李艳菊
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 供职机构：福建医科大学基础医学院病理学系更多>>
- 发文基金：福建省教育厅科技项目福建省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- APE1基因沉默对人肝癌MHCC97-H生物学行为的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察脱嘌吟／脱嘧啶核酸内切酶（APEl）基因表达沉默后对人高侵袭肝癌细胞株MHCC97-H在体内外生物学行为的影响。方法用LV-APEl-shRNA载体感染MHCC97-H，设空载体（LV—APEI—NC）组和空白对照（Contr01）组。通过噻唑蓝（MTT）比色法和Transwell小室法检测细胞的增殖、黏附、运动及侵袭能力的变化。建立裸鼠移植瘤动物模型，第21天剥瘤称重，计算抑瘤率，绘制肿瘤生长曲线。逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）及Westernblot法检测移植瘤中APElmRNA及蛋白表达水平。结果LV．APEl-shRNA组细胞的增殖、黏附、运动及侵袭能力均低于其他两组，差异有统计学意义（P〈0．01）。LV-APEl-shRNA组肿瘤体积（0．467±O．052）cm3及重量（0．267±0．082）g均小于LV—APEl-NC组（1．700±0．063）cm3（1．018±0．160）g和对照组（1．780±0．095）cm3、（1．107±0．178）g，差异有统计学意义（P〈0．01）；抑瘤率为75．881％。APEl基因沉默后可下调90．622％APElmRNA的表达，下调72．439％APEl蛋白的表达。结论APEl基因沉默可降低MHCC97-H细胞在体内外的增殖和侵袭能力。APEl对肝癌细胞的生物学行为具有调控作用。
- 杜薇李艳菊刘景丰郑智华高美钦黄爱民
- 关键词：肝细胞APE1裸鼠
- APE1基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的构建APE1基因慢病毒载体,为其后续的体内外实验研究提供基础。方法应用基因工程技术,筛选出两条针对APE1基因的RNAi靶序列KD1、KD2,分别与pGCIL-GFP载体连接,经转化筛选鉴定后,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,分别命名为LV-APE1-shRNA1、LV-APE1-shRNA2,两种病毒颗粒分别感染MHCC97-H细胞,设为感染LV-APE1-shRNA1、LV-APE1-shRNA2细胞组,同时设未感染病毒组和感染空载体细胞组。Real-time PCR和Western blot检测MHCC97-H细胞中APE1基因的mRNA和蛋白的表达。结果 PCR及测序结果与预期结果一致,LV-APE1-shRNA1、LV-APE1-shRNA2的病毒滴度为4×108TU/mL和7×108TU/mL。与未感染病毒组和感染空载体细胞组相比,2组慢病毒组APE1基因mRNA和蛋白的表达均明显下降,LV-APE1-shRNA1、LV-APE1-shRNA2对APE1基因的mRNA表达的抑制率分别为75%,90%,对APE1蛋白表达的抑制率达90%,95%。结论成功构建高效阻断APE1基因表达的RNAi慢病毒表达载体,为应用RNAi进一步研究APE1基因在肝癌中的作用机制和基因治疗奠定基础。
- 李艳菊郑智华刘景丰高美钦黄爱民
- 关键词：嘌呤类肝肿瘤
- APE1特异性siRNA慢病毒表达载体的构建及其在人肝癌MHCC97-H细胞中APE1基因沉默效应的观察
- 目的：
构建慢病毒表达载体LV-APE1-shRNA，观察其介导的RNA干扰对人高侵袭肝癌细胞株MHCC97-H中APE1基因mRNA和蛋白的表达的影响，并进行功能学检测分析，为进一步探讨APE1在肝癌侵袭和转移中...
- 李艳菊
- 关键词：慢病毒载体侵袭转移机制
- 文献传递
