李长征
- 作品数：32 被引量：163H指数：9
- 供职机构：南方医科大学中医药学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 采用哺乳动物细胞表面展示技术构建全长人源抗肾癌抗体基因库被引量：8
- 2010年
- 目的采用哺乳动物细胞表面展示技术构建全长人源抗肾癌抗体基因库。方法分离肾癌患者的外周血淋巴细胞(PBMC),提取PBMC的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体全长Kappa型轻链(LCκ)和重链可变区(VH)基因,分别插入载体pDGB-HC-TM,电击转化感受态大肠杆菌TOPO10,构建轻、重链抗体基因库,然后将轻、重链抗体基因库联合转染293T细胞,流式细胞仪分析全长人源抗体在293T细胞表面的表达。结果成功构建IgG1-Kappa型抗肾癌抗体基因库,随机挑选的克隆经DNA序列分析显示轻、重链库的序列正确性达90%(9/10)和80%(8/10),流式细胞仪分析显示来自轻、重链库的上述克隆各有7个可检测到相应基因在293T细胞表面的表达,可表达抗体库库容量高达7.5×1010。结论 IgG1-Kappa型抗肾癌抗体基因库转染293T细胞后能够在细胞表面表达全长人源抗体,抗体的多样性为下一步筛选特异性抗体奠定良好的基础。
- 陈振瑞李长征贺微周烨张哲欢刘叔文谭万龙周辰
- 关键词：肾癌流式细胞仪
- 阿尔茨海默病相关基因的生物信息学分析被引量：3
- 2012年
- 目的通过生物信息学方法探讨阿尔茨海默病的发病相关基因，为阿尔茨海默病的基础研究和临床治疗提供新思路。方法从基因芯片公共数据库GEO中下载阿尔茨海默病相关基因芯片数据，利用String、KEGG、Panther等在线分析软件对差异表达基因进行生物信息学分析。结果在34个差异表达基因所编码的蛋白中，有25个蛋白与其他蛋白存在相互作用关系；相互作用过程中涉及多种生物学通路，与多个生物学过程和分子功能相关。结论阿尔茨海默病是多种基因相互作用的结果，其中与钙离子信号相关基因关系较为密切。
- 李长征王慧吕蔚然周烨
- 关键词：阿尔茨海默病基因芯片生物信息学
- 柴胡皂苷α对实验性癫痫大鼠模型的干预作用被引量：21
- 2007年
- 目的研究柴胡皂苷α对实验性癫痫大鼠痫性发作的影响。方法采用戊四氮诱导大鼠急性痫性发作来制作癫痫模型,通过记录大鼠痫性发作的潜伏期和强直性惊厥发生率的变化,研究柴胡皂苷a对戊四氮致痫大鼠的抗癫痫作用。结果柴胡皂苷α可显著性延长戊四氮诱发的大鼠痫性发作的潜伏期(P<0.01),降低大鼠强直性惊厥发生率(P<0.05)。结论柴胡皂苷α具有抑制戊四氮致痫大鼠痫性发作的作用。
- 李长征谢炜鲍勇周烨
- 关键词：癫痫戊四氮
- PTZ致痫大鼠海马TNFR1动态表达变化及柴胡皂苷a的干预作用被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)急性致痫模型大鼠海马区肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)的动态变化及柴胡皂苷a(saikosaponin a,SSa)的干预作用。方法:将96只健康SD大鼠随机分为4组:A组为对照组,B组为模型组,C组为SSa组,D组为丙戊酸钠(Sodium Valproate,VPA)组;其中A组6只,B组、C组与D组各30只(时间点0.5 h、2 h、4 h8、h、12 h各6只)。采用腹腔注射PTZ急性致痫,用免疫组织化学方法观察各时间点海马区TNFR1的表达水平。结果:PTZ致痫大鼠海马区TNFR1的表达显著升高(P<0.05),但在12 h时其水平有所下降并逐渐接近对照组(P>0.05),而SSa和VPA能明显抑制PTZ致痫大鼠海马区TNFR1的表达升高(P<0.05)。结论:PTZ致痫大鼠海马区TNFR1表达显著升高,而SSa可以抑制其表达的升高,这可能为SSa抗癫痫机制之一。
- 谢炜康萍鲍勇周烨李长征
- 关键词：戊四氮柴胡皂苷A肿瘤坏死因子受体1
- 小乌桂汤对胶原诱导性关节炎模型小鼠脾脏Th17/Treg平衡及血浆炎症因子的影响被引量：2
- 2021年
- 目的探讨小乌桂汤治疗类风湿关节炎(RA)的作用机制。方法60只雄性DBA/1小鼠随机分为正常组8只及造模组52只。造模组采用尾根部及背部分3点皮内注射鸡Ⅱ型胶原蛋白乳化液建立胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠模型。造模成功的40只小鼠随机分成模型组、甲氨蝶呤组、小乌桂汤低剂量组、小乌桂汤中剂量组、小乌桂汤高剂量组,每组8只。甲氨蝶呤组予0.1mg/ml甲氨蝶呤药液2mg/kg灌胃,每周1次;小乌桂汤低、中、高剂量组分别予含生药19.5、39、75g/(kg·d)小乌桂汤灌胃,每日1次;正常组与模型组给予生理盐水0.2ml/10g灌胃,每日1次。4周后评定关节炎指数评分,测量发病足厚度,观察踝关节组织病理并进行组织病理学评分;检测脾脏辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)及血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)的水平。结果与模型组比较,甲氨蝶呤组及小乌桂汤中、高剂量组关节炎指数评分,发病足厚度,脾脏Th17细胞水平,血浆TNF-α、IL-6、IL-17、IL-1β水平,关节病理总评分,血管翳及骨破坏评分均显著降低,Treg细胞水平均显著升高,甲氨蝶呤组及小乌桂汤高剂量组Th17/Treg值、滑膜炎评分显著降低(P<0.05或P<0.01)。与甲氨蝶呤组比较,小乌桂汤低剂量组脾脏Th17细胞水平、Th17/Treg值、关节病理总评分、血管翳及骨破坏评分显著升高,小乌桂汤低、中剂量组Treg细胞水平显著降低(P<0.01)。与小乌桂汤低剂量组比较,小乌桂汤中、高剂量组Th17细胞水平,Th17/Treg值显著降低,Treg细胞水平显著升高,小乌桂汤高剂量组病理总评分、血管翳评分显著降低(P<0.05或P<0.01)。与小乌桂汤中剂量组比较,小乌桂汤高剂量组Treg细胞水平显著升高(P<0.01)。结论小乌桂汤对CIA小鼠具有抗炎及免疫调节作用,以高剂量效果最佳,其作用机制与调节Th1
- 单文君李长征齐杰莹谢丽芬张巧莹聂晓莉
- 关键词：胶原诱导性关节炎辅助性T细胞17调节性T细胞炎症因子
- 白芍总苷抑制小鼠T淋巴细胞体外增殖促进活化诱导细胞死亡被引量：9
- 2020年
- 目的研究白芍总苷(TGP)对小鼠T淋巴细胞体外增殖及活化诱导细胞死亡(AICD)的影响,并初探其免疫抑制机制。方法利用免疫磁珠分选技术,无菌分离小鼠脾脏T淋巴细胞,按照TGP溶液浓度(0、50、100、200μg/mL)设为空白组、TGP低中高剂量组,anti-CD3/CD28刺激T淋巴细胞活化及增殖。流式细胞仪检测细胞早期活化标志、细胞活力及CFSE标记的T淋巴细胞增殖;RT-PCR检测Fas/FasL m RNA水平;流式细胞仪检测活化T淋巴细胞表面Fas/FasL蛋白表达量;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。结果 (1)与空白组相比,TGP中高剂量组在用药48 h后活细胞数目显著减少,活细胞比例明显下降(P<0.001);(2)TGP组给药处理48 h后,T淋巴细胞分裂代数及已分裂比例显著降低,且抑制作用具有药物浓度依赖性(P<0.001);(3)TGP处理组T淋巴细胞24 h后Fas mRNA表达量显著上调,并伴随着T淋巴细胞表面Fas蛋白的表达上调及胞内Bcl-2表达下调(P<0.01)。结论 TGP显著抑制T淋巴细胞增殖,并可通过上调Fas、下调Bcl-2的表达促进活化诱导的T淋巴细胞死亡(AICD)。
- 熊传锋齐杰莹邓蓉谢丽芬李长征聂晓莉
- 关键词：白芍总苷细胞增殖FAS/FASLBCL-2
- 柴胡疏肝汤对难治性癫痫大鼠脑电图及多药耐药蛋白P-糖蛋白表达的影响被引量：13
- 2011年
- 目的:探讨柴胡疏肝汤对锂-匹罗卡品致难治性癫痫模型大鼠脑电图变化以及多药耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法:将制备成功的50只SD难治性癫痫大鼠模型随机分为5组,模型组(B)、丙戊酸钠(VPA)组(C)、柴胡疏肝汤低(D)、中(E)、高(F)剂量组,每组各10只,另有空白对照组(A)10只。柴胡疏肝汤是以柴胡桂枝汤和四物汤为基础方加味煎煮浓缩而成,含生药1 g.mL-1。VPA组用量为0.2 g.kg-1,柴胡疏肝汤低、中、高浓度依次为4.5,9,18 g.kg-1,空白组和模型组给予等量生理盐水。各组均ig给药8周,给药结束后检测各组大鼠脑电图以及海马、颞叶皮层P-gp蛋白的表达。结果:脑电图:A组无痫性波出现,B组出现大量的痫性波,C,D,E,F组能不同程度的减少脑电图的痫性波,以F组最明显。在大鼠海马区、颞叶皮层,Western blotting检测各组P-gp表达,差异有统计学意义(P﹤0.01)。与A组相比,其余各组P-gp表达水平明显增强(P﹤0.01);与B组相比,C组表达水平增加(P﹤0.01),D,E,F组表达水平降低,以F组最明显(P﹤0.01)。结论:VPA明显增强难治性癫痫模型大鼠脑内海马、颞叶皮质P-gp蛋白的表达,柴胡疏肝汤低、中、高剂量均可以降低海马、颞叶皮层P-gp蛋白的表达以及脑电图的痫性放电,以高剂量组明显。
- 谢炜史国军李长征鲍勇于林于云红杜念念
- 关键词：难治性癫痫脑电图多药耐药P-糖蛋白柴胡疏肝汤
- 紫外线照射所致的DNA损伤对连接转化的影响被引量：11
- 2010年
- 目的探讨DNA经不同波长紫外线照射与经紫外线照射不同时间所致损伤对基因库构建中DNA连接转化效率的影响。方法经改造的质粒DNA使用SfiI酶切过夜,1%琼脂糖凝胶电泳分离,在不同波长不同时间紫外线照射的条件下回收目的片断,并进行目的片断的连接转化,计数菌落数,计算转化效率。结果经302nm波长紫外线照射后,其连接转化的菌落数极少(60个/ngDNA),365nm波长紫外线照射条件下回收的DNA仍可被有效连接转化。在365nm波长紫外线照射下,与未经照射进行比较,当照射时间在30min,其连接转化成功率低于50%,而照射5min、15min的连接转化成功率仍高于70%,可满足大部分分子生物学实验的需要。回收的DNA连接转化的最大效率可超过20000个菌落/1ngDNA。结论在构建大容量基因库回收目的片断时,应避免紫外线的照射;在需要时,应选择在365nm波长紫外线照射条件下进行,且照射时间应尽量缩短,以不超过15min为宜。
- 黄婉玲李长征陈振瑞贺微周烨周志刚刘叔文周辰
- 关键词：紫外线基因库
- 应用腰痛方治疗腰椎间盘突出症的临床研究被引量：3
- 2016年
- 目的观察陈宝田教授经验方腰痛方治疗腰椎间盘突出症(LDH)的临床疗效,初步分析中药治疗LDH的优势。方法将60例符合纳入标准的患者随机分为两组,治疗组30例采用陈宝田教授腰痛方治疗,对照组30例采用西乐葆治疗,疗程28 d,比较两组总体疗效及症候积分。结果两组之间的总体有效率相比较,差异具有统计学意义(P<0.05),其中,治疗组的总体疗效优于对照组;治疗组在治疗14 d,整体疗效优于西乐葆组,在治疗28 d后,在升高症候总积分及改善腰痛、腿痛及感觉障碍等主要临床症状和体征方面的疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论陈宝田教授腰痛方治疗LDH的疗效优于西乐葆,值得推广应用。
- 莫孙炼李长征雷秀珍吕蔚然陈宝田
- 关键词：腰椎间盘突出症经验方腰痛方
- 颞叶癫痫相关基因的生物信息学分析被引量：4
- 2011年
- 目的从分子水平揭示癫痫的发病机制,为癫痫的基础研究和临床治疗提供新思路。方法从基因芯片公共数据库GEO中下载癫痫相关基因芯片数据,利用String、KEGG、Panther等在线分析软件对差异表达基因进行生物信息学分析。结果在71个差异表达基因所编码的蛋白中,有51个存在蛋白与蛋白的相互作用关系;其涉及的主要生物学通路包括刺激神经的配体-受体相互作用通路、促分裂原活化蛋白激酶信号通路、钙信号通路等。结论通过生物信息学分析癫痫相关基因芯片数据,提示癫痫发病是多种基因作用的结果,对相关基因的进一步分析有利于揭示癫痫的发病机制。
- 周烨石嵘鲍勇李长征谢炜郑文岭马文丽
- 关键词：颞叶癫痫基因芯片生物信息学
