李胜华
- 作品数：9 被引量：14H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一个高效表达且纯化简单的重组蛋白载体系统被引量：2
- 1996年
- 目前已发展了几种快速、有效地纯化细菌表达重组蛋白的方法。谷胱甘肽转硫酶（ＧＳＴ）融合表达系统是通过非变性条件下亲和吸附到谷胱甘肽－琼脂糖上，从细菌粗提物中纯化融合蛋白的。为便于从融合蛋白中解离出目的多肽，这个载体中含有特异的蛋白酶裂解位点。本研究比较了这个系统中的两个不同的载体。结果表明，它们都能高效表达谷胱甘肽转硫酶－白介素１受体拮抗剂（ＧＳＴ－ＩＬ－１ｒａ）融合蛋白，但凝血酶对融合蛋白的裂解效率有很大区别，ｐＧＥＸ－ＫＧ载体不仅大大提高了凝血酶的裂解效率，而且简化了纯化过程。因此，它为大批量用细菌表达真核蛋白的制备纯化提供了一种简便、廉价而有效。
- 刘学博李胜华梁小兵孔祥英
- 关键词：重组蛋白基因表达基因载体
- 登革病毒E蛋白区段基因克隆及高效表达被引量：2
- 1999年
- 目的进行登革病毒Ｅ蛋白区段的高效表达，制备抗原，为分析Ｔ、Ｂ细胞表位及免疫功能的研究奠定基础。方法以含有Ｄ２ＶＥ区的质粒ｐ３０．ＶＤ２为模板，ＰＣＲ扩增了编码Ｄ２ＶＥ蛋白３０８～４６８ａａ区段的基因片段，以ｐＭＹ为表达载体，构建了表达质粒ｐＤＥ１，并用酶切法使之缺失跨膜区疏水ａａ较多的编码序列，又构建了表达质粒ｐＤＥ２，分别转化大肠杆菌，获得了不同的工程菌株。经诱导培养，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，免疫印迹及酶联检测分析表达产物。结果含ｐＤＥ１质粒工程株只能表达微量的特异性蛋白；而含ｐＤＥ２质粒的工程菌株则能高效表达Ｄ２Ｖ特异性Ｅ蛋白，重组表达产物占菌体蛋白的２５．３１％。用４ｍｏｌ／Ｌ尿素溶解包涵体，上清中Ｅ蛋白纯度可达８０％。以粗提物包板进行酶联检测，结果表明，该重组Ｅ蛋白具有ＤＶ４个型交叉抗原的特性。结论缺失Ｃ末端疏水区编码序列的Ｄ２ＶＥ基因片段，可在Ｅ．ｃｏｌｉ中获得高效表达，其表达产物具有ＤＶ属特异性。
- 郭庆福詹轶群逯好英周洁李胜华梁小兵
- 关键词：登革病毒基因克隆病毒抗原
- 卵泡刺激素受体主动免疫对雄性小鼠生育力影响的初步研究被引量：5
- 2000年
- 探索卵泡刺激素受体 (FSHR)作为男性免疫避孕疫苗的可能性。利用分子生物学方法克隆表达卵泡刺激素受体 -谷胱甘肽转硫酶 (FSHR- GST)融合蛋白 ,以此作为免疫原免疫雄性小鼠 ,观察免疫应答反应及其对生育力的影响。结果表明 ,在大肠杆菌中表达出 FSHR- GST融合蛋白 ,免疫家兔及小鼠后均产生免疫应答 ,免疫后的雄性小鼠仍具生育能力 ,免疫小鼠睾丸精曲小管出现生精细胞减少现象。提示
- 梁小兵周洁刘学博詹轶群彭虹李胜华郭庆福高杰英
- 关键词：卵泡刺激素受体主动免疫生育力睾丸小鼠
- 登革病毒感染动物模型的研究被引量：3
- 1998年
- 登革病毒（ｄｅｎｇｕｅｖｉｒｕｓ，ＤＶ）感染引起机体免疫应答是发生登革出血热或登革休克综合征（ＤＨＦ／ＤＳＳ）的主要原因，现已被公认，但机理仍不清楚。为探讨免疫反应在ＤＶ感染中的保护和致病作用，首先应有合适的感染动物模型。以往的报道只能感染灵长类的黑...
- 郭庆福詹轶群李胜华周洁梁小兵代庆华
- 关键词：登革病毒动物模型
- 登革病毒的免疫学方面研究进展
- 1995年
- 本文综述了登革病毒有关免疫学方面研究的新进展，讨论了登革病毒的抗原、抗体、免疫细胞以及细胞因子在登革病毒的免疫防御和致病两方面的作用，有关登革病毒抗原表位的分析，特别是Ｔ细胞表位的分析，对于研究登革病毒基因工程疫苗具有重要的指导意义。
- 李胜华
- 关键词：登革病毒免疫学
- 几种细胞因子对登革病毒感染U937细胞的影响研究
- 1997年
- 本文作者研究了几种细胞因子（ｒＩＬ－１，ｒＩＬ－２，ｒＩＬ－６，ｒＴＮＦ－α，ｎＩＦＮ－α和ｎＩＦＮ－γ）对Ｄ２Ｖ感染Ｕ９３７细胞的影响，结果显示：除ｎＩＦＮ－γ对ＤＶ感染Ｕ９３７细胞的感染无影响外，其余几种细胞因子都可使Ｄ２Ｖ感染Ｕ９３７细胞的感染率明显降低，为研究细胞因子在ＤＶ感染中的作用作了初步探索。
- 李胜华詹轶群郭庆福扬理邦高杰英周洁戴庆华
- 关键词：U937细胞细胞因子
- 介素6-核因子的结构、功能和基因调控
- 1996年
- 基因调控是分子生物学中的核心问题,它涉及到细胞生长、分化、衰老及个体的发育,肿瘤、心血管、代谢等方面疾病发生的分子基础。转录水平上的调控是基因调控的关键,它主要包括两个内容,即顺式调控元件和反式作用因子。基因表达的严格组织和细胞特异性与反式作用因子密切相关,因此这是当前研究的热点之一。介素6-核因子(NF-IL6)作为反式作用因子是在90年代初克隆成功的,它不仅能与各种急期蛋白以及与炎症有关的细胞因子的基因调控区结合,在转录水平上对这些基因的表达起正调控作用,而且还能与某些病毒基因的增强子结合,表现出负调控作用。本文综述了NF-IL6的结构、功能及其在基因调节中可能发挥的作用。
- 李胜华刘学博
- 关键词：核因子基因调控白细胞介素6
- 登革病毒感染后小鼠细胞免疫功能的动态变化被引量：2
- 1997年
- 以登革Ｉ型病毒感染成年ＢＡＬＢ／ｃ小鼠为模型，观察感染后不同时间机体细胞免疫反应的变化。结果表明：感染后７～１４ｄ免疫功能处于激活状态，表现为腹腔巨噬细胞的吞噬功能和脾淋巴细胞对ＣｏｎＡ的反应及ＩＬ－２产生水平都明显高于对照组，感染２１ｄ后免疫功能则转为抑制状态，上述免疫反应明显低于对照组，脾中的Ｌ３Ｔ４＋细胞亚群的百分比逐渐下降；相反，ＬＹＴ２＋细胞亚群的百分比逐渐升高，这种抑制现象可维持到２８ｄ以上。
- 郭庆福詹轶群周洁李胜华代庆华梁小兵
- 关键词：登革热病毒IL-2细胞免疫功能
- U937和K562细胞株对登革病毒2型感染性的研究被引量：1
- 1996年
- 运用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、酶抗体染色法结合电镜观察和病毒滴定。初步研究了Ｕ９３７和Ｋ５６２细胞株对登革病毒２型感染性。结果显示两株细胞均可被感染，Ｕ９３７和Ｋ５６２细胞的感染率分别为１２％和３３．３％。
- 李胜华詹轶群郭庆福周洁周洁高杰英周洁周洁戴庆华
- 关键词：登革病毒2型聚合酶链反应细胞株
