李正
- 作品数：13 被引量：12H指数：2
- 供职机构：江汉大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金武汉市市属高等学校科学研究重点项目武汉市青年科技晨光计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学理学更多>>
- 串联表达载体中短重复序列(BmKb1)_n模板的PCR效率及其优化条件研究
- 2012年
- 采用Overlap PCR法获取BmKb1基因,构建载体pGEX-6p-1/BmKb1,同尾酶技术用于构建串联表达载体pGEX-6p-1/(BmKb1)n(n=2,4,6,8,10)。以pGEX-6p-1/(BmKb1)n为模板,使用标准PCR程序研究短重复序列PCR效率;以BmKb1八倍体为模板,分别研究PCR循环数、引物终浓度及退火温度对短重复序列PCR效率及特异性的影响。结果表明:串联重复序列数目增加,则非特异性条带增加,特异性条带含量减少;BmKb1基因串联体PCR扩增在18～20循环数、引物终浓度为0.05～0.1μM、60～62℃较高退火温度时,可获得相对高产量高特异性BmKb1基因串联体PCR片段。本研究将为串联表达载体克隆、筛选、测序及基因组STRs序列克隆测序提供技术参考。
- 范丽梅李正余腾刘燕群罗锋
- 关键词：PCR
- C_(60)/Cu^(2+)影响质粒DNA构象的复合效应研究
- 2012年
- 碳纳米材料的毒性效应日益受到广泛关注,通过比较研究多种非光催化条件下,富勒烯(C60)/Cu2+共存时对质粒DNA构象影响的复合作用,借以评估碳纳米材料的毒性效应。实验结果显示在非光催化条件下,C60/Cu2+可显著诱导DNA构象从超螺旋DNA转变成开环DNA,并且这种剪切效应随C60和Cu2+浓度的升高而增强;断裂后的DNA片段可重新被T4DNA连接酶连接成环状DNA,这说明C60/Cu2+的剪切位点为磷酸二酯键。另外,多种活性氧捕获剂均不能有效消除C60/Cu2+对DNA的剪切作用,这与Cu2+在DNA裂解中起主要作用相关。上述研究结果表明在非光催化条件下,C60/Cu2+可有效诱导DNA断裂,具有明显的复合效应,其潜在的基因毒性值得关注。
- 李佳林燕李准洁李正梁勇
- 关键词：CU2+C60ROS
- 吸烟对大鼠心脏组织中PKC-α和NF-κB表达的影响
- 2007年
- 目的:研究吸烟对大鼠心脏组织中PKC-α和NF-κB表达的影响.方法:用Western blot检测对照组和吸烟大鼠心脏组织中PKC-α和NF-κB表达水平.结果:吸烟1、2、3个月后大鼠心脏组织中PKC-α和NF-κB的表达与对照组比较差异有统计学意义,而且表达水平逐渐增高(P<0.05).结论:吸烟可能通过增加PKC-α和NF-κB的表达参与对心脏的损害.
- 王国梁李正
- 关键词：吸烟心脏组织PKC-ΑNF-ΚB
- 不同分子量PVP对PCR扩增反应效率的影响被引量：2
- 2012年
- 以人为设计的110bp单链DNA为模板,研究不同分子量聚乙烯基吡咯烷酮(Polyvinyl-pyrrolidone,PVP)对聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的影响。实验结果表明:0.5%的PVP K-30、PVP 8000、PVP 58000和PVP 630000均可显著提高PCR效率,并且这4种化合物提高PCR效率的能力,依次为PVP 630000>PVP 58000>PVP K-30和PVP 8000;然而,在相同浓度时,PVP K-40却显著抑制PCR扩增反应;另外,溶解曲线的实验结果显示,0.5%PVP 630000可显著降低PCR产物的Tm值,表明PVP 630000可通过与DNA相互作用,降低DNA结构稳定性,使得模板更易在PCR的变性阶段解链,最终提高PCR效率。上述研究结果表明,不同分子量的PVP对PCR扩增效率的影响不同,与其分子量大小密切相关。
- 李佳林燕姚晶蒋琳李正梁勇
- 关键词：荧光定量PCRDNA构象
- 2008年武汉市6所幼儿园幼儿口腔卫生调查被引量：5
- 2010年
- 目的:了解武汉市幼儿园3～6岁幼儿口腔卫生状况,提出改善建议.方法通过整群抽样法从武汉市市直机关幼儿园、示范园共15所幼儿园中选取6所幼儿园,并对其3～6岁的1296名幼儿进行口腔卫生调查,由专业口腔医师检查并记录.对于幼儿家长进行自填式问卷调查,问卷内容包括饮食习惯、口腔卫生习惯等.结果:3～6岁幼儿患龋率为35.65%,6岁年龄段幼儿患龋率最高,为42.86%,前牙患龋率高于后牙患龋率;不良饮食习惯和口腔卫生习惯对龋病的发生发展有一定影响.结论:幼儿口腔卫生状况的改善有待家长及幼师的配合和努力.
- 樊琳李正
- 关键词：幼儿龋齿患病率饮食习惯口腔保健
- 一种新型二噁英类化合物离体生物筛选模型的建立
- 梁勇汪畅纪芳艾永循钟德桥管斌罗锋蒋琳李正李佳卢敬怡
- 该研究围绕二噁英类化合物离体生物筛选模型的建立展开相关研究工作，并针对二噁英类化合物的污染来源和环境污染现状，初步研究了二噁英化合物对鱼类胚胎发育的毒性效应，主要研究成果有：1)将人工合成的5个相连的XRE(Xeobio...
- 关键词：
- 关键词：二噁英类化合物斑马鱼胚胎发育
- 聚乙烯基吡咯烷酮对质粒DNA降解效应的研究
- 2011年
- 为评估聚乙烯基吡咯烷酮(Polyvinylpyrrolidone,PVP)的生物可利用性,研究了不同相对分子质量PVP对闭合环状双链质粒DNA pBR322的降解效应.实验结果表明:在常温、非光催化条件下,相对分子质量小的PVP(PVP8000)可引起质粒DNA构象的改变,并且这种效应与反应温度、反应时间及PVP的相对分子质量和浓度相关;另外,在反应体系中加入不同浓度的甲酰胺,PVP 8 000的DNA剪切效应可被显著抑制,结果表明在一定程度上,PVP的表面性质以及DNA构象的稳定性是影响DNA降解的主要因素.
- 林燕姚晶李佳蒋琳李正梁勇
- 关键词：PVPDNA构象质粒DNA
- 腹外斜肌变异1例报告
- 2002年
- 李正张一桥叶章讯李少华
- 关键词：腹外斜肌
- 葛根素对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠血管平滑肌细胞的增殖及蛋白激酶-α和核转录因子-κB表达的影响被引量：3
- 2008年
- 目的:观察葛根素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及对蛋白激酶-α(PKC-α)和核转录因子(NF)-κB表达的影响,探讨其可能存在的抑制VSMC增殖的分子机制。方法:体外培养Wistar大鼠的VSMC,给予单纯1.5×10-3mol/L葛根素处理2 h(P组)、单纯10-8mol/L AngⅡ处理24 h(A组)和1.5×10-3mol/L葛根素预处理2 h后再加10-8mol/L AngⅡ处理24 h(P+A组)刺激后,四氮唑盐法检测增殖情况,采用Western blot的方法检测PKC-α和NF-κB的表达。结果:对照组、P组、A组、P+A组VSMC增殖的A值分别为0.178±0.017、0.198±0.028、0.373±0.017和0.286±0.024。与对照组比较,A组和P+A组差异有统计学意义(均P<0.05);A组和P+A组VSMC中PKCα-、NFκ-B的表达与对照组比较,均显著增高(均P<0.05);P+A组较A组均有明显下降(均P<0.05)。结论:一定浓度的葛根素可通过下调PKCα-和NF-κB的表达来抑制AngⅡ引起的VSMC的增殖。
- 王国梁李正
- 关键词：葛根素血管平滑肌细胞核转录因子-ΚB
- 东亚正钳蝎毒素基因BmKbpp的原核表达及其抗菌功能初步鉴定被引量：2
- 2012年
- 一级结构分析和二级结构预测表明无二硫键蝎毒液多肽(NDBPs)BmKBPP具两亲性α-Helix结构,含有大量带净正电荷的碱性残基(Arg和Lys),符合多价阳离子抗菌肽的典型特征。采用PCR法和质粒载体pGEX-5X-1构建BmKbpp、EGFP及BmKbpp/EGFP与GST的原核融合表达载体,3个表达载体与pGEX-5X-1分别在Rossetta(DE3)菌中进行表达,并测定4个Rossetta(DE3)表达工程菌诱导表达的生长曲线。结果表明,BmKBPP是一个具有很强抑菌功能的抗菌肽,GST、BmKBPP及EGFP3个蛋白一起融合表达可获得少量蛋白的表达,这将为后续的功能研究和应用研究奠定基础。
- 罗锋李正范丽梅梁勇林燕蒋琳
- 关键词：蝎毒素抗菌肽原核表达
