏死杆菌、棒状杆菌染色体基因组进行PCR扩增时均为阴性。该方法可以检测出10个菌/50μL体系。本研究建立的复合PCR可以有效检测布鲁氏菌感染并把流产布鲁氏菌和猪布鲁氏菌区分开。
- 李艳苗利光刘艳环王志刚李海涛杨福合
- 关键词：流产布鲁氏菌复合PCR
- CpG基序对坏死梭杆菌免疫原的免疫佐剂效应实验研究被引量：1
- 2006年
- 分别用坏死梭杆菌来源CpG、弗氏完全佐剂、氢氧化铝佐剂与坏死梭杆菌免疫原配制的抗原免疫小白鼠,通过检测坏死梭杆菌免疫原抗体变化,来探讨CpG对坏死梭杆菌免疫原的佐剂效应。试验结果表明,坏死梭杆菌来源CpG有较好的免疫佐剂效应,可望进一步研制成为坏死梭杆菌疫苗佐剂成分。
- 刘艳环杨福合苗利光刘晓颖张秀华王志刚
- 关键词：坏死梭杆菌佐剂
- 坏死梭杆菌FN(A)p2001株小鼠感染模型的建立被引量：4
- 2007年
- 将鹿源坏死梭杆菌FN（A）p2001分离株以3×10^8、3×10^7、3×10^6、3×10^5、3×10^4、3×10^3个／只等不同菌量，分别接种于6组小鼠，每组10只，逐日观察小鼠感染情况。结果表明，3×10^6、3×10^7、3×10^8个／只菌量感染组小鼠，在接种后3d～8d先后死亡，5d后死亡小鼠的病理变化明显，并从死亡小鼠内脏及脓汁中均检到长丝状及小杆状等多形态典型的坏死梭杆菌；3×10^4个／只和3×10^5个／只菌量感染仅表现体重减轻，3×10^3个／只菌量感染无明显临床表现。由此表明，坏死梭杆菌FN（A）P2001分离株具有很强的感染毒力；对小鼠的最小致死量为10^6个／只菌量；腹腔接种是适宜的感染途径。从而建立了坏死梭杆菌分离株小鼠感染模型。
- 苗利光杨福合刘艳环王志刚肖佳美
- 关键词：坏死梭杆菌小鼠
- 坏死杆菌溶血素基因筛选与序列分析
- 坏死梭杆菌可造成多种坏死病,溶血素是其主要毒力因子之一。为了研究坏死杆菌溶血素分泌的基因基础。本实验从坏死梭杆菌FN (A)型毒力菌株菌体中提取细菌染色体DNA,以总DNA Hind Ⅲ部分酶切的片段为供体、pUC18为...
- 刘艳环苗利光李庆超王志刚李海涛张广雷
- 关键词：坏死梭杆菌溶血素基因文库
- 狐、貉、貂阴道加德纳氏菌病和布鲁氏菌病流行病学调查被引量：2
- 2004年
- 闫喜军肖家美赵传芳许傲天王志刚姜莉莉
- 关键词：布鲁氏菌病流行病学调查阴道加德纳氏菌病病原菌繁殖障碍血清学调查
- 坏死梭杆菌病免疫学研究进展被引量：5
- 2006年
- 长期以来,国内外研究人员一直致力于坏死梭杆菌的免疫性及免疫作用研究,但进展缓慢,主要原因是坏死梭杆菌免疫作用弱,无法产生保护性免疫。直到20世纪80年代末,对坏死梭杆菌免疫研究才有了新的突破,初步研制出坏死梭杆菌疫苗,并经小群动物试验获得成功。文章就坏死梭杆菌免疫性及免疫作用的初始研究、坏死梭杆菌免疫原筛选研究、抗原间的相互作用、疫苗研究进展进行了综述,并展望了坏死梭杆菌疫苗研究的发展趋势。
- 苗利光杨福合刘艳环王志刚
- 关键词：坏死梭杆菌免疫疫苗
- 坏死杆菌病免疫学研究进展
- 长期以来，国内外研究人员一直致力于坏死梭杆菌的免疫性及免疫作用研究，但进展缓慢，其主要原因是坏死杆菌免疫作用弱，无法产生保护性免疫。直到上世纪80年代末人们对坏死梭杆菌免疫研究有了新的突破，初步研制出坏死杆菌疫苗，并经小...
- 刘艳环王志刚
- 关键词：坏死梭杆菌免疫疫苗
