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生姜中二苯庚烷类化合物的抗氧化和细胞毒活性研究被引量：9: 2009年; 目的:研究生姜中二苯庚烷类化合物(1~5)的抗氧化和细胞毒活性。方法:采用吸光度测试法检测化合物于50 mg.L–1清除超氧阴离子的效果,同法检测化合物(1~5)清除1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基之半数清除浓度(IC50),用MDA检测法检查化合物于100 mg.L–1浓度下抑制大鼠脑匀浆脂质过氧化的能力,以及用MTT法研究化合物抑制过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12)损伤的活性,并采用MTT法检测化合物对人慢性髓源性白血病细胞株(K562)及其阿霉素耐药株(K562/ADR)的细胞毒活性(IC50)。结果:化合物1~5对DPPH自由基有较好的清除作用,化合物5的清除作用最强,IC50(22.6±2.4)μmol.L-1;化合物1,3和4有抑制大鼠脑匀浆脂质过氧化作用,100 mg.L–1其抑制率分别为(66.3±15.4)%,(68.7±15.8)%,(72.2±10.6)%;化合物1,3和4对H2O2诱导的PC12细胞损伤有明显的保护作用,且呈量效关系;化合物3对K562及其阿霉素耐药株(K562/ADR)体外增殖有抑制作用,其IC50分别为(34.9±0.6),(50.6...; 杨雷香周长新黄可新宋丽艳郑群雄于荣敏张荣平伍义行曾苏郑汉其赵昱李校瞿佳; 关键词：生姜超氧阴离子抗脂质过氧化细胞毒

bFGF对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响被引量：3: 2008年; 目的:观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的影响。方法:48只大鼠分为正常I/R+生理盐水组(CN)、正常I/R+bFGF组(Cb)、糖尿病I/R+生理盐水组(DN)、糖尿病I/R+bFGF组(Db)。以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法建立糖尿病模型,以结扎冠状动脉左前降支法建立I/R模型。每组6只颈动脉取血,离心得血清,以丙酮酸二硝基苯腙显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,硫代巴比妥酸(TBA)法检测丙二醛(MDA)含量。颈动脉取血后取心脏做心肌组织石蜡包埋,免疫组化染色检测第Ⅷ因子的表达,计算心肌血管数量。每组剩余6只取心脏做TTC染色,计算心肌梗死面积。结果:I/R后,Cb组和Db组心肌血管数高于对应的CN组和DN组,LDH活性和MDA含量低于CN组和DN组;DN组心肌血管数低于CN组,DN组LDH活性和MDA含量高于CN组;Db组心肌血管数低于Cb组,而LDH活性和MDA含量高于Cb组。结论:糖尿病大鼠I/R后心功能受损和梗死程度比正常大鼠严重,补充bFGF可以改善心功能和减少心肌梗死面积,但疗效不如非糖尿病组。; 吕艳霞邵丽丽林绍强蔡露肖健李校; 关键词：成纤维细胞生长因子2 糖尿病心肌再灌注损伤

N-乙酰-D-葡萄糖胺-2-差向异构酶基因的克隆、表达及产物纯化: 2010年; 目的:从猪肾中提取RNA,从中克隆出N-乙酰-D-葡萄糖胺-2-差向异构酶(GNE)基因,并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达。方法:从猪肾中提取总RNA,通过RT-PCR克隆出GNE基因,经测序,感受态大肠杆菌E.coli DH5a转化,质粒抽提,鉴定以及大肠杆菌BL21(DE3)转化表达,通过His-tag亲和纯化(Ni Sepharose 6 Fast Flow),G-25柱脱盐,SDS-PAGE电泳检测。结果:RNA提取物经紫外分光光度计检测OD260/OD280=1.77,说明无明显的蛋白质和酚污染。RT-PCR扩增目的片段,测序证明该基因的ORF为1 206 bp,编码402个氨基酸组成的酶蛋白(GNE)。SDS-PAGE显示,纯化蛋白为45 kD的单一条带,与基因序列推测值一致。结论:GNE基因已被成功地克隆和表达。; 余云彦张卫星闫欣欣唐琴琴刘乃华晏永波李校林绍强; 关键词：基因克隆纯化

重组人酸性成纤维细胞生长因子改构体在大肠杆菌中的表达被引量：1: 2007年; 目的:提高重组人成纤维细胞生长因子改构体在大肠杆菌工程菌表达体系E.coliBL21(DE3)/pET3c-haFGF中的表达水平。方法:从菌种和培养基筛选做起,选择了全合成的YH培养基做大肠杆菌表达体系E.coliBL21(DE3)/pET3c-haFGF的发酵培养基,并从多角度研究了其质粒的稳定性,设计了生长期不添加抗生素、诱导前离心去除β-内酰胺酶同时添加氨苄青霉素的方法,通过密码子偏爱性和定点PCR突变技术改变β-内酰胺酶的表达强度。结果:经50代传代试验,质粒分配稳定性在90%以上,PstI酶切图谱显示结构稳定性达100%,表达水平维持在25%～28%。LBAmp平板揭示了诱导过程中工程菌丧失表达能力的部分原因,诱导前离心的实验使表达水平提高13.68%,在IPTG浓度0.3mmol/L、氨苄青霉素添加量50μg/ml时,表达效率提高了25%。结论:本研究建立的工艺操作较为简便易行,易于放大,具有较大的经济意义。; 袁辉刘笑迪谭毅林绍强杨树林李校; 关键词：质粒稳定性大肠杆菌酶切图谱

改构型酸性成纤维细胞因子的分子基础与生物学效应被引量：3: 2007年; 切除aFGF基因N端第1-27位残基得到的aFGF改构体(MaFGF),去除了aFGF的促有丝分裂活性,保留其非促分裂因子样活性,减轻了促进肿瘤生长和诱发癌症发生的潜在危险。本文对aFGF的理化特征、生物学效应以及作用机理等进行综述。; 胡文娟黄巨恩李校肖健; 关键词：成纤维细胞因子生物学效应分子基础 AFGF 酸性

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