段江波
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：郑州大学生物工程系更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 肠道病毒71型VP1酶标抗原的制备及应用
- 2013年
- 为了建立用于肠道病毒71型(EV71)感染早期诊断的检测方法,将重组质粒pET-32a(+)-VP1转入大肠埃希菌BL21(DE3)中进行诱导表达,对表达产物进行镍柱亲和层析纯化和复性,并对复性的VP1蛋白进行辣根过氧化物酶标记,作为酶标抗原建立捕获ELISA检测方法。结果表明,该方法μ链抗体包被浓度为1∶3 000,酶标抗原工作浓度为1∶20 000,且酶标抗原稳定性良好;检测临床血清样品阳性符合率为96.1%(49/51),阴性符合率为100%(65/65)。
- 董彩文李永丽王云龙李玉林陈延锋景建洲段江波汤久停
- 关键词：肠道病毒71型VP1酶联免疫吸附试验
- 一种改进的分泌抗半抗原抗体杂交瘤细胞株筛选方法
- 2014年
- 目的:研究解决半抗原分子单克隆抗体制备技术路径中遇到的在阳性杂交瘤细胞株筛选时无法排除载体蛋白间交叉反应影响的问题,以半抗原去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)为例。方法:在NE完全抗原免疫小鼠实施细胞融合后,分别包被牛血清白蛋白(BSA)、卵清白蛋白(OVA)、BSA-NE、OVA-NE等4种不同抗原的酶标板平行检测细胞培养上清液;挑选BSA、OVA检测结果为阴性,BSA-NE、OVA-NE检测结果为阳性的孔内细胞进行克隆化筛选单克隆细胞。结果:本筛选方法可一次性从8板96孔板中筛选到13个符合要求的阳性孔,经3次克隆化后获得6株特异性强的杂交瘤细胞株。结论:本方法避免了载体蛋白间交叉反应对筛选的影响,改进了传统的单一指标筛选方法,筛选效率更高。
- 王云龙段江波李恒思王霈毛烈张怡青王国强王继创
- 关键词：半抗原去甲肾上腺素
- 去甲肾上腺素完全抗原的制备、鉴定及小鼠体内免疫效果的观察
- 2013年
- 目的制备鉴定去甲肾上腺素完全抗原为制备高灵敏度和特异性抗去甲肾上腺素（NE）单克隆抗体提供条件。方法分别用戊二醛法（GA）和碳化二亚胺法（EDC）在pH4．5和pH9．0条件下将NE与载体蛋白（BSA、OVA）耦联制备完全抗原，采用紫外全波长扫描、SDS．PAGE和FeCl，显色反应3种方法进行鉴定；完全抗原腹腔注射小鼠并监测血清抗体效价。结果3种方法鉴定结果表明NE完全抗原制备成功，与pH4．5相比，在pH9．0条件下随着耦联时间的延长，NE的耦联比增加显著。间接ELISA结果显示，“检测抗原”和“免疫抗血清”配组测定时，当包被的“检测抗原”测定同种耦联方法制备的“免疫抗原”免疫小鼠后获得的“免疫抗血清”时，血清抗体滴度观测值高于与“检测抗原”制备方法不同的免疫小鼠抗血清，如：A组（BSA-NE-GA）测定C组抗血清（OVA．NE．GA）时测定结果高于A组测定G组抗血清（OVA—NE—EDC）。结论用制备的NE完全抗原免疫小鼠成功产生了抗NE抗体。
- 王云龙段江波李玉林程蕾王继创张慧茹毛烈王国强
- 关键词：去甲肾上腺素半抗原
