李得江
- 作品数：7 被引量：8H指数：1
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 携带分子标记的猪瘟病毒感染性cDNA载体的构建方法
- 本发明涉及病毒抗体研究，旨在提供一种携带分子标记的猪瘟病毒感染性cDNA载体的构建方法。包括：(1)用生理盐水稀释猪瘟活疫苗至1头份/ml作为实验材料，抽提总RNA后，根据设计的6对引物，RT-PCR分段扩增相应的6个c...
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- 猪瘟病毒石门株E2蛋白的单抗制备及抗原表位鉴定被引量：1
- 2012年
- 用猪瘟病毒石门株E2(SM-E2)的BC区原核表达蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术制备单抗,测定其效价并鉴定抗原表位。结果表明,制备了1株持续、稳定分泌抗SM-E2的单克隆抗体2B10,效价在1∶600～1∶1 000之间。单抗2B10能与常规SDS-PAGE转膜的SM-E2蛋白发生反应,表明其识别的是线性表位,并且该单抗只能识别石门毒株,而不能与C株疫苗及2型流行毒株发生反应。点突变E2蛋白ELISA分析结果表明,该单抗不与707、709、711、713和714位突变蛋白发生反应,表明单抗2B10识别的线性表位为707I-X-P-X-G-X-G-G714。该单抗对猪瘟病毒抗原多样性分析和致病机制研究有一定的应用价值。
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- 关键词：猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2单克隆抗体
- 基于E2基因的可插入式猪瘟病毒cDNA载体构建及应用
- 本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种基于E2基因的可插入式猪瘟病毒cDNA载体构建及应用。该构建方法包括：以含有猪瘟病毒疫苗C株基因组5’半长的重组质粒pA-F123为模板，用限制性内切酶SpeI和NsiI进行酶切，酶切...
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- 两种荧光定量PCR方法检测猪瘟病毒的比较及应用被引量：7
- 2010年
- 根据猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)5端非编码区保守区域,设计猪瘟病毒特异性的引物和探针,建立了基于SYBR Green和TaqMan探针的两种荧光定量PCR检测方法。灵敏性和特异性试验结果表明,两种方法能够特异性地检测出不同型的猪瘟病毒,而对同属的牛病毒性腹泻病病毒以及其它一些主要猪病病原检测结果均为阴性。两种方法对猪瘟病毒C株的检测下限均为101TCID50,均高于常规的套式PCR。用携带该基因片段的重组质粒为模板进行检测,SYBR Green方法的检测下限为3×100copies,比TaqMan探针方法更加灵敏(3×101copies)。应用建立的SYBR Green方法对2009年采集于浙江地区不同猪场的20份病猪样品进行CSFV检测,有8份样品为阳性,与套式PCR方法检测结果一致。进一步应用SYBR Green方法对不同感染阶段细胞内病毒RNA复制水平进行检测,与病毒滴度的结果基本一致。因此,本研究建立的SYBRGreen荧光定量PCR检测方法能够应用于组织和培养细胞中猪瘟病毒的检测。
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- 关键词：猪瘟病毒荧光定量PCR
- 携带分子标记的猪瘟病毒C株感染性cDNA载体的构建方法
- 本发明涉及病毒抗体研究，旨在提供一种携带分子标记的猪瘟病毒感染性cDNA载体的构建方法。包括：(1)用生理盐水稀释猪瘟活疫苗至1头份/ml作为实验材料，抽提总RNA后，根据设计的6对引物，RT-PCR分段扩增相应的6个c...
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- 文献传递
- 猪瘟病毒SM株E2蛋白单克隆抗体的制备及其识别位点的鉴定
- 猪瘟(classical swine fever,CSF)是猪的一种最重要的传染病,其病原是猪瘟病毒(HCV,裁CSFV)。猪瘟毒为RNA病毒,属于黄病毒科瘟病毒属成员。CSF病理特征是微血管壁变性,致使内脏器官多发性出...
- 李得江
- 关键词：猪瘟病毒单克隆抗体
- 文献传递
- 基于E2基因的可插入式猪瘟病毒cDNA载体构建及应用
- 本发明涉及生物技术领域，旨在提供一种基于E2基因的可插入式猪瘟病毒cDNA载体构建及应用。该构建方法包括：以含有猪瘟病毒疫苗C株基因组5’半长的重组质粒pA-F123为模板，用限制性内切酶SpeI和NsiI进行酶切，酶切...
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- 文献传递
