曾凡锁
- 作品数：60 被引量：336H指数：11
- 供职机构：东北林业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家林业科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 转基因白桦中GUS基因表达的定量分析被引量：18
- 2009年
- 以转基因白桦(Betula platy phylla)为材料,采用单酶切结合Southern杂交的方法揭示不同转基因植株中GUS基因的整合拷贝数为1-4个。采用组织化学染色法定性分析不同整合方式转基因白桦植株中GUS基因的表达。结果表明,11个转基因植株中有2株出现了GUS基因沉默,其余植株均有不同水平的GUS表达。在此基础上应用分光光度法定量分析不同拷贝数的GUS转基因白桦中β-葡萄糖醛酸酶活性。结果表明,在11个转基因无性系中除2个株系的GUS基因沉默外,其它9个转基因植株中GUS酶活力差异明显,但这种差异与GUS基因的拷贝数没有必然联系。
- 曾凡锁钱晶晶康君王红艳王亦洲詹亚光
- 关键词：基因表达GUS分光光度法转基因白桦
- 白桦BpHMGR基因的结构及表达模式分析
- 2016年
- 目的研究白桦Betula platyphylla 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-Co A reductase,Bp HMGR)全长基因结构特征及编码蛋白性质,揭示其节律表达模式以及对外源NO信号分子的响应机制。方法通过RACE技术克隆白桦Bp HMGR基因,应用生物信息学软件对Bp HMGR及其编码蛋白进行详细分析,利用实时荧光定量PCR定量分析Bp HMGR基因在昼夜节律变化中的表达模式。根据Bp HMGR氨基酸序列构建系统进化树,分析昼夜节律以及外源NO对白桦叶片中Bp HMGR转录水平的影响。结果 Bp HMGR基因全长1 764 bp,包含完整开放阅读框,已上传至NCBI,并获得登录号KJ452334,其编码蛋白由587 aa组成。白桦Bp HMGR基因与大豆(XP_003519474.1)、葡萄(XP_002275827.1)、苜蓿(XP_003617066.1)亲缘关系较近。结论 Bp HMGR随昼夜周期变化呈现出节律表达特性,在夜晚21:00时达到峰值。初步揭示了外源NO能诱导白桦细胞内三萜代谢途径的关键酶Bp HMGR基因上调表达,进而促进三萜产物齐墩果酸的合成。
- 李思达梁楠松周姗詹亚光曾凡锁
- 关键词：白桦生物节律一氧化氮生物信息学分析
- 水曲柳种子园花粉飞散规律研究被引量：1
- 2014年
- [目的]研究影响水曲柳花粉成熟和飞散的关键因素,揭示花粉飞散规律,为水曲柳种子园的设计及升级改造提供依据.[方法]通过对苇河林业局青山林场水曲柳种子园进行初步研究,对水曲柳开花期间花粉在时间和空间分布,水平和垂直分布,及花粉的飞散规律进行观测研究.[结果]园内雄花于5月10日开始散粉,散粉期从5月10～15日,花粉浓度的时间和空间变化以及水平和垂直分布与环境因素有密切关系.花粉浓度的最大值（4 737粒）在9：00～ 15：00.[结论]影响花粉飞散的因素中,环境因子（风速、温度、相对湿度、风向）起主要作用.影响花粉量大小的因素中,温度占主导地位.
- 李想李晓一曾凡锁詹亚光闫朝福
- 关键词：水曲柳环境因子
- 转基因白桦的遗传变异分析被引量：15
- 2005年
- 应用细胞学方法分析了由农杆菌介导法获得的转基因白桦的细胞学变异情况,结果表明转基因白桦的染色体变异频率为78.5％,远远高于非转基因白桦的变异频率(15.3％),且变异以非整倍体占多数。同时用RAPD标记方法研究了转基因白桦在DNA水平的变异情况,结果显示DNA多态性指数为31.67,并与其它转基因植物的变异情况作了比较研究。最后分析、讨论了产生变异的原因:(1)组织培养过程中产生突变;(2)外源基因的整合及重排时宿主基因组的插入位点及相邻基因转录表达的干扰;(3)应用抗生素和除草剂等筛选转基因植株时促进了转基因植株的变异程度。并提出减少转基因植物体细胞克隆变异的建议。
- 詹亚光曾凡锁李彩华
- 关键词：转基因白桦农杆菌染色体
- 硝普钠(SNP)和茉莉酸甲酯(MeJA)诱导的白桦Ty1-copia类逆转座子的克隆及分析被引量：2
- 2013年
- 利用Tvl—copia类逆转座子逆转录酶（RT）的保守区域设计引物，优化了扩增条件后利用RT—PCR从白桦愈伤组织中得到了1条逆转录酶序列。利用硝普钠（SNP）和茉莉酸甲酯（MeJA）诱导后分别扩增克隆了11条和9条逆转录酶序列。这2l条逆转录酶序列（命名Bprtl-21）变化范围为205—290bp，一致性为71．93％，异质性为1．1％。50．9％，翻译成氨基酸的异质性为0～57．1％。经SNP和MeJA处理的样品中，获得的逆转录酶序列基本是分别聚类．初步证明不同的Tvl-copia类逆转座子能够分别响应不同的信号而被转录激活。分析所获得的21逆转录酶序列和苹果中19务逆转录转座子序列（DQ410748-DQ410766）进化关系发现．逆转录酶基本各自聚类。但是Bprt9、Bprtll和OQ4m750进化关系比较接近，Bprt15、Bprt19、DQ410751和DQ410753聚为一类，证明逆转座子存在水平传递。
- 梁楠松曾凡锁李博郭梁詹亚光
- 关键词：白桦逆转录酶转录活性
- 水曲柳miR156a克隆及功能的初步分析被引量：1
- 2022年
- 【目的】水曲柳是木犀科白蜡树属落叶大乔木,为我国东北地区三大珍贵硬阔之一,国家储备林计划重要造林树种。MicroRNAs(miRNAs)是一种单链内源性非编码RNA,水曲柳miR156的克隆及功能的初步分析,为水曲柳miRNAs的系统研究奠定基础。【方法】对水曲柳miR156家族进行分析,克隆水曲柳miR156的初级转录本,构建了pROKⅡ-FmmiR156-GFP过表达载体,并对水曲柳下胚轴进行了遗传转化。【结果】生物信息学分析表明,水曲柳miR156前体序列与拟南芥和杨树亲缘性较远。在水曲柳中有4条miR156前体序列,并且均构成一条成熟序列。克隆水曲柳miR156初级转录本序列,构建过表达载体,以水曲柳下胚轴为外植体进行遗传转化,与FmSPL2-OE相比FmmiR156-OE出芽较多。预测水曲柳miR156靶向14条FmSPLs基因,转录表达分析结果证实了FmSPL2、FmSPL9和FmSPL13是miR156的下游靶基因,并被miR156下调表达。检测出芽相关基因(WUS)表达量,明确FmmiR156可以上调WUS基因的表达。【结论】首次克隆得到了水曲柳miR156的初级转录本序列,明确miR156可以靶向并负调控FmSPLs基因,还可以促进水曲柳下胚芽的再生,该结果的获得对水曲柳miRNA功能的进一步研究具有一定的参考价值。
- 何碧莹孙思语朱岩高尚珠詹亚光曾凡锁
- 关键词：水曲柳
- 水曲柳节律基因LHY启动子的克隆和功能分析被引量：4
- 2014年
- 以水曲柳基因组DNA为模板,用Site Finding-PCR法扩增得到节律基因LHY(late elongated hypocotyl)启动子序列,长度为1 360 bp。PLACE启动子预测工具分析表明,序列中含有转录必备的TATA box、CAAT box以及一些非生物胁迫和激素响应元件等。构建植物GFP瞬时表达载体p PXGFP-P-LHY,农杆菌介导转化烟草叶片和白桦悬浮细胞,GFP检测结果表明,LHY启动子能够启动GFP基因在烟草和白桦细胞中表达,且对非生物胁迫(低温、高温、盐)产生响应;构建植物GUS报告基因整合表达载体p PCXGUS-P-LHY,农杆菌介导法瞬时转化烟草,GUS染色结果表明,LHY启动子的活性具有不同程度的时空特性。
- 王璇曾凡锁詹亚光何之龙
- 关键词：LHY启动子克隆
- 大庆盐碱地绿化树种的引进及适应性分析被引量：9
- 2013年
- [目的]研究了大庆地区盐碱地绿化树种的引进及适应性.[方法]该研究选择了30个绿化树种在大庆地区进行了引种试验,并于2005 ～ 2012年进行跟踪调查.[结果]稠李、刺玫、连翘、锥花绣球等绿化树种对于大庆地区的生态适应性较差,不能作为大庆地区的抗旱耐盐的绿化树种引进.卫茅、树锦鸡、糖槭、白榆、绒毛白蜡、枸杞、榆叶梅、银中杨等绿化树种移栽成活后能够适应当地的气候及土壤条件,并能正常生长发育,可以初步确定为大庆地区的绿化树种候选树种.在重度盐碱地进一步试验,卫茅、白榆、榆叶梅和枸杞在栽植2年后的生长状况良好,可作为大庆地区重度盐碱地的耐盐绿化树种.栽植于重度盐碱地中的部分树种,如四季丁香、树锦鸡、八宝玫瑰、紫丁香出现了负增长,主要是由于这些树种在移栽成活后不能适应当地环境,大部分苗木出现了主枝死亡后从根部萌发新枝的现象,也说明了这些树种不适于栽植在重度盐碱地的环境中.[结论]通过对大庆地区抗旱、耐盐绿化品种引进技术指标和良种进行评定,引进的绿化树种中属于第Ⅰ类型——引种成功的抗旱耐盐的绿化树种有6种,属于第Ⅱ类型——较抗旱耐盐的绿化树种有11种,属于第Ⅲ类型——较难成功的绿化树种有13种.
- 何之龙曾凡锁詹亚光
- 关键词：盐碱地绿化树种引种适应性
- 富含多糖和次生代谢产物的白桦成熟叶中总RNA的提取被引量：31
- 2007年
- 分别采用CTAB法、SDS法、异硫氰酸胍法和缓冲液冰浴-CTAB法从转基因白桦成熟叶中提取总RNA,并对琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱分析进行比较。结果表明,缓冲液冰浴-CTAB法提取的总RNA纯度高、完整性好且得率高.应用此法提取的总RNA能够满足RT-PCR和Northern杂交分析要求。
- 曾凡锁南楠詹亚光
- 关键词：白桦RNA提取
- 黑龙江省东部山地白桦人工林对水质的影响被引量：1
- 2013年
- 对黑龙江省东部山地白桦人工林生态系统的大气降水、穿透水、树干茎流和地表径流中的pH值、溶解氧、浊度、总溶解固体、电导率、氧化还原电位、K、Na、Ca、Mg、Cu、Zn、Mn和Fe等水质指标进行了测定。结果表明:大气降水经过白桦人工林生态系统后,浊度和总溶解固体值逐渐升高。穿透水除Ca元素外,其他化学元素含量均有不同程度的增加,化学元素含量排序为:K>Ca>Na>Mg>Mn>Fe>Zn>Cu。树干茎流中各化学元素含量排序为:K>Ca>Mg>Na>Fe>Mn>Zn>Cu。地表径流中各化学元素含量为:K>Ca>Na>Mg>Fe>Mn>Zn>Cu。除Na、Ca元素外,大气降水中其他元素的变异系数均较大。穿透水和树干茎流中Cu元素的变异系数大于其他元素,地表径流中Zn元素的变异系数最大。根据淋溶系数的大小排列,穿透水中各化学元素的淋溶序列是:Mn>K>Mg>Fe>Cu>Zn>Na>Ca。树干茎流中各化学元素的淋溶序列是:K>Mn>Mg>Fe>Cu>Zn>Ca>Na。经过淋洗后,穿透水和树干茎流中K和Mg元素增加较多,Ca元素出现负淋溶。
- 辛颖赵雨森曾凡锁王春娜
- 关键词：水质树干茎流地表径流
