李婷
- 作品数:15 被引量:50H指数:4
- 供职机构:北京农学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市农业科技项目北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学文化科学政治法律轻工技术与工程更多>>
- 叶用莴苣热激蛋白基因LsHsp70-2711的克隆及高温胁迫下的功能分析被引量:19
- 2017年
- 【目的】通过克隆Hsp70相关基因,并利用VIGS分析叶用莴苣热胁迫下Hsp70表达量和形态变化,为解析热激蛋白基因Hsp70在高温胁迫下的响应机制及分子机理奠定基础。【方法】通过同源克隆及RACE技术,获得叶用莴苣热激蛋白LsHsp70-2711的cDNA全长序列,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析该基因在不同温度和不同高温时间下的叶用莴苣热敏品种‘P-S11’和耐热品种‘G-S59’的表达差异,确定基因和高温的相关性。根据VIGS技术,构建p TRV-LsHsp702711瞬时沉默载体,转化农杆菌GV1301,注射法侵染叶用莴苣叶片,三周后经PCR鉴定得到阳性植株。对照组和阳性组在基因表达和形态上进行对比,对照植株和阳性植株热胁迫和干旱处理后再次分析LsHsp70-2711的表达特性,观测形态变化。【结果】LsHsp70-2711 cDNA全长为2 226 bp,开放阅读框为2 154 bp,编码718个氨基酸,与拟南芥(NP_187864.1)、番茄(NP_001266213.1)、水母雪莲花(AAB99745.1)等物种的Hsp70同源性达到80%以上,证明此基因属于Hsp70家族。根据qRT-PCR结果,高温胁迫下该基因在两个品种中的表达均上调,在耐热品种中总体表达水平均高于热敏品种,耐热品种LsHsp70-2711的表达量最大值出现在42℃、60 min,37℃、60 min时热敏品种基因表达量达最大值,且在42℃高温下热敏品种‘P-S11’中基因表达随着胁迫时间的增加受到抑制,而耐热品种‘G-S59’则能长时间保持较高的表达水平,此结果和田间两品种间耐热差异表现相符合。亚细胞定位显示,LsHsp70-2711主要在细胞质中。将构建好的载体侵入叶用莴苣,鉴定后获得阳性植株。由定量PCR结果可知,未进行胁迫处理的阳性植株与对照株相比,LsHsp70-2711表达量下降,茎长明显增长。热胁迫和干旱处理后的阳性植株LsHsp70-2711表达量显著低于对照植株,高温处理对LsHsp70-2711的影响大于干旱胁迫。【结论】LsHsp70-2711属于Hsp70基因家�
- 李雅博李婷韩莹琰范双喜
- 关键词:叶用莴苣HSP70高温胁迫基因沉默
- 一种甜瓜增甜栽培方法
- 本发明公开了一种甜瓜增甜栽培方法,包括以下步骤:S1:在栽种甜瓜10‑15天之前,对田地进行撒肥和翻耕,撒肥的肥料为鸡粪、豆饼、沼渣,翻耕深度为25‑30厘米,并在翻耕后的田地上开设瓜沟,在栽种瓜苗15‑20厘米处均匀放...
- 郝敬虹李婷雷慧马萱张静
- 文献传递
- 叶用莴苣2个Hsp70基因与其抽薹的相关性分析被引量:3
- 2015年
- 为探究叶用莴苣2个Hsp70基因Ls Hsp70-2711和Ls Hsp70-3711与叶用莴苣的抽薹是否相关,采用实时荧光定量PCR技术(RT-PCR),以2个品种的叶片为试材,分析这2个基因在耐热型品种G-S59和热敏型品种P-S11 2个叶用莴苣品种抽薹前后的相对表达量。研究结果表明:首先,这2个Hsp70基因在抽薹前后的表达量表现出显著差异,所以推测与叶用莴苣的抽薹性具有一定关联;其次,Ls Hsp70-2711基因在2个叶用莴苣品种中的表达趋势均为抽薹前显著高于抽薹后,且在相同处理下G-S59中的表达量又明显高于P-S11中的表达量,Ls Hsp70-3711基因与Ls Hsp70-2711基因在2个品种中的表达情况相反。叶用莴苣热激蛋白基因Ls Hsp70-2711和Ls Hsp70-3711除与叶用莴苣的耐热性相关外,还与其抽薹性具有一定相关性。
- 李婷韩莹琰范双喜赵真真
- 关键词:叶用莴苣热激蛋白基因抽薹
- 北京地区华北紫丁香花芽分化过程的初步研究
- 本文通过石蜡切片法,利用光学显微镜,对北京地区华北紫丁香花芽分化的过程进行了研究。研究表明在北京地区华北紫丁香从5月上旬开始花芽分化,9月中旬完成花芽分化,历时4个多月。其花芽分化的过程基本呈现一个快-慢-快的特征,可划...
- 李婷郑健关雪莲李宝霞
- 关键词:花芽分化花原基
- 文献传递
- 叶用莴苣中营养物质的提取方法
- 本发明公开了一种叶用莴苣中营养物质的提取方法,属于植物营养有机成分的提取领域。该方法包括:以食用叶用莴苣为原料,对原料进行烘干、粉碎和过筛处理;将处理后的原料按设定的萃取温度和萃取压强进行二氧化碳超临界萃取,二氧化碳超临...
- 范双喜李君平韩莹琰李婷任月陈青君刘超杰
- Vip3Aa10与甜菜夜蛾刷状缘膜囊泡的结合特性被引量:1
- 2019年
- 【目的】营养期杀虫蛋白Vip3A是一种由苏云金芽孢杆菌在对数生长期产生的新型杀虫毒素。Vip3A与敏感昆虫中肠上皮细胞的结合是其发挥杀虫活性的关键步骤。为进一步探究Vip3A毒素的杀虫机理,研究Vip3Aa10与甜菜夜蛾刷状缘膜囊泡(BBMVs)的结合特性。【方法】在大肠杆菌中用IPTG诱导表达Vip3Aa10,用亲和层析和离子交换层析的方法纯化蛋白,并用胰蛋白酶活化Vip3Aa10,得到Vip3Aa10-T。然后分析Vip3Aa10前毒素和Vip3Aa10-T对甜菜夜蛾的杀虫活性,用免疫印迹法和配体印迹法分析Vip3Aa10-T与甜菜夜蛾BBMVs的结合特性以及在甜菜夜蛾BBMVs上的结合蛋白。【结果】Vip3Aa10-T与Vip3Aa10前毒素对甜菜夜蛾的杀虫活性很高。Vip3Aa10-T在pH8.0时更容易与甜菜夜蛾BBMVs结合,并且能够与非敏感性昆虫黄粉虫BBMVs结合。在相同pH条件下,Vip3Aa10前毒素比Vip3Aa10-T更容易与甜菜夜蛾BBMVs结合。Vip3Aa10-T在甜菜夜蛾BBMVs上有4条结合蛋白,其分子量分别为80、38、31和22kDa。【结论】活化的Vip3Aa10与甜菜夜蛾BBMVs的结合是pH依赖性的,并且能与BBMVs上的4个蛋白结合。
- 李婷张淑臣申晓鸿师光禄刘京国
- 关键词:甜菜夜蛾杀虫活性
- 叶用莴苣中营养物质的提取方法
- 本发明公开了一种叶用莴苣中营养物质的提取方法,属于植物营养有机成分的提取领域。该方法包括:以食用叶用莴苣为原料,对原料进行烘干、粉碎和过筛处理;将处理后的原料按设定的萃取温度和萃取压强进行二氧化碳超临界萃取,二氧化碳超临...
- 范双喜李君平韩莹琰李婷任月陈青君刘超杰
- 文献传递
- 叶用莴苣热激蛋白90(LsHsp90)基因的克隆及其在热激下的表达被引量:10
- 2013年
- 【目的】克隆叶用莴苣热激蛋白Hsp90基因并探讨其响应热胁迫的相关机制,为揭示叶用莴苣抗热分子机制奠定理论基础。【方法】采用同源克隆和RACE技术相结合,从叶用莴苣叶片总RNA中克隆LsHsp90 cDNA序列。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析LsHsp90在叶用莴苣耐热品种Z36和热敏品种S106受37℃和42℃热激后叶片的表达差异。【结果】该基因cDNA序列全长2 330 bp,开放阅读框2 097 bp,编码698个氨基酸,推导的蛋白质分子量约79.8 kD。蛋白质结构预测及同源比对分析表明,LsHsp90基因编码蛋白含ATPase位点和Hsp90保守结构域,并与拟南芥(AY081302.1)、紫茎泽兰(EU269070.1)等多种物种的热激蛋白90高度同源;进化树分析表明,LsHsp90与紫茎泽兰Hsp90基因(EU269070.1)聚为一类。qRT-PCR分析表明,37℃热胁迫下,该基因在耐热品种和热敏品种的叶片中均上调表达;42℃高温胁迫下,热敏品种S106中下调表达,而耐热品种Z36上调表达。【结论】成功从叶用莴苣叶片中分离克隆到LsHsp90,该基因具有已知物种Hsp90基因的特征,该基因在热胁迫下有不同的表达特征,预示该基因其可能在抗高温胁迫中起重要作用。
- 任月韩莹琰李婷郝敬虹范双喜
- 关键词:叶用莴苣热激蛋白90基因克隆高温胁迫基因表达
- 叶用莴苣热激蛋白LsHsp70-1707基因的克隆及表达分析被引量:1
- 2015年
- 为了解叶用莴苣热激蛋白LsHsp70-1707基因在高温下的作用机制,通过同源克隆及RACE技术克隆并获得叶用莴苣热激蛋白LsHsp70-1707基因全长cDNA序列,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析基因在不同叶用莴苣品种中的表达量差异。该基因全长2 400bp(KP258179),开放阅读框为2 106bp,编码701个氨基酸,与西瓜(AAC03416.1)、牵牛花(ABZ04081.1)、黄瓜(CAA52149.1)、菠菜(AAB91471.1)等HSP70蛋白高度同源。实时荧光定量PCR结果表明:高温处理时,该基因在热敏品种中表达没有明显增加,随着处理时间的增加甚至表现为下调,而在耐热品种中,其表达上调。成功克隆得到叶用莴苣热激蛋白LsHsp70-1707基因,热胁迫下该基因在不同品种中的表达有一定的差异性,推测该基因可能与叶用莴苣耐热性相关。
- 赵真真韩莹琰李雅博范双喜郝敬虹刘超杰李婷
- 关键词:叶用莴苣HSP70基因克隆
- 高校研究生党支部红色“1+1”活动情况调查——以北京农学院为例
- 2018年
- 红色"1+1"活动在北京所属高校已开展多年,已成为高等院校的一项特色活动,尤其对研究生党员支部建设、京郊农村的帮扶以及学生党员自身素质的提升起到很大作用。但同时也暴露出了相关问题,通过调查了解相关问题,提出合理的解决方案,确保红色"1+1"活动能够持续为对接地提供良好的帮扶,使得此活动能够持续健康的发展。
- 马晓龙李婷贾慧敏
- 关键词:研究生党支部