杜力
- 作品数：10 被引量：7H指数：2
- 供职机构：华北制药集团新药研究开发有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：理学生物学化学工程历史地理更多>>
- 重组蛋白中吐温80含量硫氰酸铵钴显色检测法的改进及验证
- 2021年
- 目的改进重组蛋白中吐温80含量的硫氰酸铵钴显色检测方法,并进行验证。方法将《中国药典》四部(2020版)中收录的吐温80含量检测方法,即硫氰酸钴铵比色法中的二氯甲烷调整为4.00 g,硫氰钴铵溶液浓度提高3倍,并对改进后的方法进行专属性、线性范围、定量限、重复性、日间精密性、准确性验证。采用该方法检测3批重组人源抗hTNF-α单克隆抗体注射液中吐温80的含量。结果改进的方法具有良好的专属性;吐温80标准品浓度在0~400μg/mL范围内与A620呈良好的线性关系,回归方程为y=0.000 6 x-0.003 4,R2=0.999;重复性及日间精密性RSD均<5%;定量限为22.69μg/mL;加入80、180、320μg吐温80标准品的加样回收率分别为100.00%、98.77%、99.31%。3批重组人源抗hTNF-α单克隆抗体注射液中吐温80含量分别为0.95、1.00、1.02 mg/mL。结论改进后的硫氰酸铵钴显色法具有良好的专属性、精密性及准确性,可用于重组人源抗hTNF-α单克隆抗体注射液中吐温80含量的检测。本研究为其他重组蛋白中吐温80含量的检测提供了实验依据。
- 庞丽然贺丞杜力刘国芳
- 关键词：重组蛋白吐温80
- 色谱法分析重组单克隆抗体电荷异质性应用进展
- 2018年
- 无论是电荷,分子量还是其他性质都存在着许多变量,这是单克隆抗体的基本特性。这些电荷变量基本上涉及酸性和碱性。本文概述了能导致一般的酸性和碱性物质及其对抗体结构、稳定性、生物功能等的影响,保证单抗制品生产工艺的稳定性及质量控制。
- 任华景刘晓志杜力高健王志明
- 关键词：色谱法翻译后修饰
- 一种重组蛋白质发酵液的分离方法
- 本发明提供了一种利用陶瓷膜对微生物发酵的重组蛋白质发酵液进行固液分离的方法，包括将发酵液在0～30℃的温度下加压到0.1～0.6MPa后进入陶瓷膜过滤系统，发酵液中的微生物和悬浮固体被截留在膜的进料一侧，流出的透过液即为...
- 贾茜王志明杜力张玉新任振军任力伟何庆生高健郑海洲李梅彦黄顺军王冀民贺建功
- 一种重组人血清白蛋白的纯化方法及其应用
- 本发明涉及一种重组人血清白蛋白(rHSA)的纯化方法，包括将含rHSA的发酵液经过陶瓷膜处理，上清依次经过高盐阳离子交换层析、疏水交换层析和弱阴离子交换层析，得到纯化rHSA，其特征是，所述经高盐阳离子交换层析的溶液在经...
- 贾茜刘文献赵伟王志明魏敬双杜力黄顺军李梅彦高健任乐民贺建功
- 文献传递
- 检测重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体甲氨蝶呤残留量的反相高效液相色谱法的建立及验证被引量：1
- 2018年
- 目的建立重组人源抗人肿瘤坏死因子单克隆抗体中甲氨蝶呤(methotrexate,MTX)残留量检测甲反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)法,并进行验证。方法样品经饱和硫酸铵法沉淀蛋白,取上清液进样检测。色谱柱为Waters/ACQUITY UPLC BEH C18(1. 7μm,2. 1 mm×100 mm),流动相为乙腈-甲醇-0. 054 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(体积比6∶2∶92),pH 6. 5,检测波长302 nm,柱温:30℃,流速:0. 25 mL/min,进样体积:10μL,洗脱时间:15 min。同时验证方法的线性、特异性、准确度、定量限、精密性及耐用性。结果该方法特异性良好;MTX浓度在4~200 ng/mL范围内线性良好,R2> 0. 999;检测限为4 ng/mL;MTX浓度为20. 0、50. 0、100. 0 ng/mL 3个加标样品的回收率分别为102. 83%、100. 33%、99. 23%,3次重复检测结果RSD分别为1. 56%、1. 50%、0. 42%,两位实验员6次检测结果的RSD分别为2. 46%、1. 27%、1. 49%;MTX浓度为50. 0 ng/mL的加标样品在流动相p H 6. 3、6. 5、6. 7条件下测定结果的RSD为2. 02%。结论本实验建立的方法具有良好的特异性、精密性及准确度,且操作简便,可用于重组蛋白药物研发及生产过程中残留MTX的监测。
- 刘素霞杜力任华景
- 关键词：甲氨蝶呤人肿瘤坏死因子单克隆抗体反相高效液相色谱
- 一种重组人血清白蛋白的纯化方法及其应用
- 本发明涉及一种重组人血清白蛋白(rHSA)的纯化方法，包括将含rHSA的发酵液经过陶瓷膜处理，上清依次经过高盐阳离子交换层析、疏水交换层析和弱阴离子交换层析，得到纯化rHSA，其特征是，所述经高盐阳离子交换层析的溶液在经...
- 贾茜刘文献赵伟王志明魏敬双杜力黄顺军李梅彦高健任乐民贺建功
- 蛋白质药物糖基化工程化改造研究进展被引量：2
- 2020年
- 多种哺乳和非哺乳动物的蛋白质表达系统已成功用于重组糖蛋白药物的生产。糖基化对于生物药品的研究开发至关重要,对生物药品的药效、半衰期及抗原性等产生重要影响。糖基化工程的目的是生产组分明晰、结构均一的N-和O-连接的糖基化蛋白药物。N-糖基化改造的相关研究显示,利用哺乳动物和非哺乳动物表达系统可以表达均匀的N-聚糖重组糖蛋白。与N-糖基化改造相比, O-糖基化的改造研究尚处于起步阶段。首个糖基化工程单克隆抗体已在美国和日本获得上市批准。综述了重组蛋白表达系统的糖基化工程化改造的研究进展,包括蛋白质药物的N-糖基化改造和O-糖基化改造的最新进展,以期为蛋白质药物的糖基化工程改造研究提供参考。
- 杜力刘晓志魏敬双高健
- 关键词：生物制药糖基转移酶N-糖基化
- 分光光度法检测重组蛋白药物中PF68残留量
- 2018年
- 目的建立能够定量检测重组蛋白药物中PF68残留量的分光光度法,并进行验证。方法采用TCA沉淀蛋白方法,上清中PF68与硫氰酸钴铵盐反应形成蓝色复合物,于酶标仪波长624 nm处测定吸光度值,通过标准曲线计算样品中PF68的含量。对方法进行线性、准确度、精密度验证,并确定定量限。结果分光光度法检测重组蛋白中PF68含量,PF68浓度在0.1~1.6 mg/mL范围内,标准曲线的线性较好,相关系数R^2>0.99,定量限低至0.1 mg/mL。各浓度水平验证样品的加样回收率在88%~100%之间;浓度为1.2、0.6、0.3 mg/mL样品重复性试验的RSD分别为4.0%、5.2%、3.9%,中间精密度试验的RSD分别为7.0%、5.7%、4.8%。结论分光光度法准确度和精密度良好,可用于重组蛋白药物研发及生产过程中残留PF68的监测。
- 刘素霞杜力王志明
- 关键词：重组蛋白分光光度法
- 一种重组蛋白质发酵液的分离方法
- 本发明提供了一种利用陶瓷膜对微生物发酵的重组蛋白质发酵液进行固液分离的方法，包括将发酵液在0～30℃的温度下加压到0.1～0.6MPa后进入陶瓷膜过滤系统，发酵液中的微生物和悬浮固体被截留在膜的进料一侧，流出的透过液即为...
- 贾茜王志明杜力张玉新任振军任力伟何庆生高健郑海洲李梅彦黄顺军王冀民贺建功
- 文献传递
- 抗体药物免疫原性评估的研究进展被引量：4
- 2018年
- 抗体药物引发机体产生的非必要免疫反应,将影响药物的疗效和安全性。因此,有必要对处于不同研发阶段的抗体药物的免疫原性进行评估,包括上市后的监测。免疫原性评价是所有抗体药物研发过程中的关键环节,监管部门对抗体药物的免疫原性评估有严格要求,但是对于证据类型,数量和质量缺少统一标准,也缺少抗体药物免疫原性测定实验设计的指导文件或免疫原性比较的标准。新技术的出现促进了免疫原性评估的发展,免疫原性检出率也有了相应的提高,因此,只能进行“头对头”临床试验,才能对抗体药物的免疫原性进行评估。因此,研究机构,监管机构和临床医生都需要认识到免疫原性分析方法的变化。在这里,讨论了抗体药物免疫原性的相关因素,潜在的临床后果,评估免疫原性的监管指导变化,非临床和临床研究的免疫原性评估方法的发展,以及生物仿制药免疫原性评估需要特别注意的事项。
- 杜力刘晓志高健王志明
- 关键词：免疫原性抗体药物
