洪文荣
- 作品数:98 被引量:132H指数:7
- 供职机构:福州大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- 绛红色小单孢菌基因文库的构建及庆大霉素生物合成基因簇的筛选
- 载体Supercos-1经Nhe I和BamH I消化并去磷酸化,得到的载体片段与经Sau3A I部分消化的绛红色小单孢菌染色体DNA连接。利用噬菌体包装蛋白连接产物并侵染E.coli LE392获得绛红色小单孢菌基因文...
- 潘成奇洪文荣
- 关键词:基因文库基因筛选
- 庆大霉素生物合成基因genD1的研究
- [目的]在绛红色小单孢菌GK1101 (△genK)(Micromonospora purpurea GK 1101 (△genK))上构建genD1基因缺失工程菌,通过分析其次级代谢产物的变化,推测genD1基因功能....
- 陈洲琴林强洪文荣
- 关键词:甲基化
- 糖基转移酶-2基因silD在大肠埃希菌中的克隆与表达被引量:1
- 2008年
- 从伊纽小单孢菌(Micromonospora inyoensis)扩增参与西索米星生物合成的糖基转移酶基因silD(1181bp),并分别将其克隆到pUC18和表达载体pET-30a上。其开放性阅读框长1173bp,编码含390aa(43.04ku)的多肽链,在大肠埃希菌BL21(DE3)::pET-silD中实现表达。基因silD的碱基序列与gntD(来自M.echinospora)的碱基序列的同源性高达94%。预测的SilD蛋白序列与GntD的同源性为98%。这是继从依纽小单孢菌克隆参与生物合成西索米星的抗性基因srm1(AY661430)、西索米星2-脱氧蟹肌醇合成酶基因sisB(DQ250993)和糖基转移酶基因sisZ(DQ250994)后,克隆到的又一新基因。该基因在GenBank的接受号为DQ250992。基因silD的克隆和表达为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 洪文荣曾志红朱春宝陈代杰朱宝泉
- 庆大霉素生物合成基因genD1的研究被引量:1
- 2014年
- 为研究genD1基因功能,在绛红色小单孢菌GK1101(Δgen K)上构建genD1基因缺失工程菌并分析其代谢产物组分变化。首先构建用于genD1基因框内敲除的同源重组质粒pGD14,经接合转移导入绛红色小单孢菌GK1101,经影印筛选获得genD1缺失工程菌GD1989。再发酵并提取其代谢产物,采用质谱法等检测代谢产物。结果表明,工程菌GD1989不再合成庆大霉素C1a和C2b,主要积累庆大霉素A。对工程菌GD1989喂养庆大霉素X2的发酵产物经检测含有庆大霉素C1a、C2b和JI-20A。genD1基因失活导致庆大霉素生物合成代谢流中断,说明genD1基因负责加洛糖胺C-4″位的甲基化。
- 陈洲琴林强胡育龙洪文荣
- 关键词:庆大霉素甲基化生物合成
- 表柔红霉素工程菌的构建及其原生质体紫外诱变被引量:2
- 2009年
- 本研究将质粒pYG836转化到柔红霉素产生菌SIPI-DM中,采用同源重组双交换法,用aveBIV基因置换基因组上的dnmV基因,得到稳定遗传的表柔红霉素工程菌DM3。为进一步提高工程菌的发酵单位,对其原生质体进行连续4次的紫外诱变育种,最终得到一株发酵单位较出发菌株提高了93.7%的突变菌株。
- 张伟尚珂胡又佳朱春宝洪文荣
- 关键词:同源重组原生质体紫外诱变
- 黑暗链霉菌生产暗酶素特性研究
- 洪文荣
- 关键词:妥布霉素菌种筛选提取精制水解动力学
- 单组分妥布霉素工程菌的构建被引量:2
- 2014年
- 目的阻断黑暗链霉菌中安普霉素和氨甲酰妥布霉素的合成,构建主产妥布霉素工程菌。方法以安普霉素生物合成基因apr J为靶标,克隆其上下游序列作为同源交换臂,构建重组质粒p XJ401,利用接合转移技术将其导入黑暗链霉菌Tt-49,获得工程菌TX302,并在此基础上敲除氨甲酰基转移酶基因tob Z,获得工程菌TX308。采用MS法,检测工程菌次级代谢产物的变化。结果 TX302主产氨甲酰妥布霉素,未检测到安普霉素。TX308不再合成氨甲酰妥布霉素,产物只检测到妥布霉素。结论磷酸变位酶基因apr J是安普霉素生物合成的关键基因,敲除后能有效阻断安普霉素的合成,工程菌TX308大量积累妥布霉素,不再合成安普霉素和氨甲酰妥布霉素,具有重要的产业化价值。
- 肖剑萍温淑平洪文荣
- 关键词:黑暗链霉菌安普霉素妥布霉素工程菌
- 一株产阿泊拉霉素的工程菌及其应用
- 本发明属于医药技术领域,涉及一种灭活<I>tobS1-C</I>基因功能的产阿泊拉霉素的工程菌及其应用,所述工程菌为黑暗链霉菌(<I>Streptomycestenebrarius</I>)T103,已于2011年11月...
- 洪文荣林玉双
- 文献传递
- 次级代谢产物生物合成机制研究进展与策略
- 放线菌次级代谢产物生物合成机制研究策略,从微生物药物基因组学入手,从7个方面进行阐述:1微生物药物基因组学研究的背景;2微生物药物基因组学研究进展;3卡那霉素高产菌生物合成基因簇克隆与AUDs的发现;4小单孢菌药物基因组...
- 洪文荣
- 文献传递
- 黑暗链霉菌tobS1-C基因缺失突变株的构建被引量:3
- 2012年
- 通过敲除妥布霉素生物合成基因tobS1-C,定向选育阿泊拉霉素高产菌株。PCR扩增tobS1-C基因上下游同源序列和红霉素抗性基因ermE,构建穿梭载体pSH6,利用接合转移法转化黑暗链霉菌Tt49,经同源重组,敲除tobS1-C两基因序列,共2 484 bp,获得框内删除突变株黑暗链霉菌T103(△tobS1C)。发酵验证表明突变株不再合成妥布霉素,只合成阿泊拉霉素。
- 林玉双洪文荣
- 关键词:黑暗链霉菌同源重组基因缺失