杨惠芬
- 作品数：12 被引量：13H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- RGS4对阿片受体信号转导途径中腺苷酸环化酶活性的影响被引量：2
- 2001年
- 目的 探讨 RGS4在整体细胞中对阿片受体信号转导途径中腺苷酸环化酶 (AC)活性的影响。方法 采用共转染法将μ-受体、δ-受体和 RGS4基因导入 HEK- 293细胞，受体结合法确定转染效率。用不同浓度的吗啡、 DAMGO和 DPDPE分别激活μ-受体和δ-受体，放射性蛋白竞争结合（非标记底物）法测定 cAMP浓度 。结果 受体被其特异的激动剂激活后，单独转染 μ-受体或δ-受体基因的细胞其 AC活性被抑制，且对激动剂表现出高度的剂量依赖性；空质粒（ pcDNA3）转染的细胞之 AC活性不受各种激动剂影响 ;同时转染 RGS4和 μ-受体基因的细胞其 AC活性虽然也呈现剂量依赖性抑制，但抑制的强度比单独转染μ-受体基因的细胞明显减弱 ; RGS4和 δ-受体基因共转染并不影响δ-受体对 AC活性的抑制。受体结合实验显示 RGS4不影响μ-受体和δ-受体的表达。结论 RGS4能逆转μ-受体对 AC的抑制效应，但对δ-受体却没有相同的作用。这可能反映了不同阿片受体分子机制的差异。
- 谢志华胡萍叶菜英杨惠芬刘丽云张德昌
- 关键词：阿片受体共转染腺苷酸环化酶
- 阿片类药物长期作用对μ-中国仓鼠卵细胞基因表达的影响及与PC12细胞线粒体膜电势之间的关系被引量：1
- 2001年
- 目的 从基因水平入手，筛选 DAMGO长期作用后μ-中国仓鼠卵细胞 (μ- CHO)差异表达的基因，初步研究阿片类药物与 PC12细胞线粒体膜电势之间的关系。方法 选用μ受体特异性激动剂 DAMGO长期（ 72 h）作用于μ- CHO细胞，模拟耐受成瘾。利用差异显示 PCR、克隆、 Northern印迹分析等找出表达水平有改变的基因，测序，并与 NIH Blast数据库中序列比对。利用激光共聚焦显微成像、线粒体膜电势测定等方法，观察吗啡短期与长期作用 PC12细胞线粒体膜电势的变化。结果其中一条基因在用 DAMGO长期刺激μ- CHO细胞后基因水平出现上调，并与大鼠线粒体膜上 H＋ /磷酸基同向转运蛋白编码基因同源性很高。线粒体膜电势测定发现，用 10－ 6～ 10－ 4 mol/L吗啡短时间（ 2 h）作用 PC12细胞后，细胞内线粒体膜电势部分丧失或完全丧失；长时间（ 12～ 60 h）作用后，膜电势出现从部分丧失、完全丧失到逐步恢复的现象，上述现象均能被阿片受体拮抗剂纳洛酮阻断。结论 初步提示阿片类药物长期作用含有阿片受体的细胞后，可导致细胞线粒体功能改变，推测阿片类药物可能影响细胞线粒体电子转移、 ATP合成过程，此过程可能与阿片类药物长期激活阿片受体导致的成瘾、耐受有关。
- 陆久怡叶菜英杨惠芬武文君刘丽云张德昌
- 关键词：阿片类药物耐受PC12细胞
- 新型阿片受体配基的生物鉴定被引量：1
- 2001年
- 目的 研究新合成的阿片受体配基对μ阿片受体的激动作用。方法 采用生物鉴定的方法，检测新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡对豚鼠回肠（ GPI）纵行肌收缩的抑制作用和所激动的阿片受体亚型，评价效价强度，测定 IC50值。结果 新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡都可抑制 GPI的电刺激收缩，在 GPI上显示纯激动剂作用。新型阿片受体配基与阿片受体的结合为可逆性结合。新型阿片受体配基 1＃、 2＃、 3＃、 6＃、 8＃、 9＃和 12＃以及典型的阿片受体激动剂 DAMGO和吗啡的 IC50值分别为 (11.57± 0.71)、 (1255.00± 407.00)、 (9.40± 1.41)、 (240.60± 146.40)、 (453.00± 7.07)、 (130.60± 10.61)、 (7.68± 0.71)、 (12.04± 0.61)和 (72.15± 22.63)nmol/L。竞争性拮抗剂纳洛酮可拮抗配基的激动作用，使新型阿片受体配基、 DAMGO和吗啡的量效曲线平行右移。结论 新型阿片受体配基可激动μ阿片受体，是典型的μ受体激动剂。
- 胡萍谢志华杨惠芬仇缀佰张德昌叶菜英
- 关键词：Μ阿片受体激动剂镇痛药
- IgG经周围进入中枢神经的途径及跨细胞转运──免疫组织化学方法的观察被引量：2
- 1994年
- 将小鼠抗猪运动神经元单克隆抗体ＩｇＧ肌肉注射于大鼠，用免疫组织化学方法显示ＩｇＧ样阳性反应细胞在中枢神经系统中的分布。结果发现阳性反应细胞主要分布于脊髓前角及脑干运动核团，脊髓第Ⅷ、第Ⅹ板层和脑干网状结构的中间神经元、室管膜、下丘脑室旁核和血管及其周围的神经元或胶质细胞等处。分析可能有三种途径参与了外源性ＩｇＧ的转运，即逆行轴浆运输和跨细胞转运，跨血脑屏障，跨血脑脊液屏障。
- 谭会兵杨佳欣刘智平林嘉友石葛明曹承刚杨惠芬万选才
- 关键词：免疫组织化学方法细胞转运中枢神经脊髓前角室管膜阳性反应
- RGS蛋白对阿片受体-腺苷酸环化酶的调节及阿片受体对钾通道调节的研究进展被引量：1
- 2006年
- 本文介绍了RGS蛋白对阿片受体-腺苷酸环化酶活性的调节;阿片受体长期激活对细胞内钙离子、细胞浆酸碱度以及线粒体膜电势的影响;以及阿片受体不通过G蛋白对细胞膜外向整流钾通道的调节机理。
- 张德昌叶菜英陆久怡谢志华李志松郭磊于小莉李娟杨惠芬
- 关键词：阿片受体
- 波比宁对鼠的镇痛及抗炎作用
- 2003年
- 叶菜英李娟杨惠芬于晓丽陆久怡张德昌
- 关键词：镇痛抗炎
- 新型阿片受体配基特异性结合μ受体并抑制cAMP生成
- 2003年
- 本文研究新合成阿片受体配基对稳定表达 μ阿片受体的CHO细胞的受体结合特性和对胞内cAMP的抑制作用。采用放射性配基结合的方法研究了阿片受体配基 [3H] diprenorphine(3H dip)在稳定表达 μ阿片受体的CHO细胞模型上 ,对 μ阿片受体的饱和性结合特征及和一系列新合成阿片配基A、B、C、D、E、F、G、及DAMGO([D Ala ,N Me Phe4 ,Gly ol5] enkephalin)和吗啡的竞争性结合特征。利用竞争性结合蛋白法测定阿片受体配基对胞内cAMP的抑制作用。 [3H] diprenorphine结合 μ阿片受体的Kd值为 1 0 6nmol L ;Bmax为 930fmol mg蛋白。结果表明新配基、DAMGO和吗啡竞争性结合 μ受体的IC50 值分别为 13 33± 3 73、14 36± 1 5 8、0 6 2± 0 0 3、5 6 38± 2 33、6 5 72±2 6 4 4、33 10± 11 33、0 5 5± 0 0 6、3 6 9± 1 5 9和 1 83± 0 5 0。其中C和G配基对 μ阿片受体的亲和力高于DAMGO和吗啡。B、D、E和F配基对μ受体的亲和力低于DAMGO和吗啡。新配基、DAMGO和吗啡抑制cAMP生成的IC50 值分别为 6 4 9± 1 5 9、1390± 6 1 10、0 84± 0 11、2 33± 1 2 4、2 5 0 0± 17 2 0、1 4 2± 1 2 1、0 0 1± 0 0 1、0 10± 0 0 5和0 0 4± 0 0 1。其中G配基的抑制胞内cAMP作用最强 ,强于吗啡 。
- 胡萍叶菜英仇缀佰杨惠芬张德昌
- 关键词：Μ受体CAMP受体结合CHO细胞阿片类药物
- 抗肿瘤药物羧胺三唑的抗炎镇痛作用被引量：5
- 2009年
- 目的探讨抗肿瘤药物羧胺三唑(CAI)是否具有抗炎镇痛作用并初步考察其作用机制。方法采用巴豆油诱导小鼠耳肿胀模型、棉球肉芽肿模型和大鼠佐剂性关节炎模型评价CAI的抗炎作用。检测CAI对血管内皮生长因子(VEGF)或组胺诱导的小鼠背部皮肤局部血管通透性的影响,以及对炎症部位和血清中致炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平的影响。采用醋酸致小鼠扭体模型和福尔马林致痛模型评价CAI的镇痛作用。结果CAI对急慢性炎症均有明显抑制作用,对VEGF或组胺诱导的血管通透性增加有明显缓解作用,对致炎细胞因子TNF-α和IL-1β有明显抑制作用。CAI对外周炎性疼痛也有明显治疗作用。结论CAI是一种极具开发潜力的抗炎镇痛物质。
- 郭磊李娟叶华郑茹郝晓健陈文颖鞠瑞姚伊人杨惠芬于晓丽叶菜英张德昌
- 关键词：羧胺三唑抗炎作用镇痛作用
- 新合成阿片受体配基对δ受体的激动作用
- 2002年
- 研究新合成的阿片受体配基对δ阿片受体的激动作用。采用生物鉴定的方法 ,检测新型阿片受体配基、DP DPE和吗啡对小白鼠输精管 (MVD)收缩的抑制作用和检测所激动的阿片受体亚型 ,以达到最大抑制作用的 5 0 %的药物浓度 (IC50 值 )评价效价强度。结果表明新型阿片受体配基、DPDPE和吗啡 (Mor)都可抑制MVD的电刺激收缩 ,显示纯激动剂作用。认为新型阿片受体配基与阿片受体的结合为可逆性结合。新型阿片受体配基A、C、D、E、F和G以及典型的阿片受体激动剂DPDPE和吗啡的IC50 值分别为 31 73± 3 5 4、15 92± 9 19、88 70± 16 2 6、10 74 0 0± 2 6 3 0 0、74 88± 5 8 6 9和 6 7 16± 8 4 9、3 2 0± 0 0 5、6 9 84± 2 7 5 8nmol L。竞争性拮抗剂纳洛酮 (Nal)可拮抗配基的激动作用 ,使新型阿片受体配基 ,DPDPE和吗啡的量效曲线平行右移。新型阿片受体配基可激动δ阿片受体 。
- 胡萍叶菜英仇缀佰杨惠芬张德昌
- 关键词：Δ阿片受体激动剂生物鉴定
- 强啡肽对培养脊髓神经元高钾刺激性胞内钙增高的双向作用被引量：2
- 1998年
- 为探讨强啡肽（Ｄｙｎ）镇痛与致瘫的细胞机理，采用Ｆｕｒａ－２显微荧光光度技术观测了不同浓度的ＤｙｎＡ（１－１７）对原代培养脊髓神经元单个细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的影响．ＤｙｎＡ０．１－１００μｍｏｌ·Ｌ－１对基础［Ｃａ２＋］ｉ均无影响．ＤｙｎＡ０．１和１μｍｏｌ·Ｌ－１使高钾（５０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）刺激的Ｃａ２＋内流峰值反应分别下降９４％（ｎ＝６）和８３％（ｎ＝４，Ｐ＜０．０５）；ＤｙｎＡ１０和１００μｍｏｌ·Ｌ－１对高钾刺激反应峰值无明显影响，但所有测试细胞均呈现持续性［Ｃａ２＋］ｉ升高；预先给予低浓度的ＤｙｎＡ（０．１和１μｍｏｌ·Ｌ－１），则高浓度ＤｙｎＡ（１０和１００μｍｏｌ·Ｌ－１）的促进作用明显减弱甚至消失．结果表明低浓度和高浓度ＤｙｎＡ（１－１７）对培养脊髓神经元的基础［Ｃａ２＋］ｉ无影响，但可分别抑制和促进去极化性钙离子内流，低浓度ＤｙｎＡ可对抗高浓度ＤｙｎＡ的促进作用．
- 胡文辉张翠华杨惠芬郑永芳郑永芳孙秀君刘娜
- 关键词：强啡肽脊髓神经元
