段志青
- 作品数：17 被引量：27H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划昆明市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 重组人LIF融合蛋白表达纯化及其活性鉴定
- 2013年
- 目的:原核表达重组hLIF融合蛋白并进行诱导表达、纯化及活性鉴定。方法:将hLIF基因克隆至pThioHisA载体,构建融合表达载体pThioHisA-hLIF,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经亲和层析后,Western blot检测目的蛋白的特异性。用小鼠胚胎干细胞脱饲养层培养对纯化后的重组hLIF融合蛋白进行生物活性的鉴定。结果:降低诱导温度和延长诱导时间能增加hLIF融合蛋白的可溶性表达,纯化后的重组蛋白纯度大于95%,Western blot检测显示了良好的特异性。在脱饲养层细胞培养条件下,添加纯化的hLIF融合蛋白能够有效的维持小鼠胚胎干细胞的未分化状态。结论:重组hLIF融合蛋白可在大肠杆菌中高效表达,具有良好的特异性,为干细胞研究及hLIF蛋白的其他功能研究奠定了基础。
- 孙静王斌段志青胡凝珠李建芳李彦涵胡云章
- 关键词：小鼠胚胎干细胞生物活性鉴定
- 环境污染物与生物大分子相互作用的光谱法研究进展
- 2010年
- 光谱技术是研究小分子和生物大分子相互作用的非常有效且应用最广泛的方法。综述了20世纪90年代以来环境污染物质与血清白蛋白、核酸等生物大分子相互作用的研究现状,重点介绍了光谱法研究进展。
- 段云青闵顺耕段志青
- 关键词：环境污染物血清白蛋白核酸相互作用
- 光照对小鼠活动节律及生长的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨光照周期变化对小鼠活动节律及生长的影响。方法利用不同光暗周期（LD5／5、LD10／10、LD12／12、LD14／14、LD16／16）对小鼠施加影响，观察小鼠活动性变化，并检测其生长速度和血浆皮质酮水平。结果备组小鼠活动性周期与光暗循环周期一致，LD5／5、LD16／16组的生长速度快于其余三组，LD5／5、LD16／16血浆皮质酮水平高于LD12／12组。结论小鼠的活动可以很好的适应环境变化，但超过其近日节律可调范围（20-28h）的光暗循环条件可影响其生长，很可能使其处于应激状态。
- 朱小云江舟王正荣刘延友段志青赵京卉林丽张宇要然
- 关键词：近日节律血浆皮质酮
- 广谱流感噬菌体微球疫苗对豚鼠的免疫保护作用
- 2011年
- 目的探讨广谱流感噬菌体微球疫苗对分别感染H3N2、H1N1和B型流感病毒豚鼠的免疫保护作用。方法以广谱流感噬菌体微球疫苗免疫豚鼠,1个月后采血,间接ELISA法检测豚鼠血清中抗流感病毒IgG抗体的滴度;并于采血后3 d,经滴鼻途径分别攻击3个型别的流感病毒,攻击后3 d,检测豚鼠鼻腔洗液和肺组织中的病毒滴度。结果免疫豚鼠血清中均能检测出抗H1N1、H3N2和B型流感毒株的IgG抗体;分别以H3N2、H1N1和B型流感病毒攻击后3 d,在疫苗组豚鼠鼻腔洗液中检出少量病毒,而肺组织中则未检出,空白对照组豚鼠鼻腔洗液和肺组织中均检出较大量的流感病毒。结论广谱流感噬菌体微球疫苗对感染H3N2、H1N1和B型流感病毒的豚鼠均具有一定的免疫保护效果。
- 王海漩乌美妮汤洋李建芳李彦涵胡云章赵蕊蕊沈霏段志青胡凝珠
- 关键词：流感病毒A型H3N2亚型流感病毒A型H1N1亚型流感病毒B型噬菌体
- 光谱法研究杀鼠剂溴鼠灵与环糊精超分子体系及分析应用被引量：2
- 2010年
- 利用光谱法研究了伊环糊精与二代抗凝杀鼠剂溴鼠灵的超分子作用，根据Benesi-Hildebrand法确定二者的包络比为1：1，室温下包络常数为1．048×10^4L·mol^-1实验还考察了二者的包络机理，推测主要是溴鼠灵结构中的疏水基团联苯基进入了伊环糊精的疏水空腔。同时发现，超分子包络物的形成可以大大增强溴鼠灵的荧光发射，据此，建立了水溶液中测定溴鼠灵的荧光分析方法。在优化实验条件下，线性范围8．0×10^-8～4．0×10^-6mol·L^-1（r=0．9994），检出限为8．8×10^-9mol·L^-1，并成功地用于环境水中微量滨鼠灵的测定。
- 段云青段志青闵顺耕熊艳梅段佳叶升峰王冬
- 关键词：Β-环糊精荧光分析法
- 两种佐剂甘草酸二铵和苦参素对甲型肝炎病毒抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响被引量：6
- 2014年
- 目的探讨两种佐剂甘草酸二铵和苦参素对甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将两种佐剂均按低(100μg)、中(500μg)、高(1 mg)3个剂量,分别与18 EU HAV抗原混合,免疫ICR小鼠,并设生理盐水对照组(生理盐水200μl)、HAV抗原对照组(HAV抗原18 EU)和铝佐剂对照组(HAV抗原18 EU+铝佐剂300μg),共9组,均经腹部皮下多点注射,共免疫1次。分别于免疫后第4、8、12、16周采血,分离血清,采用ELISA法检测抗-HAV IgG抗体水平。免疫后第16周处死小鼠,分别取甘草酸二铵和苦参素最佳剂量组及生理盐水对照组小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏组织,进行病理观察。结果免疫后第4、8、12、16周,除生理盐水对照组外,其他各组小鼠血清中均可检测到抗-HAV IgG抗体,且抗体水平除甘草酸二铵中剂量组和苦参素低剂量组外,均在第8周达峰值;甘草酸二铵各剂量组小鼠的血清抗体水平均明显高于HAV抗原对照组(P<0.05),其中甘草酸二铵低剂量组的抗体水平最高,且在第8周时超过铝佐剂对照组;苦参素各剂量组小鼠免疫后各周血清抗-HAV IgG抗体水平均显著高于HAV抗原对照组(P<0.05),其中苦参素低剂量组抗体水平最高,其抗体水平在第12周达峰值。实验期间,各组小鼠均未出现异常表现,各组织均未发现病理改变。结论甘草酸二铵和苦参素均能明显增强HAV抗原诱导小鼠体液免疫应答的水平,具有成为新型疫苗佐剂的研发价值。
- 王霄罗婷李虹娟段志青王陈芸王海漩胡云章胡凝珠
- 关键词：甘草酸二铵苦参素佐剂体液免疫
- 甲磺酸去铁胺佐剂对甲型肝炎病毒抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨甲磺酸去铁胺（deferoxamine，DFO）佐剂对甲型肝炎病毒（hepatitis A virus antigen，HAV）抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将不同剂量的DFO（0.6、1、4、8mg）佐剂分别与HAV抗原18EU混合，免疫ICR小鼠，并设生理盐水对照组（生理盐水200 μl）、HAV抗原对照组（HAV 18 EU）、铝佐剂对照组（铝佐剂300μg＋HAY抗原18EU）和复合佐剂组（HAY抗原18EU＋DFO1mg＋铝佐剂150 μg），均经腹部皮下多点注射，0.2ml／只，共免疫1次。分别于免疫后第4、8、12、16周，采用间接ELISA法检测小鼠血清中抗-HAV IgG水平，并进行安全性试验。结果除生理盐水对照组外，其他各组小鼠血清在各时间点均能检测到抗.HAVIgG；除DFO 0.6mg组外，抗体滴度均在第8周达峰值；不同剂量DFO组的抗体水平均明显高于HAV抗原对照组，其中DFO4mg和8mg组在8～16周时抗体水平显著高于HAV抗原对照组，且差异有统计学意义（P〈0.05），但与铝佐剂对照组比较，差异无统计学意义（P〉0.05）；在8～16周时，同一时间DFO4mg、DFO8mg和复合佐剂组的抗体水平较高，并能维持较长时间，至第16周时仍能达到与铝佐剂对照组相当的水平。结论DFO佐剂能显著增强HAV抗原诱导小鼠的体液免疫应答，有望开发为一种可替代铝佐剂的新型佐剂。
- 罗婷李虹娟王霄段志青李萍王海漩胡凝珠胡云章
- 关键词：佐剂体液免疫
- 节律基因mPer1对化疗药物阿霉素敏感性的影响被引量：3
- 2008年
- 目的评价小鼠乳腺癌EMT6细胞中节律基因mPer1过表达对化疗药物阿霉素(ADM)敏感性的影响。方法将pcDNA3.1(+)-mPer1质粒转染至EMT6细胞中(EMT6-mPer1组),以pcDNA3.1(+)质粒为对照(EMT6-vect组),通过RT-PCR、Western Blotting检测转染效率;给予ADM处理,MTT法检测细胞生长情况,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的变化;RT-PCR检测凋亡相关基因mRNA的水平。结果在ADM处理后,与对照组比较,转染mPer1基因细胞表现为:S期比例增加,凋亡率升高〔EMT6-vect:(65.65±0.07)%;EMT6-mPer1:(72.35±0.57)%〕,细胞生长抑制率增加〔EMT6-vect:(42.18±5.73)%;EMT6-mPer1:(53.28±7.32%)〕及p53 mRNA表达量增加(EMT6-vect:0.48±0.08;EMT6-mPer1:1.18±0.02)。结论节律基因mPer1过表达可以提高该细胞对阿霉素的敏感性。
- 段志青朱小云张宇汪宇辉刘延友郭慧玲肖静王正荣
- 关键词：节律基因基因阿霉素药物敏感性
- 节律基因mPER1对小鼠Lewis肺癌细胞迁移的影响被引量：1
- 2007年
- 目的通过节律基因mPeriod1(mPer1)过表达,研究mPer1对小鼠Lewis肺癌细胞迁移的影响。方法采用脂质体介导法将mPer1基因转染入Lewis细胞。通过RT-PCR检测mPer1在Lewis细胞中的表达;采用Chemico公司QCM(tm)24-Well Colorimetric Cell Migration Assay检测细胞迁移的变化。结果与pcDNA3.1空质粒相比,pcDNA3.1-mPer1转染组mPer1表达增加,其迁移率与对照组比较明显下降。结论节律基因mPer1过表达能够抑制Lewis肺癌细胞的迁移。
- 赵京卉汪宇辉刘延友段志青林丽要然朱小云王正荣
- 关键词：细胞迁移近日节律
- 氢氧化锌与低分子量透明质酸复合佐剂对甲肝乙肝联合抗原的体液免疫增强作用被引量：9
- 2012年
- 目的探讨氢氧化锌与低分子量透明质酸(Low molecular weight hyaluronic acid,LHA)复合佐剂对甲肝乙肝联合抗原诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法在甲肝乙肝联合抗原中加入不同配比的Zn(OH)2与LHA复合佐剂,经皮下免疫ICR小鼠,并设铝佐剂组、生理盐水对照组和单纯抗原组。分别于免疫后4、8、12和16周采血,分离血清,ELISA法检测小鼠血清抗-HAV IgG和抗-HBsAg IgG水平。结果除对照组小鼠血清检测不到抗-HAV IgG抗体外,其余各组小鼠血清抗-HAV IgG水平在12周时达峰值,抗-HBsAg IgG水平在8周时达峰值,以后逐渐下降;免疫后4、8、12和16周,多数复合佐剂组抗-HAV IgG和抗-HBsAg IgG水平与抗原组和铝佐剂组相比,显著增强(P<0.05),且抗体水平持续时间较长。结论适当剂量配比的氢氧化锌与LHA复合佐剂能增强甲肝乙肝联合抗原诱导的体液免疫应答。
- 施建东胡凝珠赵蕊蕊沈霏段志青胡云章
- 关键词：体液免疫
