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HGV RNA转录体感染恒河猴的血清学及组织学改变被引量：3: 2002年; 目的:观察接种HGV实验猴的血清学和组织病理改变,以探讨HGV对恒河猴的致病性。方法:将庚型肝炎病毒(HGV)全长RNA转录体肝内注射感染恒河猴,检测血清HGV RNA、ALT变化和抗HGV,定期取实验猴肝组织,观察肝组织病理改变,免疫组化对HGV E2蛋白的表达进行定位分析,尸检取猴的各种脏器进行常规病理检查,并分析HGV E2蛋白在心、肝、胰、脾和肾脏的表达,PCP检测心、肝、胰、脾和肾脏中HGV正负链RNA的存在,透射电镜分析肝组织超微结构的变化。结果:感染后1wk HGV RNA即阳转,最长持续达27wk,实验恒河猴血清ALT间歇性升高,最高达2106nkat·L^(-1),肝组织学活检呈现轻度炎性病变,尸检结果表明实验猴死于间质性肺炎,除肝组织炎症改变外,其他组织正常,免疫组化显示HGVE2蛋白主要在肝细胞质内表达,在心脏和脾脏亦有不同程度的表达,HGV基因组RNA和负链RNA的检测表明HGV在肝脏以外的其他脏器如心和脾脏中亦有复制,电镜结果表明肝细胞超微结构改变较大,肝窦内发现直径约25nm～30nm的病毒样颗粒呈晶格状排列。结论:HGV RNA转录体有感染性并能形成病毒血症,恒河猴对HGV感染敏感,可作为研究HGV复制及致病性的动物模型。任浩,朱分禄,朱诗应,王路,戚中田,HGV RNA转录体感染恒河猴的血清学及组织学改变,世界华人消化杂志2002;; 任浩朱分禄朱诗应王路戚中田; 关键词：恒河猴血清学组织学改变庚型肝炎病毒病理

HGV RNA基因组感染HepG2细胞的研究被引量：2: 2002年; 　为了观察HGV　RNA基因组在HepG2细胞中的复制和表达并建立HGV感染的细胞模型,体外转录制备HGV RNA基因组,Lipofectamin介导转染HepG2细胞。取HGV RNA阳性培养上清液传代感染HepG2细胞,采用RT-PCR、免疫组化和Western blot等技术检测HGV在HepG2细胞中的复制和表达。HepG2细胞在转染后24h便可在培养上清液中检测到HGV负链RNA,传代感染的细胞及培养上清液中可检测到HGV正、负链RNA。在90d内传代20余次,均能检测到HGV的复制。免疫组化和Western　blot可检测到HGV E2蛋白在感染细胞中的表达。HGV感染细胞经冻存后复苏,仍能检测到 HGV RNA。故 HGV RNA基因组能够在HepG2细胞中复制和表达,此细胞模型有可能用于HGV的复制与感染防治的研究。; 任浩朱分禄戚中田; 关键词：庚型肝炎病毒 HGV HEPG2细胞

庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达: 1999年; 任浩朱分禄朱诗应宋燕斌戚中田; 关键词：庚型肝炎病毒 RT-PCR 昆虫细胞

庚型肝炎病毒NS5非结构蛋白在昆虫细胞中的表达: 2000年; 目的：研制特异的抗ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ抗体诊断试剂。方法：ＰＣＲ扩增ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＮＳ５基因片段并定向克隆至转座载体ｐＦａｓｔＢａｃＨＴａ，转化ＤＨ１０Ｂａｃ感受态细胞，３７℃振荡培养４ｈ使发生转座，于三抗选择平皿筛选重组ｂａｃｍｉｄ。脂质体介导转染ｓｆ９细胞，将转染上清再次感染ｓｆ９细胞，以批量表达ＮＳ５重组蛋白。利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法分析、检测重组蛋白。结果：序列测定证实克隆的基因片段是ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ的ＮＳ５基因片段，且阅读框架正确。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示在相对分子质量４．１５×１０４处有重组蛋白的表达条带，薄层扫描占总蛋白量的１１．７％。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ发现重组蛋白可与ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＲＮＡ阳性患者混合血清发生较强的免疫反应。结论：ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶＮＳ５重组蛋白可以用于ＧＢＶ－Ｃ／ＨＧＶ感染的检测。; 任浩朱分禄朱诗应宋燕斌戚中田; 关键词：庚型肝炎 GBV-C/HGV 基因表达

HCV核心区与NS3区抗原表位分析及融合基因表达被引量：1: 1997年; ＨＣＶ核心区与ＮＳ３区抗原表位分析及融合基因表达逯好英徐东刚朱分禄孟文华孟庆华军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心（Ｃ）区及ＮＳ３区抗原是第二代抗－ＨＣＶ抗体诊断试剂的主要组分。核心蛋白（Ｃ２２）含有１９１个氨基酸，...; 逯好英徐东刚朱分禄孟文华孟庆华; 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白 NS3蛋白抗原

丙型肝炎病毒的变异、分型及意义被引量：2: 1997年; 丙型肝炎病毒为一单股正链ＲＮＡ病毒，基因组高变异且贯穿整个基因组，表现出许多特点。根据变异可将ＨＣＶ分为不同的型及亚型。丙型肝炎病毒的变异、分型对ＨＣＶ的感染预防和丙肝患者的诊断与治疗均有意义。; 朱分禄; 关键词：丙型肝炎病毒

庚型肝炎病毒NS3蛋白在杆状病毒载体中的表达及其抗原性研究被引量：3: 2000年; 目的 :利用 Bac- to- Bac HT杆状病毒系统在 Sf9昆虫细胞中表达庚型肝炎病毒 (HGV) NS3蛋白 ,并对表达产物的免疫原性进行研究。方法 :将 HGV NS3基因片段定向克隆至转座载体 p Fast Bac HTa,转化 DH10 Bac感受态细胞 ,37℃振荡培养 4h使发生转座 ,用抗生素平皿筛选重组 bacmid。脂质体介导转染 Sf9昆虫细胞 ,待细胞形态明显改变后收获细胞和培养上清液 ,将上清液再次感染 Sf9细胞以大量表达 HGV NS3重组蛋白。利用 SDS- PAGE和 Western- blotting方法分析重组蛋白。结果 :SDS- PAGE分析发现表达产物在 Mr43810处有一条明显的蛋白带 ,占细胞总蛋白量的 30 %以上 ;应用 Ni- NTA亲和层析柱获得了纯化的重组蛋白 ;Western- blotting显示该抗原可与 HGV RNA阳性血清发生特异反应。结论 :获得了昆虫细胞内表达的 HGV NS3重组蛋白 ,并证明该蛋白有可能用于 HGV感染的抗体检测。; 朱分禄任浩朱诗应谢南潘卫董辉戚中田; 关键词：免疫原性杆状病毒载体庚型肝炎 NS3蛋白

抗原决定簇预测在HCV NS5区基因表达研究中的应用: 1998年; 目的：利用生物信息技术，对丙型肝炎病毒ＮＳ５区抗原决定簇进行预测分析，获得具有良好抗原的重组蛋白。方法：以Ｇｏｌｄｋｅｙ程序，通过综合亲水参数、可及性参数、柔韧性参数、抗原性参数、氨基酸序列的电荷分布和β折叠等多种指标，对ＨＣＶＮＳ５区抗原决定簇进行预测分析，克隆并表达部分ＮＳ５区基因。结果：发现７个可能性最大的抗原决定簇肽段，在此基础上表达的ＮＳ５区融合蛋白可与丙型肝炎病人血清发生特异性反应。结论：根据Ｇｏｌｄｋｅｙ程序的预测结果。; 徐东刚逯好英朱分禄朱分禄李伍举; 关键词：丙型肝炎病毒表位预测抗原决定簇

庚型肝炎病毒NS3蛋白在昆虫细胞中的表达被引量：3: 2000年; The recombinant GBV-C/HGV NS3 protein was expressed in Sf9 insect cells and analyzed by SDS-PAGE. A protein band about Mr 43810 was demonstrated on polyacrylamide gel electrophoresis and this protein amounted to more than 30% of the total cell proteins. Recombinant NS3 protein was purified by Ni-NTA column. Western blot showed that this recombinant protein could react with GBV-C/HGV RNA positive mixed sera. The recombinant GBV-C/HGV NS3 protein could be used to detect GBV-C/HGV infection and will supply material for study of structure and function of this protein.; 朱分禄任浩朱诗应宋燕斌戚中田; 关键词：GBV-C/HGV NS3蛋白庚型肝炎

庚型肝炎病毒基因组全长cDNA克隆及其构建方法: 本发明涉及生物技术领域，是庚型肝炎病毒基因组全长cDNA的克隆及其构建方法。以覆盖GBV-C/HGV基因组全长cDNA的5个较小的基因片段为起始材料，经过重叠延伸PCR、酶切、连接和转化等，完成GBV-C/HGV基因组全...; 戚中田朱分禄邵力何建文潘卫崔晓红朱诗应宋燕斌; 文献传递

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