李世辉
- 作品数：20 被引量：107H指数：7
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 白血病耐药细胞系U937／ADR的建立及其生物学性状被引量：4
- 2009年
- 目的:建立白血病耐药细胞系U937/ADR模型,并检测其多药耐药相关基因及其生物学性状的改变。方法:以大剂量阿霉素(IC50浓度),短时间(2h)暴露法诱导人白血病细胞系U937细胞的阿霉素耐药性。检测细胞的生长曲线,计算阿霉素耐药倍数,流式细胞术分析细胞周期分布;罗丹明123检测药物外排功能;荧光定量PCR(FQ-PCR)检测MDR1、MRP1、NF-Κb、Bcl-2、BaxmRNA水平变化;Western blot检测Akt、p-Akt、P65、P-gp、MRP1和Bcl-2蛋白水平变化。结果:成功构建耐阿霉素U937/ADR细胞系,对阿霉素耐药指数为亲代U937细胞的11倍,U937/ADR群体倍增时间为43.6h,高于亲代细胞8.9h;流式细胞分析显示与U937细胞相比,U937/ADR的G0/G1期细胞增多,而G2/M期细胞减少。并对多种化疗药物产生交叉耐药性。罗丹明123外排试验显示,U937/ADR细胞外排明显增加。U937/ADR细胞MDR1、NF-Κb、Bcl-2mRNA表达水平明显增加,P-gp及p-Akt、P65表达水平增加。结论:成功构建的U937/ADR细胞系其生物学特性明显不同与亲代U937细胞,对多种化疗药物产生多药耐药,高表达多药耐药蛋白P-gp,同时激活p-Akt及NF-Kb。
- 薛芳成志勇杨琳李世辉张颖潘崚
- 关键词：U937多药耐药阿霉素P糖蛋白
- 青蒿琥酯对骨髓瘤细胞SP2／0的作用观察及其机制的初步探讨被引量：11
- 2008年
- 目的观察青蒿琥酯对骨髓瘤细胞SP2／0的增殖抑制及促凋亡作用，并对其机制进行初步探讨。方法利用二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）法检测不同浓度青蒿琥酯对SP2／0细胞作用24、48和72h后的增殖抑制作用，并观察其对SP2／0小鼠移植瘤的抑瘤效应。常规Giemsa染色、DAPI荧光染色以及透射电镜下观察细胞凋亡的形态学变化，琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA梯带，利用AnnexinV／PI双染和流式细胞术检测青蒿琥酯作用后24、48hSP2／0细胞的凋亡率和细胞周期。Westernblot检测核因子κB（NF—κB）065及其抑制蛋白（IKB）d的水平，酶联免疫吸附（ELISA）法检测NF-κB065的转录活性。结果2μg／ml青蒿琥酯作用24h，对SP2／0细胞增殖抑制率即达33．0％；40μg/ml青蒿琥酯作用72h，细胞增殖抑制率达91.9％，呈现出明显的时间、剂量依赖性。50、100和200mg·kg^-1·d^-1的青蒿琥酯对SP2／0小鼠移植瘤的抑瘤率分别为17.8％、36.5％和48．0％。2μg/ml青蒿琥酯作用24h，G0／G1期细胞数目增多（50．6％±0．8％），凋亡率为7．7％；40μg/ml青蒿琥酯作用48h，G0／G1期细胞达75．3％±7.0％，凋亡率为78.7％，呈时间、剂量依赖性。胞核中NF—κBp65蛋白减少，胞浆中IκBα蛋白的表达增加，NF—κBp65的转录活性降低。结论青蒿琥酯对骨髓瘤细胞SP2／0有显著的增殖抑制和诱导凋亡作用，是一种潜在的抗骨髓瘤药物，其作用机制与抑制NF—κB p65的转录活性有关。
- 李世辉潘崚薛芳
- 关键词：青蒿琥酯多发性骨髓瘤凋亡核因子ΚB
- 参芪扶正注射液配合化疗治疗急性白血病疗效及对T淋巴细胞亚群和血清IFN-γ、IL-10、IL-2水平的影响被引量：12
- 2005年
- 目的观察参芪扶正注射液配合化疗治疗急性白血病患者疗效及对T淋巴细胞亚群(CD4 、CD8、CD4 /CD8)和血清干扰素-γ(IFN -γ)、白细胞介素(IL) - 10、IL -2的影响。方法将6 5例初治白血病患者随机分为参芪扶正注射液加化疗组(参芪组,32例)及单纯化疗组(对照组,33例) ,观察其缓解率、治疗前后外周血成熟中性粒细胞绝对值的变化、T淋巴细胞亚群和血清IFN- γ、IL -10、IL- 2水平。结果治疗后参芪组缓解率与对照组比较,差异无显著性(P >0. 0 5 )。化疗后第1、2、3周末两组外周血成熟中性粒细胞绝对值均降低,与本组化疗前比较,差异均有显著性(P <0 . 0 1或P <0 . 0 5 ) ;第3、4周末两组成熟中性粒细胞绝对值较化疗后第1、2周回升,且参芪组高于对照组,两组比较差异有显著性(P <0 . 0 5 )。治疗后两组CD4 、CD4 /CD8均明显提高,与治疗前比较,差异有显著性(P <0 .0 5 ,P <0 . 0 1)。治疗后两组血清IFN -γ、IL- 2水平明显升高,血清IL -10水平明显下降,与治疗前比较,差异均有显著性(P <0 . 0 1) ;两组治疗后比较,差异亦有显著性(P <0 . 0 5 )。结论参芪扶正注射液能改善、调节接受化疗的急性白血病患者的免疫功能,促进化疗后骨髓造血细胞增生,增强疗效。
- 魏影非王素云任莉莉杜惠兰王超李杰李世辉曹晓艳邓叶君左金洪
- 关键词：参芪扶正注射液血清IFN-ΓT淋巴细胞亚群IL-2水平中性粒细胞绝对值CD4/CD8
- 青蒿琥酯逆转多发性骨髓瘤细胞株多药耐药的实验研究被引量：5
- 2013年
- 目的建立小鼠骨髓瘤耐阿霉素(ADM)细胞系SP2/0/ADM,研究青蒿琥酯(ART)对其的影响。方法 ADM低浓度加量持续诱导法建立耐药细胞株;罗丹明123(Rh123)排出实验观察SP2/0/ADM细胞对药物外排情况;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验分析SP2/0/ADM细胞株耐药谱和ART对SP2/0/ADM细胞的增殖抑制作用及耐药逆转作用;通过Western blot法检测10μg/ml ART作用24、48、72、96 h后,SP2/0/ADM细胞P-糖蛋白(P-gp)表达变化。结果MTT实验结果显示,SP2/0/ADM细胞不但对ADM产生了耐药性[耐药指数(RI)为22.6],对米托蒽醌、足叶已苷和甲氨蝶呤也产生了不同程度交叉耐药,其RI分别为4.1、2.8和5.3。Rh123排出实验结果显示SP2/0/ADM细胞荧光强度低,而SP2/0细胞中荧光强度高。随ART浓度增加,对SP2/0/ADM细胞增殖抑制作用增强,呈剂量依赖性(P<0.05),其20%抑制浓度(IC20)约为0.3μg/ml。选此浓度进行耐药逆转实验,结果显示ART可增强ADM对SP2/0/ADM细胞的毒性作用,其半数药物抑制浓度(IC50)由17.81μg/ml降至4.26μg/ml,耐药逆转倍数为4.15倍(P<0.05)。随ART作用时间延长,SP2/0/ADM细胞P-gp蛋白表达水平呈下降趋势。与对照组(6 568.25±156.93)比较,ART作用24、48、72、96 h组P-gp蛋白灰度值分别为(4 459.12±297.13)、(4 218.35±153.21)、(3 558.52±241.38)、(3 024.85±157.33),差异有统计学意义(P<0.05)。结论SP2/0/ADM细胞株是成功的骨髓瘤耐药细胞株;ART能逆转SP2/0/ADM细胞对ADM耐药;ART抑制P-gp蛋白表达是其重要作用机制。
- 符祥俊姚红霞林丽娥吴从明陈文婷王述文杨晓阳李世辉
- 关键词：青蒿琥酯骨髓瘤耐药阿霉素
- 银屑病并发急性巨核细胞白血病1例被引量：1
- 2004年
- 魏影非王素云任莉莉李世辉杜惠兰李杰王超
- 关键词：银屑病乙双吗啉白血病急性巨核细胞白血病
- 青蒿琥酯与阿霉素对SP2/0骨髓瘤细胞作用对比观察及其作用机制的研究被引量：1
- 2008年
- 李世辉潘峻薛芳
- 关键词：青蒿琥酯多发性骨髓瘤核因子KBCDC25A
- 人参皂甙Rh/_2对SP2//O骨髓瘤细胞的作用及其机制的初步探讨
- 多发性骨髓瘤/(Multiple myeloma,MM/)是危害人类生命与健康的恶性疾病之一,是来源于终末分化的B 淋巴细胞的恶性肿瘤,以患者骨髓中大量的浆细胞克隆性增生为主要特征,其主要特点是大量单克隆免疫球蛋白的产生...
- 李世辉
- 关键词：巨噬细胞炎症蛋白-1Α肿瘤坏死因子Α
- 文献传递
- 和厚朴酚对U937细胞的体外作用被引量：5
- 2007年
- 目的:探讨和厚朴酚对U937白血病细胞系细胞增殖及凋亡的影响。方法:将U937细胞和正常人外周血单个核细胞分别与和厚朴酚共同培养,用噻唑蓝比色法(MTT)检测和厚朴酚对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪测定细胞周期分布及凋亡;透射电镜观察和厚朴酚处理后的U937细胞的超微结构变化;并以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blotting技术检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达。结果:和厚朴酚对U937的体外增殖有显著的抑制作用,48h半数抑制浓度(IC50)为11.8μg/mL,而对正常人外周血单个核细胞的IC50为40.3μg/mL;和厚朴酚使U937细胞的G0/G1期呈浓度依赖性增加,而S期和G2/M期细胞相应减少,且表现出细胞凋亡与和厚朴酚呈剂量和时间依赖关系。和厚朴酚使U937细胞内凋亡相关bax基因表达呈浓度依赖性增高,Bcl-2基因表达无明显变化,二者比值呈浓度依赖性增高。结论:和厚朴酚对U937细胞有抑制增殖和促进凋亡作用,其机制可能是通过抑制U937的细胞分裂和诱导促凋亡基因Bax表达而实现,但对正常人外周血单个核细胞的增殖抑制和促凋亡作用不明显。
- 薛芳李世辉潘崚
- 关键词：和厚朴酚U937细胞周期凋亡
- 和厚朴酚对人白血病细胞系U937细胞增殖和凋亡的影响被引量：4
- 2009年
- 【目的】探讨和厚朴酚(HNK)对白血病细胞系U937细胞增殖和凋亡的影响。【方法】将U937细胞和正常外周血单核细胞分别与HNK共培养,Hoechst33342荧光染色检测细胞凋亡形态,用噻唑蓝比色法(MTT)检测HNK对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测凋亡;罗丹明123检测线粒体膜电位;Caspase3/7活性检测试剂盒检测Caspase3/7活性;荧光定量PCR(FQ-PCR)检测Caspase-3、Caspase-7mRNA水平变化。【结果】HNK对U937的体外增殖有显著抑制作用,48h半数抑制浓度(IC50)为11.8μg/mL,而对正常外周血单核细胞的IC50为40.3μg/mL,AnnexinV/PI双标染色显示,细胞凋亡与和厚朴酚呈浓度和时间依赖相关。HNK明显降低U937细胞线粒体膜电位,增加Caspase3/7活性及mRNA表达水平,但对正常外周血单核细胞的增殖抑制和凋亡作用不明显。【结论】HNK可能通过激活caspase-3/7抑制U937细胞增殖、诱导U937细胞凋亡。
- 薛芳成志勇杨琳李世辉张敬宇姚丽潘峻
- 关键词：和厚朴酚U937细胞系
- PTEN对K562细胞mTOR调控的研究被引量：7
- 2009年
- 目的:探讨肿瘤抑制基因PTEN在人慢性粒细胞白血病细胞株K562中对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的调控作用,以及雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对K562细胞增殖抑制的影响。方法:通过实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantification PCR,RFQ-PCR)法检测甲磺酸伊马替尼(imatinib mexylate)干预K562细胞后BCR/ABL、PTEN、mTOR mRNA的表达水平及相互关系;Western印迹法检测甲磺酸伊马替尼干预和以腺病毒为载体感染野生型PTEN(Ad-PTEN-GFP)后K562细胞PTEN、Akt和p-Akt的蛋白表达水平;用MTT和FCM方法检测RAPA对不同腺病毒感染组K562细胞增殖及凋亡的影响。结果:格列卫干预K562细胞后,BCR/ABL和mTOR mRNA表达下调,PTEN mRNA表达上调;与感染Ad-GFP组相比,感染Ad-PTEN-GFP组的mTOR mRNA表达下调;Ad-PTEN-GFP感染与10nmol/L RAPA联合作用于K562细胞能够发挥协同作用,对K562细胞的增殖抑制率明显高于单独作用组。结论:PTEN是mTOR的上游调控基因,能够抑制mTOR的表达。RAPA与野生型PTEN一起可以协同抑制K562细胞的增殖。
- 成志勇杨晓阳薛芳李世辉姚丽杜行严潘崚
- 关键词：基因表达调控MTORK562
