桂云
- 作品数：15 被引量：27H指数：3
- 供职机构：安徽省立医院更多>>
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- 荧光原位杂交技术检测宫颈病变中C-MYC基因的表达及其意义被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨c-myc原癌基因在宫颈病变中的表达及其临床意义。方法:筛选114例宫颈细胞涂片,按最终病理学结果分组,其中正常宫颈20例,CINⅠ20例,CINⅡ25例、CINⅢ25例、宫颈癌24例;同时选取上述病例的宫颈病理切片,均用FISH方法检测c-myc基因的表达情况。结果:①C-myc基因在不同细胞学分级中即ASCUS、LSIL、HSIL和SCC宫颈脱落细胞中的阳性表达率为0.0%、20.8%、38.9%、61.2%、95.2%,各组间差异有统计学意义(P<0.01)。②C-myc基因在不同病理学分级中即正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌脱落细胞中的阳性表达率分别为0.0%、10.0%、44.0%、72.0%、90.2%,其组间差异有统计学意义(P<0.01)。③在宫颈病理切片组织中C-myc基因阳性表达率在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌组织中依次为0.0%、20.0%、56.0%、80.0%、95.0%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:c-myc基因在各级CIN和宫颈癌的脱落细胞及组织中均有异常扩增,其扩增率随着宫颈病变程度增加而增加,提示c-myc基因异常扩增在宫颈病变筛查中具有一定的价值和意义。
- 丁玉兰赵卫东朱园园金夏冯定庆宣恒华周虎桂云程敏李青
- 关键词：荧光原位杂交宫颈癌宫颈上皮内瘤变
- 交界性卵巢肿瘤保留生育功能治疗方法进展被引量：6
- 2012年
- 保留生育功能的手术治疗是交界性卵巢肿瘤(borderline ovarian tumors,BOTs)年轻患者保留生育能力的最佳治疗手段。保留生育功能的手术不仅对早期BOTs患者较安全,对于晚期有卵巢外种植的患者,若病灶可完全摘除,也可接受此种手术治疗。术后妊娠率可观,且大部分可通过自然方式妊娠。术后妊娠对病程影响较小,妊娠并发症也很少发生。早期BOTs患者术后不孕可给予促排卵药物治疗,但晚期患者则需要谨慎对待。若病变累及双侧卵巢不宜进行保守性手术,可选择胚胎冻存、卵母细胞冻存、卵巢组织冻存、接受卵母细胞赠送等方法。
- 桂云赵卫东
- 关键词：卵巢肿瘤交界性肿瘤生育力妊娠
- 自体NK细胞体外活化扩增培养的方法及其专用培养基
- 本发明公开了一种自体NK细胞体外活化扩增培养的方法及其专用培养基。该方法是利用如下成套培养基并同时添加饲养细胞体外活化扩增自体NK细胞：由培养基1、培养基2和培养基3组成的成套培养基；所述培养基1是在干细胞生长培养基中添...
- 赵卫东金夏马杰周虎周颖冯定庆张丽娜宣恒华丁玉兰桂云程敏李青王晓丽
- 文献传递
- 辐照后的AlloMNCs诱导NK细胞体外扩增被引量：1
- 2011年
- 目的探讨照射后的同种异体外周血单个核细胞(allogeneic PB-MNCs,AlloMNCs)对人自然杀伤细胞(NK)体外扩增的影响,为NK细胞的过继免疫治疗奠定基础。方法 Ficoll密度梯度离心法分离健康成人外周血单个核细胞(PBMCs),30、50和70 Gyγ射线照射后的AlloMNCs作为饲养细胞,分别加入上述PBMCs,在添加细胞因子的X-VIVO15TM无血清培养基中进行培养扩增,同时选择未添加饲养细胞的作为对照组;台盼蓝拒染法进行活细胞计数;流式细胞术检测CD56+CD3-NK细胞纯度;MTT法检测细胞杀伤活性。结果加入饲养细胞的PBMCs在添加了细胞因子的X-VIVO15TM无血清培养基中可培养21 d,30 Gy照射后的AlloMNCs作为饲养细胞时细胞扩增最明显,在第21天时扩增了270.3±10.4倍,CD56+CD3-NK细胞纯度由培养前的(9.7±2.4)%提高到扩增后的(56.5±7.8)%,与无饲养细胞的对照组相比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞杀伤实验表明,当效靶比为10∶1时,添加30Gy照射后的AlloMNCs刺激扩增的NK细胞对K562和HO8910的杀伤率平均达到59.7%、63.2%,分别与对照组的28.3%、32.2%相比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 30 Gy照射后的AlloMNCs可作为饲养细胞在体外促进NK细胞的增殖,为NK细胞的肿瘤过继免疫治疗提供了一种简单有效的扩增NK细胞的方法。
- 马杰赵卫东周虎张丽娜丁玉兰宣恒华桂云金夏
- 关键词：自然杀伤细胞扩增饲养细胞免疫治疗
- 腹腔镜下复杂子宫肌瘤剔除术学习曲线研究被引量：6
- 2011年
- 目的 评估腹腔镜下复杂子宫肌瘤剔除术不同阶段的手术效果,探讨腹腔镜下复杂子宫肌瘤剔除术的学习曲线.方法回顾性分析2002年5月～2010年5月安徽医科大学附属省立医院由同一组手术医生完成的117例腹腔镜下复杂子宫肌瘤剔除术患者的临床资料.以简单正弦拟合两周期点将资料按手术日期先后次序分为6组（A、B、C、D、E为每组20例,F组17例）.比较各组平均手术时间、术中平均出血量、中转开腹率、手术输血率、术后病率、术后感染率、术后平均住院时间,分析不同阶段的手术效果.结果 手术时间A组（117.3±19.9） min,大于B组（102.9±18.9）min、C组（85.9±8.5）min、D组（95.1±20.1）min、E组（84.1±15.8）min和F组（92.4±11.5）min,术中出血量A组（164.7±25.4）ml,大于B组（140.2±28.5）ml、C组（127.8±22.9）ml、D组（126.5±26.3）ml、E组（120.9±22.4）ml和F组（120.2±15.7）,差异均有统计学意义;术后平均住院时间A（5.6±1.0）d、B（5.4±1.0）d、C（5.5±0.8）d、D（5.2±0.8）d和E（5.0±1.0）d,5组比较,差异均无统计学差异,5组术后平均住院时间大于F组（4.6±0.8）d,差异有统计学意义;手术输血率A组占25%、B组占10 %、C组占5 %、D组占5 %、E组和F组为0,呈逐渐下降趋势,差异有统计学意义;6组中转开腹率、术后病率和术后感染率比较,差异均无统计学意义.6组均无严重并发症发生.结论 随着手术病例增多,手术时间缩短,术中出血量减少,手术输血率呈逐渐下降,住院时间、转开腹率、术后病率和术后感染率变化不大;腹腔镜下复杂子宫肌瘤剔除术的学习曲线大约为20例.
- 赵卫东周虎马杰桂云凌斌吴大保胡卫平孙芳林汪青李红申震
- 关键词：腹腔镜复杂子宫肌瘤
- IL-15基因修饰的NK细胞对原代卵巢癌细胞的杀伤作用被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨γ射线照射后的IL-15基因修饰的NK细胞(简称NK-ustc细胞)对原代卵巢癌细胞的体内外杀伤活性。方法:分离卵巢癌患者腹水原代卵巢癌细胞。不同剂量γ射线(0、1、2、4、8、16 Gy)照射NK-ustc细胞,3H-TdR掺入法检测照射后NK-ustc细胞的增殖情况,51Cr释放法检测NK-ustc细胞对K562和原代卵巢癌细胞的杀伤活性。建立人裸鼠荷卵巢癌模型,随机分为NK-ustc治疗组(模型鼠腹腔注射辐照后的NK-ustc细胞)和培养基对照组,同时设空白对照组(正常裸鼠腹腔注射辐照后的NK-ustc细胞),观察各组裸鼠体重、腹围及生存期。结果:1、2、4、8、16 Gy辐照后NK-ustc细胞的增殖率分别为(62.1±9.8)%、(41.3±8.7)%、(14.6±4.1)%、(0.1±0.03)%和(0.2±0.04)%。当效靶比为10∶1时,0、8 Gy辐照后NK-ustc细胞对K562的杀伤率分别为(45.4±8.9)%和(43.1±6.4)%,对原代卵巢癌细胞的杀伤率分别为(54.6±6.4)%和(48.3±5.8)%,说明辐照不影响NK-ustc细胞的杀伤活性(P>0.05)。辐照后NK-ustc细胞治疗组荷瘤小鼠的中位生存期为75 d,对照组为39 d(P<0.05),空白对照组小鼠全部存活。结论:γ射线照射可有效抑制NK-ustc细胞增殖,但保留该细胞对原代卵巢癌细胞的杀伤活性。
- 马杰赵卫东马娟金夏张丽娜丁玉兰周虎宣恒华桂云
- 关键词：自然杀伤细胞卵巢癌免疫治疗
- 不同刺激因子组合诱导NK细胞体外扩增及其功能的研究被引量：3
- 2011年
- 目的探讨不同刺激因子组合对人自然杀伤细胞(NK细胞)体外扩增及其功能的影响。方法 VarioMACS分选健康成人外周血单个核细胞(PBMC)中的NK细胞,依据添加刺激因子的不同分为A组(IL-2)、B组(IL-2+IL-15)、C组(IL-2+IL-15+饲养细胞),饲养细胞为30 Gyγ射线照射后的同种异体外周血单个核细胞(allogeneic PB-MNCs,AlloMNCs),未添加任何刺激因子的细胞的作为对照组,在干细胞生长培养基(SCGM)中进行培养扩增14 d,第1天添加PHA及OKT3,第5天离心洗去;台盼蓝拒染法进行活细胞计数;流式细胞术检测分选及扩增前后CD56+CD3-NK细胞纯度;改良的MTT法检测NK细胞对K562、HO8910及PBMC的杀伤活性。结果经VarioMACS免疫磁珠阴性分选后NK细胞纯度由分选前的(9.2±2.9)%提高到(93.5±3.2)%,培养14 d后,除对照组NK细胞纯度降低外,其余组与扩增前无明显差异(P>0.05)。细胞扩增倍数分别为17.2±1.7、51.3±6.6和82.4±9.8倍,均显著高于对照组(5.7±1.2)(P<0.01)。实验组组间比较,C组明显高于A组和B组(P<0.01)。细胞杀伤实验表明,当效靶比为10∶1时,各组的杀伤活性显示为C组>B组>A组>对照组,C组扩增的NK细胞对K562及HO8910的杀伤率可分别达到(70.1±8.9)%和(64.6±6.2)%,显著高于对照组、A组(P<0.01)和B组(P<0.05),对PBMC的杀伤率仅为(4.2±1.2)%。结论经VarioMACS分选获得的NK细胞,在体外使用SCGM培养基培养,添加IL-2、IL-15和照射后AlloMNCs作为刺激因子,可获得高效扩增和有效活化的NK细胞,为NK细胞的肿瘤过继免疫治疗提供了一种简单有效的扩增高纯度NK细胞的方法。
- 马杰赵卫东张丽娜周虎丁玉兰宣恒华桂云金夏
- 关键词：自然杀伤细胞扩增饲养细胞免疫治疗
- 曲古菌素A联合全反式维甲酸诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的协同作用被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨曲古菌素A(TSA)联合全反式维甲酸(ATRA)诱导宫颈癌SiHa细胞凋亡的协同作用及其相关机制。方法:TSA与ATRA联合或者单独作用于SiHa细胞,采用CellTiter 96Aqueous法检测细胞增殖情况,7AAD荧光染色法观察细胞凋亡形态,Annexin V/7AAD法流式细胞术检测细胞凋亡率,Western Blot法检测P53、BCL-2和Caspase-3蛋白的表达变化。结果:细胞增殖实验结果显示TSA联合ATRA对SiHa细胞有显著的增殖抑制作用;7AAD荧光染色结果显示联合用药组细胞凋亡明显增加,出现核碎裂等典型凋亡改变;流式细胞术检测结果显示联合用药组凋亡率显著增高;Western Blot结果显示:与对照组比较,联合用药组中P53和活化性Caspase-3蛋白的表达水平显著升高,而BCL-2蛋白表达水平显著下降。结论:TSA联合ATRA在体外对SiHa细胞具有明显的协同抑制增殖和诱导凋亡作用,推测其机制可能与P53和活化性Caspase-3蛋白表达水平上调、BCL-2蛋白表达水平下调有关。
- 周虎冯定庆桂云宣恒华丁玉兰赵卫东
- 关键词：曲古菌素A全反式维甲酸SIHA细胞
- c-myc基因扩增与HPV感染在宫颈病变中的关系被引量：3
- 2012年
- 分别以HC-Ⅱ法及荧光原位杂交(FISH)法检测109例不同级别宫颈病变患者宫颈脱落细胞中高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及c-myc基因扩增情况,结果显示宫颈脱落细胞中c-myc基因的扩增率、高危型HPV的感染率与宫颈病变程度密切相关,高危型HPV感染和c-myc基因扩增在宫颈癌的发生发展中可能起着协同作用。
- 丁玉兰赵卫东冯定庆朱园园金夏宣恒华周虎桂云
- 关键词：高危型HPV荧光原位杂交宫颈上皮内瘤变
- 自体NK细胞体外活化扩增培养的方法及其专用培养基
- 本发明公开了一种自体NK细胞体外活化扩增培养的方法及其专用培养基。该方法是利用如下成套培养基并同时添加饲养细胞体外活化扩增自体NK细胞：由培养基1、培养基2和培养基3组成的成套培养基；所述培养基1是在干细胞生长培养基中添...
- 赵卫东金夏马杰周虎周颖冯定庆张丽娜宣恒华丁玉兰桂云程敏李青王晓丽
