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高表达FasL的Sertoli细胞在睾丸局部感染时的免疫调节作用被引量：2: 2003年; 目的　研究高表达FasL的转基因小鼠Sertoli细胞在睾丸局部感染时的免疫调节作用。方法　以溶脲脲原体(Ureaplasmaurealyticum ,UU)直接注入FasL转基因的小鼠膀胱模拟上行性感染的途径 ,分别在 1、2和 3周处死小鼠 ,分离取得睾丸组织 ,观察组织的病理变化 ,并从小鼠睾丸组织分离获得高纯度的Sertoli细胞 ,然后抽提总RNA ,用RT PCR方法比较正常组与UU感染组之间FasL、IL 1α、TGF βmRNA的表达差异。结果　与正常组相比 ,UU感染的小鼠 ,睾丸组织发生明显的病理改变 ,Sertoli细胞表达的调节因子在mRNA水平也发生了明显的变化 :其FasLmRNA的表达在 1周 ,3周时与正常无明显区别 ,2周时明显升高 ;IL 1α、TGF βmRNA的表达在 1～ 3周均为升高。; 刘照平林波马映华胡佳华陈广洁席晔斌王保国包士三李伟毅郭礼和; 关键词：SERTOLI细胞免疫调节

转基因小鼠高表达的FasL对Sertoli细胞免疫调节功能的影响被引量：1: 2004年; 目的 :研究转基因小鼠高表达的FasL对Sertoli细胞在睾丸局部感染时的免疫调节作用的影响。方法 :将溶脲脲原体 (UU)分别注入FasL转基因及野生型小鼠膀胱 ,模拟上行性感染的途径。分别在感染后 1、2和 3wk处死小鼠 ,分离睾丸组织观察其病理变化 ,并用免疫组化染色法比较UU感染前后 ,Ser toli细胞上FasL和TGF β、IL 1α、IL 6的表达及分泌格局的差异。从野生型小鼠睾丸组织中分离高纯度的Sertoli细胞 ,与未感染UU的对照组相比 ,观察UU感染后FasL+ Sertoli细胞介导Fas+ Jurkat细胞的凋亡能力的变化。结果 :UU感染组的转基因小鼠 ,睾丸组织发生的病理改变比野生型更为明显 ;两种小鼠感染后Sertoli细胞分泌的调节因子变化格局不同 ;感染后Sertoli细胞对Jurkat细胞的杀伤能力增强。结论 :在抗感染免疫中 ,转基因表达的FasL可影响Sertoli细胞分泌细胞因子的格局 ,进而影响睾丸局部的免疫平衡。过高表达的FasL对机体的抗感染应答并非一定有利。; 刘照平李伟毅林波马映华胡佳华陈广洁席晔斌王保国包士三郭礼和; 关键词：FASL 转基因小鼠 SERTOLI细胞免疫调节

GDNF、TGF-β1联合治疗帕金森病的实验研究被引量：7: 2004年; 目的采用阳离子脂质体介导的方法,探讨胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)基因联合治疗对帕金森病(PD)的疗效和两者的相互影响。方法用6-羟基多巴(6-OHDA)破坏SD大鼠一侧黑质,建立帕金森病模型,并分为对照组、GDNF治疗组、GDNF+TGF-β1治疗组。通过立体定向仪将DOTAP脂质体包裹的GDNFcDNA、TGF-β1cDNA注入大鼠的纹状体,观察阿朴吗啡(APO)诱导的旋转行为,应用RT-PCR、Westernblot分别从mRNA和蛋白水平检测GDNF在脑内表达的变化。结果治疗2周后,PD大鼠旋转行为明显减轻(P<0.01)。治疗后4周,GDNF+TGF-β1组症状进一步减轻,而GDNF组没有继续改善。RT-PCR、Westernblot显示,与GDNF组相比,联合治疗组GDNF在mRNA、蛋白水平均有较高的表达。结论阳离子脂质体介导GDNF、TGF-β1能改善帕金森病症状,TGF-β1是GDNF重要的联合因子。; 孙兵惠国桢刘相名林波余路阳郭礼和; 关键词：GDNF TGF-Β1 帕金森病

原代大鼠海马神经元的高效转染被引量：5: 2004年; 用原代大鼠海马神经元为模型,对新型电转染方法Nucleofector^(TM)与脂质体DOTAP和Lipofectaimine^(TM)的转染效率和转染前后细胞存活率进行比较研究,探讨Nucleofector^(TM)的高效性与可靠性。从E18胎鼠海马中取出神经元进行体外培养,并用神经微丝(NF)抗体进行免疫细胞化学染色鉴定细胞类型。分别用DOTAP,Lipofectamine^(TM) and Nucleofector^(TM)包裹pCMV-eGFP质粒转染原代大鼠海马神经元。神经元的存活率用流式细胞促检测。实验结果表明:DOTAP和Lipofectamine^(TM)的基因转染效率仅为1.55％和2.45％,而Nucleofector^(TM)的转染效率则超过20％;细胞转染前后的存活率在DOTAP组分别为98.37％和88.35％,Lipofectamine^(TM)组分别为98.37％和90.11％,而在Nucleofector^(TM)组中分别为98.37％和51.82％。上述实验数据表明:Nucleofector^(TM)转染技术能高效并安全地转染原代大鼠海马神经元,但死亡率较高。; 苗宏生余路阳林波武家才郭礼和惠国桢; 关键词：原代培养中枢神经系统海马神经元转染绿色荧光蛋白

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林波