曹维克
- 作品数:49 被引量:186H指数:8
- 供职机构:淮安市第一人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金江苏省淮安市科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生金属学及工艺农业科学更多>>
- 塞来昔布联合三氧化二砷对慢性粒细胞白血病原代细胞bcr—abl蛋白及信号转导的影响被引量:5
- 2011年
- 目的探讨塞来昔布联合三氧化二砷(As2O3)对慢性粒细胞白血病(CML)原代细胞bcr-abl融合基因mRNA表达、bcr-abl蛋白即p210蛋白表达、蛋白质酪氨激酶(PTK)活性以及对下游增殖信号转导途径的影响。方法用塞来昔布(40μmol/L)、As2O3(2μmol/L)单独以及二者联合干预CML患者骨髓单个核细胞36h,进行实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RQ-RT-PCR)、Western印迹和PTK活性检测,分析bcr—abl融合基因mRNA的表达、p210蛋白表达以及PTK活性的变化,以Western印迹检测STATl、STAT5、磷酸化STAT1(P-STAT1)、磷酸化STAT5(p-STAT5)以及IDl的表达变化。结果RQ-RT-PCR结果显示,对照组、塞来昔布组、As2O3组和塞来昔布联合As2O3组的mRNA水平分别为(5.97±0.53)%、(5.74±0.46)%、(5.94±O.57)%和(3.06±0.41)%,仅塞来昔布联合As203组与对照组的比较差异有统计学意义(t=28.35,P=0.00)。p210蛋白表达量化分析显示,塞来昔布与Asn均可下调p210蛋白,而塞来昔布联合As20。则显著下调p210蛋白。PTK活性检测显示,对照组、塞来昔布组、As203组和塞来昔布联合As203组吸光度(A450)值分别为1|17±0.11、1.14±0.19、1.16±0.21和0.83±0.15,塞来昔布联合As2O3组与对照组比较差异有统计学意义(t=4.38,P=0.04)。Western印迹检测显示,塞来昔布联合As2O3可更显著下调STATl、STAT5、p-STATl、P—STATS和IDI蛋白表达。结论塞来昔布联合As,0,对下调CML原代细胞bcr-ablmRNA和蛋白表达、抑制PTK活性、抑制STAT及IDl信号转导通路具有协同作用。
- 刘定胜李玉峰李敏曹维克朱家斌何正梅
- 关键词:白血病塞来昔布三氧化二砷
- 靶向SMC1A基因慢病毒介导的RNA干扰对奥沙利铂治疗敏感性的影响被引量:1
- 2012年
- 目的探讨沉默结直肠癌细胞株染色体结构维持-1A(SMC1A)基因对奥沙利铂(L-OHP)敏感性的影响。方法构建SMC1A基因的小分子RNA干扰表达质粒。与慢病毒包装质粒一起转染239T细胞制备pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA慢病毒载体,并将重组质粒转染结直肠癌SW480、HT-29细胞株。RT-PCR、Western blotting法检测SMC1A mRNA和蛋白的表达情况。CCK-8法检测不同浓度L-OHP对细胞的抑制作用。结果 pGCSIL-GFP/SMC1A-siRNA慢病毒载体构建成功,RT-PCR产物为343bp。RT-PCR显示重组质粒转染的SW480、HT-29细胞SMC1A mRNA表达量明显低于其对应的未转染细胞(0.13±0.02 vs.1.02±0.06,0.182±0.019 vs.1.114±0.032;P<0.05);Western blotting显示干扰后的细胞SMC1A蛋白表达受到明显抑制;不同浓度的L-OHP处理细胞48h后,CCK-8显示转染SMC1A-siRNA细胞生长抑制率较未转染细胞高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论沉默结直肠癌细胞株SMC1A基因对奥沙利铂的敏感性显著增加,为临床进一步提高结直肠癌的疗效提供了研究基础。
- 冯婉婷喻晓娟李进史玉叶曹维克邓之奎何敬东
- 关键词:RNA干扰慢病毒奥沙利铂
- 毛细胞白血病4例及其相关实验室诊断分析被引量:3
- 2013年
- 目的:探讨毛细胞白血病(HCL)特征性诊断及鉴别诊断方法。方法:对4例HCL患者的临床特征及骨髓病理、组织细胞化学、白血病免疫分型、电镜等实验室检查结果进行分析。结果与结论:骨髓病理、组织细胞化学、白血病免疫分型、电镜在HCL的诊断中具有重要意义,HCL的鉴别诊断须结合患者临床特征及实验室检查。
- 李元媛邓之奎曹维克刘小宁宣恒报于亮
- 关键词:毛细胞白血病
- 实时定量PCR检测骨髓间质干细胞及肿瘤细胞BMI-1基因被引量:3
- 2005年
- 目的 建立BMI- 1基因(theBcell specificsmoloneymurineLeukemiaVirusintegrationsite 1)表达的实时荧光定量PCR,利用该方法在基因转录水平上研究BMI- 1在间质干细胞 (MSCs)及肿瘤细胞中的表达水平。方法 通过RT- PCR,T- A克隆,real timePCR等方法精确测定并比较BMI 1基因在胚胎MSCs、成人MSCs、A549(人肺腺癌细胞株)、SW 480(人结肠腺癌细胞株)、U937(人髓系白血病细胞株)、健康人外周血淋巴细胞以及白血病细胞中表达水平。结果 测定绘制BMI 1基因的标准曲线(相关系数r=0. 998),胚胎MSCs中BMI- 1的表达水平高于成人MSCs,慢性粒细胞白血病(CML)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)中BMI- 1的表达量分别高于急性粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病,U937和A549中的表达量高于SW 480,健康人外周血淋巴细胞中BMI 1的表达明显低于慢性髓系白血病(P<0. 01)。结论 定量测定BMI -1的real- timePCR方法较稳定、准确。BMI- 1基因可以作为某些肿瘤特别是白血病治疗的靶点,其表达水平可作为判断肿瘤恶性程度的参考指标。
- 姜润秋许文荣朱伟钱晖曹维克韩崇旭毛飞严永敏
- 关键词:BMI基因实时定量PCR骨髓间质干细胞人外周血淋巴细胞
- 肝功能异常患者血清自身抗体检测对诊断自身免疫性肝病的意义被引量:21
- 2012年
- 目的:探讨89例肝功能异常患者血清中抗核抗体(ANA)、平滑肌抗体(SMA)、抗肝肾微粒体1型抗体(LKM-1)、抗肝溶质抗原1型抗体(LC-1)、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体(SLA/LP)、抗线粒体亚型-丙酮酸脱氢酶复合物(AMA-M2)对自身免疫性肝病诊断的意义。方法:收集不明原因肝功能异常患者41例、各种病毒性肝炎患者48例及健康体检者30例(对照组)的血清标本,对所有对象均采用间接免疫荧光法检测ANA、SMA和免疫印迹法检测LKM-1、LC-1、SLA/LP、AMA-M2等6项指标。结果:各组肝病标本的自身抗体检出总阳性率分别为AIH86.7%、PBC90.9%、HAV25.0%、HBV20.0%、HCV25.0%、HEV12.5%,对照组为3.3%;自身免疫性肝炎组与各组间差异有显著性统计学意义(P<0.05);自身免疫性肝炎患者伴有不同程度肝脏损伤,ALT、AST升高明显。结论:肝功能持续异常的肝病患者适合进行肝病相关自身抗体的检测,对不明原因肝炎的病因探寻,自身免疫性肝病的早期诊断,分型及治疗都具有非常重要的意义。
- 翁厚光曹维克张迎梅吴尚农
- 关键词:肝炎自身抗体自身免疫性
- 乳腺癌患者血清CA15-3、IL-6、TNF测定的意义被引量:2
- 2005年
- 韦光龙曹维克李龙
- 关键词:乳腺癌CAL5-3白细胞介素6肿瘤坏死因子
- 高危HPV病毒第2代杂交捕获法检测应用于宫颈癌以及癌前病变检查被引量:14
- 2011年
- 目的:探讨高危人类乳头瘤病毒(HPV)第二代杂交捕获实验(hc2)检测应用于宫颈癌以及癌前病变检查中的临床价值。方法:用hc2检测其子宫颈脱落细胞,以病理诊断作为金标准对检测结果进行分析和评价,对其特异度、敏感度、准确性、预测值等检测并分析。结果:hc2法检测高危型HPV的感染状况为无明确意义的非典型细胞的改变(ASCUS)44.7%,不典型鳞状细胞不除外高度病变(ASCUS-H)7.8%,低度鳞状上皮内病变(LSIL)19.7%,高级别鳞状上皮内病变(HSIL)28.7%,诊断宫颈高度病变(≥CINⅡ)的各项值分别为66.7%,93.4%,60.0%,95.0%,其中在高病毒负荷量中,只有宫颈癌与宫颈CINⅠ之间的差异显著,P<0.01,CIN各组以及宫颈癌组与无上皮内病变(NILM)组比较有显著性差异,P<0.01,而CIN各组以及宫颈癌组间比较无显著性差异,P>0.05。结论:hc2高危型HPV病毒检测仍是目前宫颈癌及癌前病变筛查较好的方法,宫颈癌hc-2法检测HR-HPV病毒载量与CIN以及宫颈癌发生有关,但与宫颈病变的严重程度无关。
- 张玉梅曹维克
- 关键词:HPV病毒宫颈癌癌前病变
- 中国食管癌高发区无症状人群液体活检技术筛查早期食管癌和高危人群的多中心应用研究被引量:2
- 2020年
- 目的探讨液体活检技术在筛查早期食管癌和高危人群中的应用价值。方法利用间接酶联免疫吸附试验对早期食管癌组和对照组进行5种血清肿瘤相关抗原自身抗体[乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、人端粒酶逆转录酶(hTERT)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(BAX)、血管内皮生长因子(VEGF)和多药耐药相关蛋白(MRP)]检测,并比较其表达差异。在食管癌高发区对无症状人群进行液体活检技术检测和色素内镜检查,比较2种方法检测结果。采用液体活检技术在食管癌高发区行大规模无症状人群筛查,并对阳性者行色素内镜检查,确认食管癌检出情况。结果5种肿瘤相关抗原自身抗体组合联合检测的敏感性86.94%,特异性82.45%。对豫北食管癌高发区某镇流行病学调查纳入食管癌筛查的无症状人群1755例进行液体活检,与色素内镜检查结果比对后发现,阳性者癌前病变和早期食管癌检出分别为62例(26.27%)、32例(13.73%),均高于阴性者的40例(2.63%)、15例(0.99%),差异均有统计学意义(χ^2=208.493,P<0.001;χ^2=123.868,P<0.001)。对湖北钟祥、新疆乌鲁木齐、江苏南京流行病学调查,纳入的无症状人群6325例进行液体活检,结果发现阳性(高危)人群1018例,然后进行色素内镜检查,结果发现正常567例(8.96%)、癌前病变286例(4.52%)、食管癌[149例(2.36%),其中早期食管癌130例(2.06%)、晚期食管癌19例(0.30%)]、其他上消化道肿瘤16例(0.25%)。结论BCRP、hTERT、BAX、VEGF和MRP组合的液体活检技术是早期食管癌和高危人群筛查的有效方法,显著减少了色素内镜检查对象,降低了筛查成本,具有明显的人群推广应用价值。
- 孟超龙赵学科崔晓宾程锟胡守佳王盼盼钟侃胡景峰宋昕王伟李欣然杨苗苗徐瑞华魏梦霞韩文莉雷玲玲姚品芳熊飞伊力亚尔·夏合丁李锋曹维克王立东
- 关键词:食管癌自身抗体高危人群
- 白细胞去除术在高白细胞白血病治疗中的应用被引量:1
- 2012年
- 目的:探讨白细胞去除术在高白细胞白血病治疗中的意义。方法:应用MCS+血细胞分离机对28例高白细胞白血病患者进行白细胞去除术治疗。结果:行白细胞去除术后,28例高白细胞白血病患者白细胞数下降有统计学意义(与治疗前相比P<0.001)。结论:利用血细胞分离机进行治疗性白细胞去除术,能快速减低患者白血病细胞负荷,缓解症状,且该项技术安全、可靠、不良反应小。
- 李元媛曹维克陈凤丽
- 关键词:血细胞分离机白细胞去除术白血病
- 大蒜素抗人结肠癌LoVo细胞侵袭转移作用及其机制被引量:13
- 2009年
- 目的探讨大蒜素对结肠癌LoVo细胞增殖、侵袭和转移能力的影响,及其抗结肠癌侵袭转移作用的机制。方法采用MTT法检测大蒜素对LoVo细胞增殖抑制能力;肿瘤细胞体外运动实验、黏附实验、迁移实验和Transwell体外侵袭实验检测大蒜素对LoVo细胞运动、黏附、侵袭转移的抑制作用;实时荧光定量RT.PCR法检测大蒜素对LoVo细胞侵袭转移相关基因基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)、CDl47、血管内皮生长因子(VEGF)、转移抑制基因(nm23-H1)、乙酰肝素酶(HPA)、尿激酶纤维蛋白溶酶原激活剂受体(uPAR)mRNA表达的影响。结果大蒜素可明显抑制人结肠癌LoVo细胞增殖,具有时问剂量依赖性;“无毒”浓度(3和6μg/m1)大蒜素能够抑制LoVo细胞的体外运动、黏附、侵袭转移能力,作用24h后对LoVo细胞趋化运动抑制率分别为24%、50%(t=4.543、12.348,P=0.010、0.001),黏附抑制率分别为19%、28%(t=6.145、6.355,P=0.004、0.003),迁徙抑制率分别为28%、46%(t=8.065、28.435,均P〈0.01),侵袭抑制率分别为44%、65%(t=21.274、26.288,均P〈0.01);3和6μg/ml浓度大蒜素能够下调VEGF、uPAR及HPAmRNA的表达(t=7.129、6.764、8.497,P=0.002、0.002、0.001),对TIMP-2,CD147,nm23-H1mRNA表达无明显影响(t=0.341、1.889、0.914,P=0.059、0.132、0.412);LoVo细胞不表达MMP-2mRNA。结论“无毒”浓度(3和6μg/ml)大蒜素对LoVo细胞的迁移运动、黏附、侵袭转移能力有明显抑制作用,该作用可能与抑制VEGF、uPAR及HPAmRNA的表达有关。
- 高勇刘扬清曹维克陈小飞万一元衡春徐丽娟
- 关键词:结肠肿瘤大蒜细胞增殖细胞黏附肿瘤转移