李仁清
- 作品数：49 被引量：198H指数：8
- 供职机构：北京市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划北京市优秀人才培养资助北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 2022年北京市通州区一起霍乱疫情分离菌株的病原学特征分析被引量：3
- 2023年
- 目的分析2022年北京市通州区一起霍乱弧菌引起的疫情的病原学特征,并与引起通州区过往疫情的菌株进行比对分析。方法用实时荧光PCR方法检测样本中O1/O139群霍乱弧菌的特异性基因,同时按常规法对样本进行菌株的分离培养鉴定;用普通PCR方法检测霍乱弧菌的11种毒力基因;用微量肉汤稀释法进行12种药物的敏感性试验,采用NotⅠ限制性内切酶进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)和聚类分析,基于全基因组序列进行菌株遗传学分析。结果本次疫情共检出5株O1群小川型非产毒霍乱弧菌,所有菌株均携带ompU、toxR、tcpI、tcpA^(EL)、hlyA^(EL)、hlyA^(CL)和rtxC基因,不携带ctxAB基因,5株菌耐药情况一致,均为美罗培南–头孢噻肟–头孢他啶–链霉素–氨苄西林–氨苄西林/舒巴坦6种药物耐药,为多重耐药菌株。PFGE分6种带型Ⅰ~Ⅵ,本次疫情菌株带型为Ⅱ型。与通州区既往检出的菌株相比,与2011年2株产毒O1群小川型霍乱弧菌带型较为接近,耐药情况一致,毒力基因携带情况有所差异,但都携带tcpA^(EL)基因。遗传学分析显示本次疫情菌株为不同于第七次世界大流行菌株的新出现的克隆群。结论通州区流行的O1群霍乱菌株以多重耐药小川型非产毒株为主,PFGE带型分散,本次疫情菌株是新出现的克隆群,以后的霍乱防控工作中应重视此类菌株并制定相应的策略。
- 张萍邹林高翔杨郝亮甄博珺李伟红郭晓晨林长缨李仁清严寒秋逄波
- 关键词：O1群霍乱弧菌毒力基因脉冲场凝胶电泳遗传学分析
- 人免疫缺陷病毒早期蛋白Nef的表达、纯化及免疫原性研究
- 2008年
- 目的:通过原核细胞表达人免疫缺陷病毒(HIV)Nef抗原,制备特异抗血清,为Nef抗原检测提供技术方法。方法:以HIV Botswana毒株基因组为模板,用PCR法获得Nef蛋白编码基因,将其克隆到pET30a载体中,在大肠杆菌中表达Nef融合蛋白;用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠获得抗血清,用真核表达的Nef抗原对其特异性进行分析。结果:构建的Nef融合基因在大肠杆菌中获得表达,相对分子质量约为36×103,免疫BALB/c小鼠获得针对融合蛋白的高效价抗血清,ELISA抗体滴度为1∶6400;免疫荧光和Western blot检测表明,该抗血清能特异地与重组痘苗病毒表达的Nef抗原反应。结论:在大肠杆菌中表达了HIV Nef融合蛋白,制备了Nef融合蛋白的高效价小鼠免疫血清,该血清能特异性识别HIV Nef抗原,为HIV Nef抗原检测提供了技术方法。
- 陆柔剑齐建国邓瑶王世峰王文玲辛伟李仁清阮力
- 关键词：人免疫缺陷病毒原核表达抗血清
- 幼年接种天花疫苗对成年猴痘病例临床特征的影响分析
- 2024年
- 目的通过对比分析幼年是否接种天花疫苗的猴痘病例的临床特征、流行病学特征及实验室检测结果,探索猴痘确诊病例中幼年是否接种天花疫苗是否会对发病、临床特征及实验室检测产生影响.方法将北京市2023年5月至2023年8月猴痘确诊病例中接种过天花疫苗的病例纳入接种疫苗组,未接种天花或猴痘疫苗的人群纳入未接种疫苗组.通过流调、电子病历查询和电话随访的方式收集数据,对比分析两组人群的人口学资料、发病就诊情况、临床特征、流行病学信息和实验室检测结果.结果本研究共纳入90例,其中接种疫苗组(接种组)10例,未接种疫苗组(未接种组)80例,均为男性.接种组病例平均年龄(47.50±5.06)岁,未接种组病例平均年龄(31.68±5.34)岁;接种组中有9名为男男性行为(MSM)人群,6名HIV感染者;未接种组有78例MSM人群,43名HIV感染者.是否就诊、是否发病、发病与诊断时间差和21 d是否有性行为等指标中,接种组和未接种组差异均无统计学意义(P>0.05);发热、皮疹、皮疹发生部位、淋巴结肿大等临床特征在接种组和未接种组差异均无统计学意义(P>0.05);实验室指标中,咽拭子是否阳性在接种组和未接种组的差异有统计学意义(P<0.05);皮疹涂抹/痂皮是否阳性及Ct值分布在接种组和未接种组差异均无统计学意义(P>0.05).结论幼年接种天花疫苗,仍可以罹患猴痘.在猴痘确诊病例中接种天花疫苗的人群与未接种天花的人群相比,临床特征和流行病学特征无显著差异.但在后续猴痘疫苗的研发和接种过程中也不可忽视曾接种过天花疫苗的人群.
- 李丹任振勇窦相峰孙玉兰金昊源李仁清李夫张代涛
- 关键词：猴痘天花疫苗
- 按痘苗病毒优势密码子改造HIV-1 gag基因提高表达水平的研究被引量：10
- 2005年
- 为确定痘苗病毒密码子偏向性与基因表达的关系及其在痘苗病毒与宿主细胞相互作用过程中的作用,按痘苗病毒的优势密码子对HIV-1gag基因进行改造,并对合成基因与野生型HIV-1gag基因在痘苗病毒载体系统的表达水平进行了研究。结果显示:①各目的基因分别正向插入了痘苗病毒TK区7.5k启动子下游;②免疫荧光检测显示,改造前后的gag基因均能够很好地在痘苗病毒中表达;③Westernblot检测显示,在相同感染量时,改造后的gag基因具有更高的表达水平;④流式细胞术检测显示,密码子改造后的gag基因较野生型gag基因表达水平提高约17%。上述结果表明:按照痘苗病毒优势密码子进行外源基因改造,可作为提高外源基因在痘苗病毒中表达的策略,同时提示,密码子偏向性是痘苗病毒与宿主细胞相互作用的重要调控因素。
- 张相民辛伟王世峰李仁清陆柔剑王文玲吕亦晨阮力
- 关键词：痘苗病毒基因表达HIV-1GAG基因
- 2004—2015年北京市急性弛缓性麻痹病例疾病谱变化趋势被引量：8
- 2016年
- 目的分析北京市2004 2015年急性弛缓性麻痹（AFP）病例的疾病谱特征和变化趋势,为进一步指导AFP病例的监测工作提供科学依据。方法利用2004 2015年北京市AFP病例监测资料,将12年平均分为三个时间段,采用描述流行病学方法分析AFP病例疾病谱的分布特征和变化趋势。结果 2004 2015年北京市AFP病例报告发病率在1.26/10万~3.80/10万之间,临床诊断包括45种疾病,顺位前20名的疾病占所有病例数的87.05%;三个时间段期间,疾病谱顺位发生了一定变化,6种疾病一直居顺位前10名,7种疾病顺位上升至前10名,3种疾病顺位下降至10名外。结论可根据AFP病例疾病谱的变化特征,扩充检索疾病名称和关键词的范围,指导AFP病例的报告工作。
- 李娟李晓梅张朱佳子赵丹周涛张合润罗明龚成李仁清李爱华卢莉吴疆庞星火
- 关键词：急性弛缓性麻痹疾病谱
- 2011-2018年北京市鼠情和鼠疫血清学调查被引量：6
- 2019年
- 目的了解北京市2011-2018年啮齿动物的种群构成和种群密度,并探索其间是否存在鼠疫耶尔森氏菌感染。方法 2011-2018年,在门头沟、延庆、怀柔、密云和顺义区设立监测点,采用夹夜法捕捉啮齿动物鉴定种属并测算种群密度。用笼捕法捕捉啮齿动物,对其心脏取血,分离血清进行鼠疫F1抗体检测。结果 2011-2018年,夹夜法共捕获1 454只啮齿动物,可以分为8个种,其中社鼠、大林姬鼠和黑线姬鼠是鼠疫可染疫动物,其构成比居前三位,依次为43.5%、33.6%和11.6%。啮齿动物年平均密度变动于2.52%和6.02%之间(P>0.05),各区平均密度在4.01%和6.22%之间(P>0.05),密度受季节影响较大,一般在秋季较高,10月份密度最高可达17.25%。从827只啮齿动物心脏取血开展鼠疫感染调查,鼠疫F1血清抗体结果均为阴性。结论北京市未发现达乌尔黄鼠等鼠疫储存宿主,也未发现本地啮齿动物中存在鼠疫菌感染,但本地的优势种群社鼠、大林姬鼠和黑线姬鼠等是可染疫动物,可能在鼠疫菌输入后造成短暂传播。
- 窦相峰陈艳伟王小梅李爽吕燕宁田丽丽孙玉兰李仁清王全意陈丽娟
- 关键词：鼠疫啮齿动物宿主
- 肠道病毒共感染简易鉴定方法的建立及评价
- 2021年
- 目的在一代测序的基础上建立一种简易的肠道病病毒共感染鉴定方法。方法制备共感染的模拟样本,对其进行一代测序。使用Perl语言编写脚本对测序图谱进行分析,获得主峰和次峰序列。采用blastn与本地构建的肠道病毒数据库进行局部比对,同时采用stretcher进行全局比对,对主要和次要序列进行肠道病毒分型比较。结果编写了一个能够自动识别并分析一代测序色谱图结果中共感染状态并获得两个肠道病毒核苷酸序列的脚本。对于次要病毒DNA含量大于等于65ng的混合样本,只要次要病毒在混合样本中占比适中(如大于等于12.5%并小于等于25.0%)均能够顺利识别并准确分型。分型时,采用局部比对与采用全局比对的结果相当,但在1:1混合样本的分型时,局部比对的效果更好。结论本研究建立的肠道病毒共感染的简易鉴定方法可用于肠道病毒共感染的病毒识别与分型。
- 孙玉兰沈悦黎新宇杨扬梁志超李仁清
- 关键词：肠道病毒共感染
- 流行性乙型脑炎病毒GSS株prM、E和NS1蛋白基因的克隆及在非复制型痘苗病毒中的表达被引量：10
- 2003年
- 克隆流行性乙型脑炎(乙脑)病毒野毒(JEV)GSS株前膜蛋白信号序列、前膜蛋白(prM)、包膜蛋白(E)、非结构蛋白-1(NS1)和非结构蛋白NS2a的编码基因,并与非复制型痘苗病毒载体NTV进行同源重组,构建了乙脑病毒非复制型重组痘苗病毒疫苗株NTVA(E/L)JEV。通过PCR和Southernblot检测证明,在非复制型痘苗病毒中有乙脑病毒prM信号序列、prM、E、NS1和NS2a基因的插入:Westernblot检测证明,重组病毒可以在细胞内成功地表达prM、E和NS1蛋白,并可将prM、E和NS1蛋白分泌到细胞培养上清中;免疫荧光检测证明,E和NS1蛋白主要分布在细胞膜上。电镜下可见分泌到细胞外的病毒样颗粒。
- 王文玲陆柔剑陆振华王世峰付士红邓瑶李仁清辛伟梁国栋阮力
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒蛋白基因克隆
- 北京市急性弛缓性麻痹病例追踪管理软件应用前后关键指标质量变化被引量：2
- 2018年
- 目的分析《北京市AFP病例追踪管理软件》应用前后的系统关键指标的质量变化,为提高急性弛缓性麻痹(AFP)病例监测质量提供科学建议。方法利用2015-2016年北京市AFP病例监测资料,采用构成比和中位数来描述分析本地和异地AFP病例调查、采便、送检、结果反馈和随访等环节的特异性和及时性。结果 2015年和2016年北京市分别报告AFP确诊病例202例和209例,其中本地病例分别为30例和44例,异地病例分别为172例和165例。两年间,本地病例报告后24 h调查率均为100%,异地病例由99.42%提高至100%;本地病例麻痹14 d内双份粪便标本采集率分别为96.67%和93.18%、异地病例由72.73%下降至65.38%;每份粪便标本采集后7 d内送检率本地病例由93.33%提高至100%、异地病例由70.45%提高至96.15%;本地病例送检后14 d检测结果反馈率和麻痹后60~70 d随访率均为100%,异地病例分别为98.48%和97.69%。结论《北京市AFP病例追踪管理软件》的启用大大提高了本地和异地病例粪便标本采集后7 d内的送检率,对提高麻痹后14 d内双份粪便标本采集率无促进作用。
- 李娟赵丹张朱佳子李晓梅杨帆周涛张合润罗明龚成李仁清李爱华李茂中吴疆
- 关键词：急性弛缓性麻痹特异性及时性
- EV71所致手足口病患儿及其密切接触儿童带毒状况的追踪观察被引量：9
- 2011年
- 目的调查Ev71所致手足口病患儿及其密切接触儿童的病毒携带状况，探讨肠道病毒传播规律，为科学防控手足口病提供参考。方法现场追踪观察18名聚集性患儿及其50名密切接触儿童并采集标本，利用RD细胞分离肠道病毒，实时荧光RT-PCR方法检测肠道病毒核酸。结果在发病后3～6周内，仍有38，89％（7／18）的确诊患儿粪便中可分离到具有感染活性的EV71；最长排毒时间为39d。密切接触儿童中有22．00％（11／50）在采取“两周闭园”措施后开园第1—3周也可分离到EV71活病毒，其检出距同班首例患儿发病的最长时间为49d。结论EV71可引起相当数量隐性感染，且在患者和／或隐性感染者粪便中较长时间排出，“两周闭园”措施对阻断EV71的传播作用有限。
- 陈丽娟李仁清张合润王玉梅贺雄
- 关键词：EV71手足口病
