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锦鲤疱疹病毒CJ株ORF25基因的克隆及生物信息学分析被引量：7: 2012年; 为了解锦鲤疱疹病毒中国吉林株(KHV-CJ)ORF25蛋白的结构特征和进化关系,采用框镜鲤尾鳍原代细胞增殖KHV-CJ,提取其DNA,经PCR扩增,获得ORF25基因,将其克隆到pMD18-T载体中,构建重组质粒。应用生物信息学方法初步分析KHV-CJ ORF25基因的结构和功能,并与GenBank上已公布的三株KHV构建系统进化树。结果显示,获得了长1824 bp的ORF25基因,编码608个氨基酸;预测ORF25基因编码蛋白的理论分子质量为66825.44 Da,等电点为7.947;抗原表位预测显示抗原性良好;编码蛋白存在6个N-糖基化位点、25个O-糖基化位点和28个磷酸化位点;系统进化树分析显示,与锦鲤疱疹病毒美国株属同一分支。; 周井祥李新伟朱霞王好吕文亮; 关键词：锦鲤疱疹病毒生物信息学分析

框镜鲤原代细胞培养和锦鲤疱疹病毒的分离鉴定: 锦鲤疱疹病毒病（KHVD）的暴发给鲤鱼养殖业造成了严重的经济损失,KHVD有效疫苗的研制迫在眉睫,锦鲤疱疹病毒（KHV）的分离是预防和控制本病的关键,而建立敏感细胞系是分离KHV的前提。本文以框镜鲤（Cyprinus c...; 朱霞; 文献传递

一株锦鲤疱疹病毒的分离与鉴定被引量：34: 2011年; 本实验对患病鲤鱼进行病毒分离及鉴定,将表现典型锦锂疱疹病毒(KHV)病症状的鲤鱼肾细胞与单层框镜鲤鱼鳍细胞(KFC)共培养,5d～6d后出现典型的KHV细胞病变,即细胞体积增大并出现空泡化;在电镜下观察到典型的KHV病毒粒子;并应用PCR方法扩增获得KHVORF25基因的849bp基因片段,连接至pMD18-T载体中,经酶切鉴定后序列分析表明,与GenBank登录的3株KHV同源性均为99.9%,命名为KHV-cj。基因进化比较显示,与KHV-J株关系较近。将病毒培养物(10-6.75TCID50)腹腔注射接种实验鱼可使其100%发病,并且症状和病理变化与自然感染KHV的鱼一致,死亡率为75%。表明本研究在国内首次分离到KHV。; 朱霞李新伟王好吕文亮周井祥; 关键词：锦鲤疱疹病毒

表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白基因重组犬2型腺病毒的构建及鉴定被引量：2: 2010年; 为构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白的重组犬2型腺病毒(CAV-2),本研究将PRRSV GP5蛋白基因表达盒连接于E3区部分缺失的CAV-2全基因组重组质粒pPolyⅡ-CAV-2中,构建重组质粒pPoly-Ⅱ-CAV-2-GP5。并采用PmeⅠ和AscⅠ双酶切和脂质体介导法,将其转染MDCK细胞,获得重组病毒rCAV-2-GP5,经酶切鉴定显示该重组病毒含有目的基因。经RT-PCR检测表明,rCAV-2-GP5能够转录相应GP5蛋白基因mRNA;western blot检测证实GP5蛋白在MDCK细胞中得到表达。体外连续传30代检测表明,rCAV-2-GP5具有良好的遗传稳定性。本实验为PRRSV新型疫苗的研制奠定了基础。; 周井祥薛江东刘晔张守峰朱霞扈荣良; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5蛋白犬2型腺病毒重组病毒

锦鲤疱疹病毒病的诊断病例: 2012年; 锦鲤疱疹病毒病（koi herpesvirus disease，KHVD）是由锦鲤疱疹病毒（koi herpesvirus，KHV）感染锦鲤、鲤及其普通变种如框镜鲤等而导致的一种具有高度传染性和致死性的疾病。该病多发生在水温为18℃～28℃的春秋季节，具有高度传染性，发病率和死亡率均可高达80％～100％。; 李新伟周井祥朱霞王好; 关键词：疱疹病毒病锦鲤病例春秋季节传染性

锦鲤疱疹病毒-CJ株ORF81基因的克隆及生物信息学分析被引量：15: 2011年; 为了解锦鲤疱疹病毒中国吉林株(KHV-CJ)ORF81蛋白的结构特征和进化关系,用框镜鲤尾鳍原代细胞增殖KHV-CJ,提取其DNA,经PCR扩增,获得ORF81基因,将其克隆到pMD18-T载体中,构建重组质粒。应用生物信息学方法初步分析KHV-CJ ORF81基因的结构和功能,并与GenBank上已公布的3株KHV构建系统进化树。结果显示,获得了长771 bp的ORF81基因,编码256个氨基酸;预测ORF81基因的理论分子量为28 246.50 u,等电点为8.404;疏水性大于亲水性;信号肽切割部位最可能位于29位的S(丝氨酸);有4个跨膜区;抗原表位预测显示抗原性良好;结构预测显示,不存在N-糖基化位点、存在6个O-糖基化位点和11个磷酸化位点;系统进化树分析显示,与锦鲤疱疹病毒以色列株属同一分支。; 周井祥李新伟王好吕文亮朱霞; 关键词：锦鲤疱疹病毒克隆测序生物信息学分析

一种锦鲤疱疹病毒核酸疫苗: 本发明公开了一种锦鲤疱疹病毒核酸疫苗，该疫苗具有较好的免疫原性。本发明所提供的锦鲤疱疹病毒病核酸疫苗，是将ORF81基因克隆到真核表达载体pIRES-neo中得到的重组质粒。本发明所提供的锦鲤疱疹病毒核酸疫苗对于鲤鱼疱疹...; 周井祥王好李新伟张东鸣朱霞祖岫杰; 文献传递

锦鲤疱疹病毒CJ株ORF83基因的克隆及生物信息学分析被引量：2: 2011年; 为了解锦鲤疱疹病毒中国吉林株(KHV-CJ)ORF83蛋白的结构特征和进化关系,用框镜鲤尾鳍原代细胞增殖KHV-CJ,提取其DNA,经PCR扩增,获得ORF83基因,将其克隆到pMD18-T载体中,构建重组质粒。应用生物信息学方法初步分析KHV-CJ ORF83基因的结构和功能,并与GenBank上已公布的3株KHV构建系统进化树。结果显示,获得了长687 bp的ORF83基因,编码229个氨基酸;编码蛋白的理论分子质量为25 822.18 u,等电点为8.600;疏水性为-2.733～3.100;信号肽切割部位最可能位于第22位的G(甘氨酸)和第23位的V(缬氨酸)之间;跨膜结构分析表明,ORF83有4个跨膜区;抗原表位预测显示,编码蛋白的抗原性良好;结构预测显示,ORF83可能存在1个N-糖基化位点、11个O-糖基化位点和13个磷酸化位点;系统进化树分析显示,KHV-CJ株与锦鲤疱疹病毒美国株和以色列株属同一分支。结果表明,ORF83基因编码的蛋白可能具有较好的免疫原性,能够诱导产生中和抗体。; 李新伟周井祥朱霞王好吕文亮; 关键词：锦鲤疱疹病毒生物信息学分析

网柄菌属9个种形态特征及其基因组大小分析被引量：1: 2019年; 为探究网柄细胞状黏菌的表观形态特征与其遗传信息之间的关系,选择细胞裂解液OTTO及荧光染料碘化丙啶,以酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae为内标,采用流式细胞术对隶属于网柄菌属Dictyostelium的9个种进行基因组大小的测定,并将所获得的9种网柄细胞状黏菌基因组大小的数据分别与其孢堆果大小及孢子团直径的数值进行线性回归分析。结果表明,被测网柄细胞状黏菌基因组大小约为27.23~47.07 Mb,且其基因组大小与孢堆果大小和孢子团直径均呈正相关。; 侯建敢朱霞李玉刘朴; 关键词：C值

鲤鱼上皮瘤细胞和草鱼性腺细胞冻存效果的比较被引量：1: 2010年; 鲤鱼上皮瘤细胞（EPC）及草鱼性腺细胞（CO）可用于鱼类疱疹病毒、草鱼出血病病毒、鲤春病毒血症病毒等常见鱼类病毒的分离培养。探讨EPC及CO细胞的适宜冻存条件,; 朱霞迟源王好周井祥; 关键词：细胞冻存上皮瘤草鱼鲤鱼病毒血症

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朱霞