王娜
- 作品数：6 被引量：7H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Matrigel结合流式细胞术定量检测血管新生方法的建立被引量：1
- 2014年
- Padró等发现未经治疗的初诊急性髓系白血病患者骨髓中微血管的密度是正常对照组的2倍;Vaupel等发现肿瘤生长过程中处于低氧及酸中毒状态,可诱发肿瘤细胞本身和基质细胞产生和分泌促血管新生因子从而激发血管新生,新生的血管又可促进肿瘤的生长;因此基于抗肿瘤血管新生来治疗肿瘤的策略也成为研究的热点.现有的血管新生检测平台尚无法准确定量检测血管新生程度,对抗血管新生药物疗效评估及肿瘤血管新生检测等一系列研究有一定的局限性,我们旨在建立一个能够定量检测血管新生程度的平台,来满足临床科研的需要.
- 王娜黄亮周剑峰周匡果
- 关键词：MATRIGEL流式细胞术肿瘤血管新生肿瘤细胞
- 人T细胞急性淋巴细胞白血病小鼠动物模型的建立被引量：2
- 2015年
- 目的:通过建立一理想的动物模型来模拟T细胞急性淋巴细胞白血病的发病状态,为探索急性淋巴细胞白血病全新的治疗方法提供平台。方法:采用抗鼠-CD122抗体注射NOD/SCID小鼠进行预处理,通过尾静脉注射9例不同病例的白血病细胞,以及1株T-ALL细胞系。通过检测小鼠体内白血病细胞及脏器白血病细胞浸润情况,观察白血病细胞植入。将白血病细胞进行二次移植,观察移植稳定性。对白血病动物模型进行药物处理,观察小鼠生存期,模拟人体治疗反应。结果:有4例病例的细胞及T-ALL细胞株成功植入。流式细胞检测显示受体小鼠体内较多比例人CD45+细胞表达,免疫组化显示CD45+细胞浸润小鼠不同脏器,系列移植也获得成功。体内药物处理显示地塞米松能延长小鼠的生存期,与临床观察相一致。结论:成功建立经抗鼠CD122单抗预处理的人T细胞急性淋巴细胞白血病NOD/SCID小鼠模型,具有原发疾病的所有主要特征。
- 朱光荣王娜姜利军季建敏沈群孙汉英
- 关键词：NOD/SCID小鼠异种移植模型疾病特征
- 多发性骨髓瘤原代细胞异种移植小鼠模型的建立
- 2012年
- 目的利用人多发性骨髓瘤（MM）原代细胞在非肥胖糖尿病／重症联合免疫缺陷（NOD／SCID）小鼠中建立人MM异种移植模型。方法将2例MM终末期患者骨髓或外周血单个核细胞（MNC）悬液通过尾静脉分别输注给3只NOD／SCID小鼠。每周称量体重，移植2周后以流式细胞术（FCM）检测小鼠外周血中CD45＋细胞百分比。当小鼠出现苍白、竖毛、精神萎靡或体重下降20％时，取小鼠脾脏及肝脏行组织病理学检查，FCM检测外周血、骨髓、脾脏和淋巴结细胞悬液中CD45＋CD38＋细胞的百分比。结果来源于病例1和病例2的MNC移植小鼠的平均体重分别自输注MM原代细胞第7周和第5周后开始下降；以对照组小鼠的单个核细胞做阴性设门，分别于移植（26±4）d和（16±4）d后，在病例1细胞来源组和病例2细胞来源组的小鼠外周血中检测到人CD45＋CD38＋细胞，且其比例随时间延长而逐渐增高，实验终点时分别达（16．2±3．0）％和（31．3±3．5）％；组织病理大体形态观察发现小鼠脾脏、肝脏及淋巴结均不同程度增大，镜下可见典型的恶性浆细胞浸润；FCM检查骨髓、淋巴结和脾脏细胞表面标志，均发现一群人源CD45＋CD38＋细胞。结论成功建立了人MM原代细胞异种移植的免疫缺陷小鼠模型。
- 刘春艳张丽王娜王迪耿哲徐丹梅李春蕊周剑峰黄亮
- 关键词：多发性骨髓瘤原代细胞NOD/SCID小鼠异种移植模型
- 伴有SIL-TAL1融合基因的急性T淋巴细胞白血病临床特征研究被引量：4
- 2014年
- 目的 探讨SIL-TAL1基因重排在急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）的意义及其临床特征.方法 回顾性分析62例初发T-ALL患者资料,反转录PCR检测SIL-TAL1基因情况,其中伴有SIL-TAL1基因重排15例.比较伴或不伴有SIL-TAL1基因重排患者发病时的一般状况、免疫表型、肿瘤浸润程度、治疗反应以及无复发生存（RFS）和总生存（OS）.结果 与不伴有SIL-TAL1基因重排的患者相比,伴有SIL-TAL1基因重排患者初诊时白细胞计数高（P=0.029）,白血病细胞多数表现为皮质T细胞表型（P=0.028）,且容易伴发急性肿瘤溶解综合征（P＜0.001）和弥散性血管内凝血（P＜0.001）,早期死亡率较高[26.7％（4/15）比4.3％（2/47）,P=0.011].与不伴SIL-TAL1基因重排患者相比,伴有SIL-TAL1基因重排患者RFS及OS较短（RFS：2个月比12个月,P=0.007;OS：4个月比25个月,P=0.002）.结论 SIL-TAL1基因重排是T-ALL患者的预后不良因素,需积极治疗,有条件者应以异基因造血干细胞移植作为治愈性治疗措施.
- 朱光荣王娜姜利军季建敏沈群孙汉英
- 关键词：急性T淋巴细胞白血病急性肿瘤溶解综合征弥散性血管内凝血预后
- 人CD123稳定表达细胞株的建立与鉴定
- 2011年
- 目的探索建立人CD123稳定表达细胞株的方法,为进一步实现人CD123的抗体规模化生产提供材料。方法构建人CD123 CDS区真核表达载体(hCD123 CDS-pEGFP-N1);经脂质体包裹转染中国仓鼠卵巢细胞CHO-S;经流式分选结合G418筛选,并用流式细胞术和Western印迹法检测人CD123蛋白的表达情况,初步筛选出人CD123高表达的CHO-S细胞株;并进一步用经人CD123 Fc重组融合蛋白免疫的小鼠血清检测该细胞株hCD123表达情况。结果测序及GenBank中序列比较结果显示扩增到的人CD123基因序列是正确的,酶切结果表明表达质粒构建正确;流式分选结合G418筛选得到1个人CD123高表达的细胞株——克隆8G9 CHO-S,其CD123-APC阳性细胞百分数为92.07%,用融合蛋白免疫的血清检测各细胞株人CD123表达情况,结果显示克隆8G9 CHO-S细胞和对照CHO-S细胞的CD123阳性率分别为(97.94±1.93)%和(2.84±1.35)%,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论建立了人CD123抗原稳定高表达的细胞株克隆8G9 CHO-S,为进一步实现人CD123的抗体规模化生产及其导向治疗奠定了坚实的基础。
- 杨漾黄亮王娜周剑峰
- 关键词：细胞筛选
- EGFP标记的A20细胞构建小鼠B细胞播散型淋巴瘤模型
- 2014年
- 目的:A20细胞是来源于同系Balb/c小鼠大B细胞淋巴瘤的细胞系,能通过尾静脉接种建立小鼠B细胞播散型淋巴瘤的模型,但由于该细胞系缺乏细胞表面特异性标志而难于监测。本研究使用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记A20细胞,试图建立易于监测的小鼠B细胞播散型淋巴瘤模型。方法:用含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒载体将标记基因EGFP转入A20细胞,通过流式分选出EGFP+的A20细胞,体外培养后通过尾静脉注射接种于同系Balb/c小鼠体内,用流式细胞仪监测其外周血EGFP+细胞的百分率。当小鼠出现消瘦、毛发竖立、嗜睡等体征时,将小鼠处以安乐死;取动物脏器行石蜡包埋、病理切片、HE染色。结果:尾静脉注射1×106细胞于6只Balb/c小鼠体内,接种后15天可在外周血中检测到EGFP+细胞,平均生存时间为29.6±0.8天;在肝脏、脾脏、脊椎和淋巴结等多脏器成瘤,流式检测瘤细胞EGFP表达阳性。结论:经尾静脉注射接种A20细胞可建立小鼠B细胞播散型淋巴瘤模型,A20细胞经含EGFP的慢病毒标记后易于通过流式进行监测,为通过动物体内试验评价靶向治疗的疗效提供了保证。
- 王娜王迪唐玉婷黄亮周剑峰
- 关键词：淋巴瘤流式细胞术增强型绿色荧光蛋白
