杨昀
- 作品数:16 被引量:54H指数:4
- 供职机构:华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 轴突导向因子netrin-1基因沉默对胎盘血管生成影响的体内外实验研究被引量:2
- 2011年
- 目的 研究轴突导向因子netrin-1基因沉默对胎盘血管生成的影响.方法 应用RNA 干扰技术分别沉默netrin-1基因在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和孕鼠胎盘组织中的表达;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;克隆形成实验检测细胞增殖能力;细胞迁移实验检测细胞迁移能力;小管形成实验检测细胞管腔形成能力;观察胎鼠体质量;CD34因子的免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测孕鼠胎盘的微血管密度.结果 (1)HUVEC:沉默netrin-1基因后,HUVEC细胞活性受到抑制,克隆形成率由(69±6)%降至(46±5)%,迁移细胞数由(86±17)个降至(46±13)个,小管形成的分支点数由(37±9)个降至(17±5)个,HUVEC的netrin-1基因沉默前后比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)孕鼠胎盘组织:沉默孕鼠胎盘组织netrin-1基因后,胎鼠体质量由(2.39±0.17)g降至(2.12±0.10)g,胎盘微血管密度由(258±38)条/mm2降至(197±32)条/mm2,孕鼠胎盘组织netrin-1基因沉默前后比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 沉默netrin-1基因,可以抑制体外HUVEC的细胞活性及增殖、迁移和管腔形成能力,同时使体内胎盘组织的血管生成能力下降.netrin-1是重要的促胎盘血管生长基因.
- 谢涵邹丽朱剑文杨昀钟少平王乾华
- 关键词:神经生长因子类肿瘤抑制蛋白质类基因沉默新生血管化生理性胎盘
- 后穹窿穿刺液与外周血中β-HCG比值在不典型异位妊娠中的临床诊断价值被引量:2
- 2010年
- 目的:探讨后穹窿穿刺液中β-HCG定量测定对不典型异位妊娠的诊断价值。方法:检测92例因可疑异位妊娠患者血β-HCG及后穹窿穿刺液中β-HCG的含量,并计算2者比值,分析其在不典型异位妊娠中的诊断价值。结果:92例患者中81例经腹腔镜探查证实为异位妊娠,其后穹窿穿刺液中与外周血β-HCG分别为(21746.58±9862.39)mU/mL及(1854.34±998.72)mU/mL,比值为12.43±5.72,其中有1例(1.23%)外周血β-HCG结果在正常范围内;11例经诊断性刮宫术证实为宫内妊娠,其后穹窿穿刺液中β-HCG与外周血β-HCG分别为(16472.63±7892.57)mU/mL和(14937.57±6364.83)mU/mL,比值为1.13±0.63,前者比值远大于后者,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:后穹窿穿刺液与外周血β-HCG比值对不典型异位妊娠的诊断有较大的意义。
- 沙慧兰杨昀
- 关键词:Β-HCG
- 胎盘支持的产时胎儿手术围手术期问题及对策分析被引量:4
- 2011年
- 降低先天缺陷儿的出生率、改善先天缺陷儿的预后,是当前医疗事业所面临的巨大挑战。完全胎盘支持的产时胎儿手术是胎儿外科的一种,即在保持胎儿胎盘循环的同时,进行胎儿先天性缺陷的矫治。其围手术期存在诸多的问题和挑战,如准确的产前诊断、安全而有效的母体和胎儿麻醉、多学科默契的手术配合以及术中的胎儿安全和胎儿监护等。产时胎儿手术的关键是多学科协作,术前充分讨论,拟定周详的治疗方案。高质量的产前诊断中心是开展一切工作的前提,其医学影像、超声、遗传实验室及临床遗传咨询专家必须齐备,在保证母儿安全的前提下,麻醉过程中如何保持子宫松弛、预防胎盘剥离而危及胎儿是手术成功与否的重要环节。相关科室包括产科、新生儿内科、小儿外科、麻醉科以及手术室必须实力雄厚,而且配合默契,形成一个相对固定的胎儿手术团队,这是成功开展产时胎儿手术的关键。此外,准确、及时的胎儿监护是保障胎儿安全的基础,充足的氧供和有效的氧合是保障胎儿安全的关键。
- 朱剑文赵茵杨昀邹丽
- 关键词:胎儿手术围手术期
- 轴突导向因子Netrin-1在血管生成中调节作用的实验研究被引量:15
- 2007年
- 目的研究神经轴突导向因子 Netrin-1在血管生成中的作用及其机制。方法原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),用逆转录多聚酶链反应检测其上 Netrin-1的各种受体表达,并用体外实验分别检测 Netrin-1对 HUVEC 增殖,迁移和管状结构形成的作用,并用兔角膜新生血管实验研究在不同浓度 Netrin-1作用下体内血管新生的情况。结果在 HUVEC 上仅检测到一种受体 UNC5B的表达。在体内和体外实验中均发现 Netrin-1不仅是个促血管生成因子,也是一个抑制血管生成因子,在浓度低于500 ng/ml 时均表现为促进作用,而在1000~5000 ng/ml 时表现为抑制作用。其中,当 Netrin-1为50 ng/ml 时,HUVEC 的增殖能力最强,当 Netrin-1浓度为100 ng/ml 时,HUVEC 的迁移能力最强。结论 Netrin-1在血管生成中起着促进和抑制的双重调控作用,这种双重调控作用取决于Netrin-1浓度,其中抑制作用和受体 UNC5B 相关。
- 杨昀邹丽王勇张进祥
- 关键词:脐静脉内皮角膜新生血管化
- 内皮型一氧化氮合酶基因多态性与妊娠期高血压疾病的相关性研究被引量:2
- 2005年
- 目的:探讨内皮型一氧化氮合酶基因(eNOS)第4内含子27bp可变数目的短片段重复序列(variablenumbertandemrepeats,VNTR)的多态性现象与妊娠期高血压疾病(hypertensivedisordercomplicatingpregnancy)的相关性研究,并探讨该位点的多态性在发病机制中的作用。方法:应用聚合酶链反应结合聚丙烯酰胺电泳,银染技术检测患者和健康孕妇的eNOS基因第4内含子多态性。采用RT-PCR技术检测对照组、病例组胎盘中eNOSmRNA的含量,对两组中不同基因型胎盘eNOSmRNA表达水平分别进行半定量比较。结果:eNOS基因VNTR4a等位基因频率在正常孕妇组为7.50%,明显低于病例组的16.00%(χ2=4.63,P=0.031,OR值为2.35,95%可信限为4.74~23.2),4a/4b+4a/4a基因型频率在两组分别为28.00%和13.75%(χ2=5.08,P=0.024,OR=2.69,95%可信限为6.12~35.4)差异具有统计学意义。病例组eNOSmRNA的表达明显低于正常组,病例组中4b4b基因型组的eNOSmRNA水平明显高于4a/4b+4a/4a基因型组(76.81±1.41vs62.79±0.95,t=11.63P=0.012)。结论:eNOS基因第4内含子VNTR与妊娠期高血压疾病具有相关性,这可能与该位点的突变可能引起eNOSmRNA转录减少有关。
- 赵茵邹丽杨昀
- 关键词:ENOS基因妊娠期高血压内皮型一氧化氮合酶基因VNTRMRNA水平
- 胎盘早剥、重度子痫前期致DIC、死胎1例被引量:2
- 2010年
- 1病例资料患者37岁,孕9产1,因"孕34+5周,持续性腹痛6h"收入院。患者平时月经规律,LMP:2008年12月17日,停经早期无明显早孕反应,孕4个月余自觉胎动,未行规律产检。于2009年8月18日凌晨0时30分无明显诱因开始腹部疼痛,呈持续性加重,
- 王莹杨昀邹丽
- 关键词:胎盘早剥子痫DIC死胎
- UNC5B基因靶向shRNA表达质粒的构建及体外RNA干扰被引量:2
- 2007年
- 目的:探讨人UNC5B基因的双链RNA在体外对UNC5B表达的干扰作用及其规律。方法:构建两个能产生UNC5B的发夹状RNA(shRNA)的质粒载体Pgenesil-UNC5B1及Pgenesil-UNC5B2作为实验组,并构建无关序列shRNA表达质粒Pgenesil-NC作为阴性对照,将3种质粒分别转染脐静脉内皮细胞(HUVEC)。转染24h后,荧光倒置显微镜下观察质粒转染效率,用G418筛选得到稳定转染的细胞,通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测UNC5B在HUVECs中的表达情况。结果:转染24h后,在荧光显微镜下可见绿色荧光,转染效率约为40%~50%。实验组经G418筛选后稳定转染的细胞UNC5BmRNA均受到抑制,两种UNC5B基因靶向shRNA表达质粒对HUVECs中UNC5B抑制率分别为88%和52%。结论:本研究所构建的UNC5BshRNA表达质粒可在体外高效特异地抑制UNC5B的表达,为进一步实验奠定了基础。
- 杨昀邹丽王勇张进祥
- 关键词:基因小分子干扰质粒重组蛋白质类
- 早孕期人滋养细胞CXCR4/CXCL12的表达及低氧对其的影响被引量:1
- 2005年
- 目的:研究人早孕期滋养细胞CXCR4/CXCL12的表达情况及低氧对其表达的调节作用。方法:免疫组织化学法检测早孕期绒毛组织中及原代培养的滋养细胞CXCR4/CXCL12的表达情况;实时定量PCR检测低氧状态下滋养细胞CXCR4mRNA水平。结果:胎盘绒毛柱、滋养细胞及血管内均有CXCR4/CXCL12表达;低氧培养12、244、8和72小时后滋养细胞CXCR4mRNA表达增加,显著高于正常氧条件下的表达情况。结论:早孕期胎盘表达CXCR4/CXCL12对于维系正常妊娠的顺利进行可能发挥重要作用;低氧是CXCR4表达的重要调节因子,可能参与了妊娠的病理生理过程。
- 王轶英邹丽杨昀
- 关键词:趋化因子趋化因子受体滋养细胞低氧实时定量PCR
- SDF-1/CXCR4在滋养层细胞中的表达及其在母胎免疫耐受中的作用被引量:4
- 2006年
- 目的:研究趋化因子SDF1及其配体CXCR4在滋养层细胞中的表达及其在母胎免疫耐受中的作用。方法:取早孕期的绒毛,分离纯化培养绒毛外滋层养细胞(extravilloustrophoblast,EVT),用免疫细胞化学染色法检测SDF1与CXCR4在绒毛中的表达。用流式细胞术筛选源于滋养层细胞高表达CXCR4的绒癌细胞株用于体外微孔隔离室迁移实验,以分析SDF1的趋化活性。用免疫组织化学染色法检测早孕期绒毛及足月妊娠胎盘中SDF1及CXCR4的表达。结果:在EVT中可检出SDF1和CXCR4的表达,在一定范围内,SDF1的趋化活性与其浓度呈正相关(r=0.68,P<0.01)。10μg/L的SDF1趋化作用最强,最大趋化指数CI为1.62±0.12。在早孕期的绒毛及足月胎盘中,滋养层细胞的胞膜和细胞质中均检出SDF1和CXCR4的表达,但在足月胎盘中的表达强度明显低于早孕期的绒毛组织(P<0.01)。结论:SDF1/CXCR4在妊娠中发挥着重要作用,对维系母胎免疫耐受具有重要意义。
- 杨昀邹丽王轶英
- 关键词:SDF-1CXCR4胎盘
- PLAGL2对TTF-1结合SP-C基因启动子能力影响的研究被引量:2
- 2012年
- 目的研究甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor1,TTF-1)对表面活性蛋白C(pulmonary surfactant—asso—ciated protein C,SP-C)基因启动子的调控作用及多形性腺瘤样基因2(pleiomorphic adenoma gene like-2,PLAGL2)对TTF-1结合SP-C基因启动子能力影响。方法应用体外细胞共转染后荧光素酶报告基因活性值检测技术研究TTF-1对SP-C基因启动子转录活性的调控及PLAGL2的影响作用:利用凝胶电泳迁移实验(EMSA)研究TTF-1对SP-C基因启动子靶点的结合及PLAGL2的影响作用:应用实时荧光PCR技术检测PLAGL2、TTF-1、SP—C在人胚肺和成熟小鼠肺Ⅱ型上皮细胞中mRNA水平。结果TTF-1明显提高SP—C基因启动子荧光素酶活性值(P〈0.01)。而共转染PLAGL2后则明显降低SP—C基因启动子荧光素酶活性值(P〈0.01);TTF-1能与同位素标记的SP—C基因启动子片段结合形成TTF-1-SP-CDNA蛋白复合物,PLAGL2则明显降低该蛋白复合物形成;TTF-1、SP-C基因mRNA水平随胚肺孕周逐渐升高,PLAGL2基因mRNA水平随胚肺孕周逐渐减少。结论在肺Ⅱ型细胞中TTF-1对SP—C基因表达具有促进作用,PLAGL2则对该作用产生明显抑制影响。
- 邓飞涛葛凉芳杨昀李彦旭柴新群
- 关键词:甲状腺转录因子-1实时荧光PCR