徐廷川
- 作品数:9 被引量:25H指数:2
- 供职机构:华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目国家现代产业技术体系建设项目国家自然科学基金更多>>
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- 猪圆环病毒2型CC株ORF3基因的克隆与原核表达被引量:1
- 2012年
- 为原核表达猪圆环病毒2型(PCV2)的ORF3编码蛋白,本研究采用PCR方法以PCV2的CC株的基因组DNA为模板扩增ORF3基因,将其克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达。SDS-PAGE结果显示,表达的重组蛋白约为31 ku,并且以包涵体形式存在;western blot分析表明,ORF3重组蛋白能够与鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性反应,表明原核表达的ORF3重组蛋白具有良好的反应原性。
- 徐廷川张亮权张得玉齐海涛张民泽张桂红
- 关键词:猪圆环病毒2型ORF3原核表达
- 广东省猪圆环病毒2型全基因组序列的比较和分析
- 2011年
- 参考GenBank发表的猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)全基因组序列,设计引物,通过PCR技术,从广东地区疑似"高热病"病猪的组织中,扩增17株PCV2流行株的全基因,并进行了序列测定分析.结果表明,17个PCV2分离株基因组全长为1 767或1 768 bp.相似性比较发现,17个分离株之间的核苷酸相似性为96.7%-99.8%,与GenBank上已发表的国外分离株比较,相似性为95.6%-99.8%;17个分离株ORF2、ORF3的核苷酸相似性分别为89.5%-100%和97.5%-100%;系统发育树显示,17个毒株有2株属于a亚群,10株属于b亚群,5株属于d亚群.
- 于俊勇徐廷川张得玉罗玉钧何逸民张桂红
- 关键词:猪圆环病毒2型基因克隆
- 猪圆环病毒2型CC株ORF3基因序列分析及真核表达
- 2012年
- 根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV2)的核酸序列,设计了1对引物,采用PCR方法从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的死亡仔猪病料中扩增出了ORF3基因,将其克隆到高效真核表达载体pEGFP-N2中,筛选出含有ORF3基因的重组质粒,命名为pEGFP-N2-ORF3。对此重组质粒进行测序分析,结果表明,克隆的ORF3基因与其他PCV2的ORF3核苷酸序列相似性为96.2%-99.0%,氨基酸序列同源性为90.5%~98.1%。将重组质粒纯化后转染COS-7细胞,用PCR方法扩增出了特征性的基因片段,并采用特异性单抗进行间接免疫荧光,结果转染pEGFP-N2-ORF3重组蛋白在细胞核和细胞浆中均有表达,尤其在细胞核中表达量较高,且对细胞有一定的毒性。本研究为进一步探讨ORF3的结构和功能提供理论依据。
- 黄文明徐廷川张亮权张得玉张民泽张桂红
- 关键词:圆环病毒2型ORF3真核表达
- 猪源戊型肝炎病毒ORF2部分基因的原核表达及其鉴定被引量:2
- 2012年
- 本试验旨在表达猪源戊型肝炎病毒(sHEV)ORF2部分基因片段,纯化表达产物并进行抗原性分析。以sHEV的cDNA为模板,PCR扩增ORF2基因片段,构建重组质粒pET32a-dORF2,转化表达菌BL21,IPTG诱导,SDS-PAGE凝胶电泳和Western blotting进行检测。试验结果表明,获得60ku的目的蛋白,该蛋白具有良好的抗原性,主要以可溶性形式存在。
- 欧阳昀张亮权刘志刚齐海涛徐廷川张民泽张超逸张桂红
- 关键词:戊型肝炎病毒ORF2基因重组质粒原核表达
- 广东地区猪圆环病毒2型与猪输血传播病毒混合感染的检测
- 为了更好的了解和控制PMWS.本文对广东地区猪群中PCV2与TTV混合感染的情况进行了调查,丰富了广东地区猪群中疫病的流行病学资料,阐明了PCV2遗传变异特征,为进一步研究PCV2的防控及遗传衍化奠定了基础。研究结果表明...
- 徐廷川赵付荣张桂红
- 关键词:猪圆环病毒免疫检测
- 鸭肝炎病毒A、H株的分离鉴定与全基因组序列分析
- 为了给研究鸭肝炎病毒(DHV)分子水平的致病机理奠定基础,进一步丰富DHV的遗传变异和进化信息。采用RT-PCR方法分段克隆获得DHAV-1 A、H株的全基因组序列并进行序列分析。结果显示,647 nt(不含poly(A...
- 魏春娅黄震黄昌力徐廷川张桂红
- 关键词:鸭肝炎病毒全基因组
- 广东省猪圆环病毒2型感染的血清学调查被引量:8
- 2011年
- 为了解广东省猪群中猪圆环病毒2型(PCV-2)的感染情况,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对广东部分地区的764份不同年龄段的猪血清进行PCV-2抗体检测,对PCV-2与猪猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)混合感染情况做了进一步调查。结果表明,PCV-2抗体检测平均阳性率为61.91%(473/764),其中断奶仔猪抗体阳性率为59.52%(322/541),后备母猪抗体阳性率为64.81%(35/54),经产母猪抗体阳性率为67.29%(72/l07),公猪抗体阳性率为70.97%(22/31);与PRV混合感染的阳性率为14.71%(35/238),与PRRSV混合感染阳性率为47.48%(113/238),三者混合感染的阳性率为8.82%(21/238)。调查表明,PCV-2感染在广东地区猪群中普遍存在。
- 徐廷川王衡张得玉张桂红
- 关键词:猪圆环病毒2型抗体检测流行病学调查
- 2007-2011年广东省猪圆环病毒2型分离株的遗传变异分析被引量:13
- 2012年
- 为了解广东省2007-2011年猪圆环病毒2型(PCV2)流行毒株的遗传变异情况,采用PCR方法对本实验室分离到的49株PCV2分离株进行全基因组克隆和序列分析。所分离的毒株全长分别为2株1 766bp、45株1 767bp、2株1 768bp。通过序列比对进行遗传变异分析,无论是这49株病毒间还是与GenBank中的8株PCV2基因组间的核苷酸同源性均为93.2%~99.9%;在遗传演化关系上,49株分离株分布于2个大群,分别为PCV2b和PCV2d分支。提示目前疫苗毒株不处于广东地区PCV2流行毒株分支中,应该引起高度的重视。
- 徐廷川张亮权王衡粟硕张桂红
- 关键词:猪圆环病毒2型流行毒株
- 2株鸭甲肝病毒的分离及其全基因组序列分析被引量:2
- 2012年
- 为深入研究鸭甲肝病毒(DHAV),本研究通过RT-PCR方法和血清中和法分离鉴定得到两株DHAV(命名为A株和H株)。采用RT-PCR方法分段克隆这两个分离株的全基因组序列。分析结果显示,A株的基因组全长为7 647 nt(不含polyA序列),5'和3'非编码区长度分别为583 nt和314 nt,单一ORF为6 759 nt,编码2 253个氨基酸;H株的基因组全长为7 648 nt(不含polyA序列),5'和3'非编码区长度分别为482 nt和314 nt,单一开ORF为6 852 nt,编码2 284个氨基酸。A和H分离株与DHAV-1参考株比较,其核苷酸同源性分别为93.4%~97%和92.7%~95.8%。遗传进化分析表明,DHAV-1型主要分为两个亚群,这两个病毒分离株分别属于不同的亚群。
- 魏春娅黄震黄昌力徐廷川张桂红
- 关键词:基因组