潘善培
- 作品数:71 被引量:144H指数:7
- 供职机构:暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 构建重组人CatSper1特异抗原原核表达载体
- 2010年
- 目的:构建重组人Catsper1特异抗原(含胞外区、钙选择孔区和破伤风类毒素通用T细胞表位TT580-599)原核表达载体并表达重组抗原。方法:设计引物,以RT-PCR法扩增人CatSper1的整个跨膜区DNA片段,利用重叠PCR方法合成重组人CatSper1特异抗原DNA片段,并插入到pET-21b和pET-21b-Trx(硫氧还蛋白)的原核表达载体。测序鉴定后转化工程菌株E.coliBL21(DE3)进行诱导表达,并纯化表达的重组蛋白。用Tricine-SDS-PAGE和Western blotting分析重组蛋白的表达情况。结果:成功构建pET-21b-Catsper1特异抗原和pET-21b-Trx-Catsper1特异抗原原核表达载体,并在BL21(DE3)中诱导表达重组蛋白。Tricine-SDS-PAGE和Western blotting鉴定表明,已获得重组人CatSper1特异抗原包涵体和纯化的可溶重组Trx-Catsper1特异抗原。结论:成功在原核表达系统表达重组人Catsper1特异抗原。
- 黄丹潘善培关艺青禹艳红
- 关键词:精子免疫避孕重叠PCR原核表达
- 重组猪卵透明带-3α抗原及其抗体的制备
- 2006年
- 目的:制备重组猪卵透明带-3α(rpZP3α)抗原及其抗体供发展避孕疫苗研究。方法:在2L发酵罐中接种毕赤酵母GS115-pZP3α工程菌,高密度发酵表达rpZP3α蛋白,表达的蛋白经螯合镍离子的亲和柱纯化后,用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,以Quantity One软件对rpZP3α进行定量分析。rpZP3α免疫家兔,间接免疫荧光法检测抗血清对rpZP3α和猪卵透明带的抗体反应。IVF试验体外检测抗rpZP3α抗体对猪、小鼠精卵结合的影响作用。结果:工程菌高密度发酵产物经分离纯化后获得能与抗pZP3抗体反应的46kD成分,平均产量为8mg/L,用其免疫家兔获得抗rpZP3α抗血清,间接免疫荧光法分析显示此抗血清能与猪卵透明带反应,产生亮绿荧光。体外精卵结合试验中,随着兔抗rpZP3α抗血清浓度的加大,其对猪、鼠精卵结合的抑制作用也增强。ELISA结果显示抗rpZP3α抗体与rpZP3α蛋白以及天然pZP3蛋白两种抗原反应的强度和趋势基本一致。结论:通过酵母体系制备的rpZP3α及其抗体具有免疫学活性。
- 高彦茹潘善培谢琪璇肖銮娟柯琼
- 关键词:毕赤酵母抗体
- 人ZP3精子受体相关的细胞表位嵌合肽的基因表达
- 2001年
- 曹佐武杨林刘穗玲肖銮娟谢琪璇王珣章龙綮新潘善培王自能
- 关键词:基因表达
- 人类体外受精及胎胚移植技术的研究和应用
- 1989年
- 人类体外受精及胚胎移植(In Vitro Fertilization and Embryo Tiansfer)是近十年来兴起的一项生殖工程技术,它是从体内采集配子,在体外受精并培育成早期卵裂阶段胚胎,再移植入母体子宫内发育成胎儿的,俗称试管婴儿技术,简称IVF-ET或IVF技术。 IVF—ET技术的诞生开创了人类生殖技术的新时代,是医学和生物学技术的一次伟大的革命。这项技术不仅为不孕患者提供了一种新的治疗方法。
- 潘善培
- 关键词:人类生殖体外受精胚胎移植
- 55K猪卵透明带抗原(ZP3)的分离纯化
- 1998年
- 谢琪璇张江兰陈海玲潘善培
- 关键词:猪卵透明带分离纯化生殖免疫相对分子质量抗原
- 人输卵管组织或条件培养液与小鼠胚胎体外共培养的初步研究被引量:1
- 1998年
- 钟瑜张春雪潘善培
- 关键词:条件培养液体外共培养输卵管组织小鼠胚胎
- 小鼠口服猪卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α的抗生育研究被引量:4
- 2004年
- 目的:评价口服卵透明带DNA避孕疫苗pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒诱发的黏膜免疫反应、抗生育作用和对卵巢结构的影响,探讨用黏膜免疫避免卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的可行性。方法:制备pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒,10只昆明系小鼠口服免疫,第3周和第6周分别加强免疫一次,剂量为0 5mL/只,含pVAX1-pZP3αDNA50μg;对照组10只雌小鼠口服相同剂量不含pVAX1-pZP3α的壳聚糖。免疫前和免疫后隔周取小鼠血清、阴道冲洗液,用ELISA法检测抗pZP3IgA和IgG。首次免疫后第12周雌雄合笼交配,统计雌鼠怀孕情况;解剖取出双侧卵巢,制作石蜡切片,光镜观察卵巢病理学变化。结果:免疫组80%小鼠的血清和50%小鼠的阴道冲洗液可检测到抗pZP3IgA,反应强度与持续时间有明显的个体差异;免疫组5只小鼠未怀孕,对照组全部怀孕,抗生育效果与合笼时抗pZP3IgA反应有关;免疫组未怀孕小鼠卵巢组织结构与免疫组怀孕小鼠及对照组小鼠无差别。结论:口服pVAX1-pZP3α壳聚糖纳米微粒免疫小鼠能诱发生殖道黏膜免疫反应,发挥抗生育作用,对卵巢组织结构没有影响。黏膜免疫是克服卵透明带抗原免疫引起卵巢功能紊乱的一种值得深入研究的方法。
- 董志炜潘善培谢琪璇肖銮娟孙彩军余巍何柳媚
- 关键词:卵透明带避孕疫苗
- 应用免疫印渍法检测猪和鱼卵透明带抗原的免疫交叉反应性
- 1996年
- 为了研究猪和鱼卵透明带抗原的免疫交叉反应性,应用免疫印渍术对其抗原组分进行了检测.实验结果表明,鱼卵透明带抗原与已知具有精子受体活性的猪ZP3抗原,甚至猪全ZP抗原均没有交叉反应.提示鱼卵透明带不含有与猪和人等哺乳类的透明带免疫学相类似的抗原决定簇.
- 谢琪璇潘善培
- 关键词:透明带抗原
- 应用免疫印渍法检测猪和鱼卵透明带抗原的免疫交叉反应性
- 1998年
- 谢琪璇潘善培
- 关键词:卵透明带抗原决定簇T细胞免疫TWEEN生殖免疫抗生育
- 原代和传代培养的人输卵管上皮细胞对小鼠胚胎体外发育的影响被引量:7
- 1996年
- 为了检测人输卵管上皮细胞对早期胚胎体外发育的影响,将小鼠2细胞胚胎与人输卵管上皮细胞进行体外共培养.结果显示:无论原代培养还是传代培养的人输卵管上皮细胞都可使胚胎发育率提高,发育速度加快.经传代4次以后的细胞对胚胎发育的促进作用有下降的趋势,所以传代第1至第4代是应用于共培养的最佳选择.同一代细胞中已贴壁稳定生长的细胞对胚胎发育的促进作用比刚经传代尚未贴壁的细胞大.
- 钟瑜潘善培张春雪
- 关键词:输卵管上皮细胞共培养体外发育