汪靖超
- 作品数：21 被引量：181H指数：5
- 供职机构：青岛大学更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 鳗弧菌(Vibrio anguillarum)胞外产物中蛋白酶的纯化及其性质被引量：21
- 2002年
- 对鳗弧菌 (Vibrioanguillarum)胞外产物中蛋白酶的纯化方法及其性质进行了研究 .其中 ,蛋白酶的纯化步骤包括 :(1)硫酸铵沉淀 ;(2 )SephadexG 10 0凝胶过滤 ;(3)DEAE Sepharose色谱分离 ;(4)DEAE Cellulose (DE 32 )色谱分离 .经上述纯化步骤得到两种蛋白酶 ,经SDS PAGE分析 ,Mr分别为 37.4× 10 3 和 33.1× 10 3 .以偶氮酪蛋白 (azocasein)作底物测其水解酶活性 ,结果表明二者差别显著 ,前者明显高于后者 .而且 ,Mr37.4× 10 3 的蛋白酶在pH 7～ 10范围内均显示较高活性 ,在 4 0～ 6 0℃范围内稳定性好 .结果表明该蛋白酶是一种金属蛋白酶 .关于该蛋白酶对牙鲆(Paralichtysolivaceus)的毒性作用尚在研究之中 .图 6表 3参
- 魏玉西汪靖超程殿林徐永立
- 关键词：鳗弧菌胞外产物蛋白酶纯化
- 质粒pACYC184电转化松材线虫携带的荧光假单胞菌GcM5－1A被引量：2
- 2009年
- 以质粒pACYC184为材料,研究了松材线虫携带的荧光假单胞菌的最适电转化条件.结果表明,荧光假单胞菌GcM5-1A培养至D600nm为0.5时制备感受态细胞,以300mmol/L蔗糖溶液为电击缓冲液,质粒DNA终浓度为0.01ng/μL,在25μF电容、9kV/cm电场强度、200Ω电阻的电击条件下电击一次,可得最大的电转化效率,即5.5×106/μg(DNA).SDS-PAGE分析显示,转化质粒pACYC184的氯霉素抗性基因在受体细胞内得到了表达.本方法的建立为松材线虫携带的荧光假单胞菌的基因导入提供技术支持,为进一步通过基因敲除的方法,选择性地失活特定功能基因,进而确定这些基因在松材线虫病病理进程中的作用奠定基础.
- 汪靖超连福明郭道森李荣贵赵博光
- 关键词：电转化松材线虫
- 外源基因在噬夏孢欧文氏菌中的表达被引量：1
- 2005年
- 用CaCl2法制备噬夏孢欧文氏菌(Erwiniauredovora)感受态细胞,热激处理可使质粒pACYC184转入噬夏孢欧文氏菌细胞,转化率为656cfu/μgDNA,转入的质粒可以在细胞中稳定存在,并随着细胞分裂而复制,质粒上的氯霉素抗性基因在其启动子的控制下能够高效表达,氯霉素乙酰转移酶可达噬夏孢欧文氏菌菌体总蛋白的30.26%。噬夏孢欧文氏菌可以作为一种新的原核表达系统。
- 汪靖超赵驰王波杨宏李荣贵
- 利用辣椒渣提取不溶性膳食纤维的研究被引量：22
- 2006年
- 辣椒渣是红辣椒提取色素和辣椒碱后的产物,用酸碱化学处理法处理辣椒渣,得到不溶性膳食纤维,产率为14%,纤维素含量达到86.79%,产品不含苯甲酸和辣椒碱,Pb和As的含量分别<20mg/kg和2mg/kg。
- 汪靖超杨宏姚海军杜桂彩
- 关键词：水不溶性膳食纤维酸碱法
- 重组TaqDNA聚合酶在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：8
- 2004年
- 从嗜热菌Thermusaquaticus中分离出的TaqDNA聚合酶由于其热稳定性,在聚合酶链式反应(PCR)中得到广泛的应用,我们根据编码TaqDNA聚合酶的基因序列,设计出一对引物,通过PCR扩增出TaqDNA聚合酶基因,并将其克隆到表达载体pET-15b中,转化大肠杆菌E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导后,重组TaqDNA聚合酶在大肠杆菌中实现了大量表达。经过热变性、亲和层析、阳离子交换层析获得了电泳纯的重组TaqDNA聚合酶。本研究的生产程序可作为TaqDNA聚合酶生产的一种新方法。
- 汪靖超李荣贵
- 关键词：DNA聚合酶纯化大肠杆菌嗜热菌
- 蓝细菌Anacystis nidulans R-2藻胆体中43kD蛋白细胞定位的初步研究
- 2005年
- 高盐浓度条件下分离了蓝细菌AnacystisnidulansR-2的藻胆体,藻胆体中存在一种43kD的蛋白。Westernblotting分析表明,该蛋白能与蓝细菌Fd:NADP+氧还酶中FNR结构域的抗体发生反应,解聚的藻胆体具有FNR黄递酶的活性,初步证明该43kD蛋白就是Fd:NADP+氧还酶。TritonX-114分相实验表明,这种43kD的蛋白不能进入TritonX-114相。对藻胆体的部分解聚合实验表明,富含外周杆的组分中不存在43kD的蛋白。
- 李荣贵汪靖超
- 关键词：藻胆体蓝细菌细胞定位TRITON黄递酶FNR
- 用于噬夏孢欧文氏菌发酵玉米黄素二葡萄糖苷的培养基
- 本发明涉及一种用于噬夏孢欧文氏菌发酵玉米黄素二葡萄糖苷的培养基，其解决了常规培养基在培养噬夏孢欧文氏菌中，玉米黄素二葡萄糖苷产量较低的技术问题，其重量份组成为：酵母粉22份，氯化钠5份，硝酸钾3份，柠檬酸三钠3份，磷酸氢...
- 汪靖超李荣贵杜桂彩
- 文献传递
- 鼠尾藻多酚及其各组分的抗凝血活性筛选被引量：14
- 2007年
- 目的筛选鼠尾藻多酚及其各组分的抗凝血活性。方法采用膜分离方法对鼠尾藻多酚进行分级;采用毛细管法测定小鼠凝血时间;采用剪尾法测定小鼠出血时间;采用试管法测定新西兰兔激活部分凝血活酶时间、血浆凝血酶原时间和血浆凝血酶时间。结果高相对分子质量(Mr)鼠尾藻多酚分级级分极显著地延长小鼠凝血时间、出血时间、新西兰兔激活部分凝血活酶时间,且其延长程度与多酚Mr成正相关关系,Mr大于1.0×105的组分体内体外抗凝血活性与阿司匹林相近。结论高Mr鼠尾藻多酚具有极显著的体内、体外抗凝血活性。
- 魏玉西李敬汪靖超齐宏涛
- 关键词：鼠尾藻多酚抗凝血活性
- 双齿围沙蚕蛋白酶的纯化及其性质被引量：2
- 2007年
- 目的:纯化双齿围沙蚕(Pednereis aibuhitensis Grube)蛋白酶,并对其性质进行研究．方法:将沙蚕匀浆液先后进行Superdex-75凝胶柱层析、MonoQTM阴离子交换柱层析及SP- Sepharose 4B阳离子交换层析进行纯化．将经过非还原性SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的蛋白酶电转移至含明胶的SDS-聚丙烯酰胺凝胶中,通过观察明胶的分解来确定电泳条带的蛋白酶活性．对纯化后蛋白酶的最适pH值,热稳定性,最适温度,蛋白酶抑制剂的影响,有机溶剂的稳定性,金属离子对酶活性的影响等性质进行了测定．结果:纯化后得到的一种蛋白酶,还原性SDS- PAGE显示纯化的蛋白酶为两条带,分子量分别为Mr34 900和Mr33 900,而非还原性SDS- PAGE出现了分子量分别为Mr 65 600、Mr 57 900、Mr 43 500的三条蛋白带,明胶蛋白酶活性图谱检测显示酶活性主要在约Mr 66 000处．该蛋白酶具较好的热稳定性,在pH 8-10和20-35℃的情况下有较高活性．PMSF对该酶有较强抑制作用,而有机溶剂对该酶没有明显的影响．结论:该蛋白酶由两个通过二硫键连接在一起的亚基构成,两亚基的分子量分别为Mr 33 900和Mr 34 900;本文所采用的新的明胶蛋白酶活性图谱检测法是一种非常灵敏和有效的蛋白酶活性检测方法．
- 汪靖超赵峰李荣贵王斌
- 关键词：纯化蛋白酶
- 用于噬夏孢欧文氏菌发酵玉米黄素二葡萄糖苷的培养基
- 本发明涉及一种用于噬夏孢欧文氏菌发酵玉米黄素二葡萄糖苷的培养基，其解决了常规培养基在培养噬夏孢欧文氏菌中，玉米黄素二葡萄糖苷产量较低的技术问题，其重量份组成为：酵母粉22份，氯化钠5份，硝酸钾3份，柠檬酸三钠3份，磷酸氢...
- 汪靖超李荣贵杜桂彩
- 文献传递
