李均 作品数:30 被引量:78 H指数:5 供职机构: 中国农业科学院油料作物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 武汉市青年科技晨光计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 哲学宗教 更多>>
一种甘蓝型油菜雄性不育基因BnMS5e、cDNA、蛋白、载体、工程菌及其应用 本发明涉及一种甘蓝型油菜雄性不育基因BnMS5<Sup>e</Sup>、cDNA、蛋白、载体、工程菌及其应用,属于生物育种技术领域。所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述基因BnMS5<Sup>e<... 曾新华 吴刚 闫晓红 袁荣 王淼 刘芳 罗军玲 武玉花 朱莉 李晓飞 李均甘蓝型油菜温敏型显性细胞核不育基因BnaAtsMs 本发明公开了一种甘蓝型油菜温敏型显性细胞核不育基因BnaAtsMs,涉及油菜育种技术领域。甘蓝型油菜温敏型显性细胞核不育基因BnaAtsMs,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示;其编码的氨基酸序列如序列表SE... 曾新华 吴刚 闫晓红 武玉花 朱莉 李均 刘芳 罗军玲文献传递 一种甘蓝型油菜雄性不育基因BnMS5e、cDNA、蛋白、载体、工程菌及其应用 本发明涉及一种甘蓝型油菜雄性不育基因BnMS5<Sup>e</Sup>、cDNA、蛋白、载体、工程菌及其应用,属于生物育种技术领域。所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述基因BnMS5<Sup>e<... 曾新华 吴刚 闫晓红 袁荣 王淼 刘芳 罗军玲 武玉花 朱莉 李晓飞 李均文献传递 重叠延伸PCR克隆拟南芥ACCase基因和植物表达载体构建 被引量:5 2009年 植物的乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)催化乙酰辅酶A羧化生成丙二酸单酰辅酶A,是脂肪酸合成的第一步,该步骤是种子脂肪酸合成与含油量形成的关键调控步骤。拟南芥中的真核形式ACCase基因cDNA长约7 000bp,难以直接克隆。本研究先通过常规PCR将其cDNA分成八个重叠的片段分别扩增出来,再用重叠延伸PCR将得到的片段逐步拼接成长度为6 890bp的完整的基因序列,测序证实克隆序列正确无误,最后将其克隆到农杆菌转化植物的载体上。序列分析发现ACCase基因的开放阅读框长度为6 765bp,编码一个含2 254个氨基酸残基的多肽链,推测其分子量约为250kDa。ACCase基因的成功克隆为利用该基因调控油料作物的含油量奠定了良好基础,同时为克隆长度较大的基因提供了一种经济可行的方法。 胡亚平 夏玉平 吴刚 武玉花 肖玲 李均 卢长明关键词:重叠延伸PCR 乙酰辅酶A羧化酶 基因克隆 甘蓝型油菜C染色体组定向转基因的方法 本发明公开了一种甘蓝型油菜C染色体组定向转基因的方法,其步骤是:A、甘蓝农杆菌介导的遗传转化,首先是农杆菌菌液制备,其次是外植体制备,第三是将外植体置于农杆菌液中进行遗传转化,第四是除草剂抗性检测,第五是PCR分子检测;... 方小平 李均 王转 罗莉霞 李俊文献传递 甘蓝型油菜C染色体组定向转基因的方法 本发明公开了一种甘蓝型油菜C染色体组定向转基因的方法,其步骤是:A.甘蓝农杆菌介导的遗传转化,首先是农杆菌菌液制备,其次是外植体制备,第三是将外植体置于农杆菌液中进行遗传转化,第四是除草剂抗性检测,第五是PCR分子检测;... 方小平 李均 王转 罗莉霞 李俊文献传递 一种与油菜显性细胞核不育相关的基因辅助育种的分子标记及其应用 本发明公开了一种与油菜显性细胞核不育相关的基因辅助育种的分子标记及其应用,涉及油菜分子育种技术领域。本发明提供了油菜显性细胞核不育相关的基因辅助育种的分子标记、鉴定引物、试剂盒以及在油菜及相关作物显性细胞核雄性不育杂种优... 曾新华 闫晓红 吴刚 袁荣 王淼 罗军玲 刘芳 朱莉 李晓飞 李均文献传递 白芥×甘蓝F1代及BC1代单体异附加系的GISH分析 被引量:17 2006年 以白芥(SinapisalbaL)为母本,甘蓝(Brassica oleracea var alboglabra)为父本进行属间杂交,获得了不育及半不育的两种F1植株,再以半不育的F1植株作母本,甘蓝作父本进行回交,获得了BC1植株.利用基因组原位杂交(genomic in situ hybridization,GISH),结合双色荧光原位杂交(dual-colour fluorescence in situ hybridization,dcFISH)技术,鉴定出不育F1植株有21条染色体,其中9条来自甘蓝,12条来自白芥,属含1套甘蓝染色体及1套白芥染色体的预期杂种;半不育F1植株有30条染色体,其中18条来自甘蓝,12条来自白芥,属含2套甘蓝染色体及1套白芥染色体的非预期杂种,其花粉母细胞(PMC)减数分裂中期Ⅰ最多出现3个C-S三价体,减数分裂后期Ⅰ白芥染色体出现不同的分离比例.GISH分析结果表明,从BC1植株中鉴定出了1株甘蓝-白芥单体异附加系,其有丝分裂中期相有19条染色体,18条来自甘蓝,附加的1条来自白芥;减数分裂中期Ⅰ显示9个甘蓝的二价体及1个白芥的单价体,有时白芥的单个染色体与甘蓝的染色体形成了可能的三价体.甘蓝-白芥单体异附加系的获得为白芥基因渗入、基因定位与克隆奠定了基础. 魏文辉 张苏锋 李均 王力军 陈波 方小平 王转 罗莉霞关键词:甘蓝 白芥 单体异附加系 一种与油菜显性细胞核不育相关的基因辅助育种的分子标记及其应用 本发明公开了一种与油菜显性细胞核不育相关的基因辅助育种的分子标记及其应用,涉及油菜分子育种技术领域。本发明提供了油菜显性细胞核不育相关的基因辅助育种的分子标记、鉴定引物、试剂盒以及在油菜及相关作物显性细胞核雄性不育杂种优... 曾新华 闫晓红 吴刚 袁荣 王淼 罗军玲 刘芳 朱莉 李晓飞 李均转基因油菜筛查检测策略研究 被引量:10 2012年 根据收集到的国内外已商业化转基因油菜品种的基因元件信息,构建了油菜转基因检测分子特征矩阵,在分析基因元件使用频率的基础上,建立了转基因油菜的筛查检测策略。研究发现,利用P-CaMV35S、P-FMV35S和bar这三个元件组合,对现有转基因油菜品种的筛查检出率可达100%。将P-CaMV35S、P-FMV35S、bar、CP4-EPSPS、PAT和T-NOS组合,每个转化事件可检出至少两次,增加了检测的可靠性。同时,分析了不同转化事件中同名基因元件的序列差异,进一步验证了分子特征矩阵筛查方法的可行性。 张丽 武玉花 吴刚 曹应龙 李均 卢长明关键词:转基因油菜 转基因检测 筛查方法 矩阵分析 PCR