徐娴
- 作品数：30 被引量：49H指数：4
- 供职机构：南京工业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程理学更多>>
- 一种核苷酸序列及其在提高菌株耐酸性中的应用
- 本发明公开了一种核苷酸序列，该核苷酸为全局转录调控因子的基因序列，本发明还公开了该核苷酸序列在提高菌株耐酸性中的应用。
- 黄和高茜江凌徐晴徐娴李霜
- 文献传递
- 番茄红素基因工程菌多酶调控研究进展被引量：1
- 2017年
- 作为类异戊二烯化合物中四萜的代表性产品番茄红素,在生物体中是典型的多酶参与催化的反应产物,在2-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸盐(MEP)和甲羟戊酸(MVA)合成途径中起着至关重要的作用。从番茄红素在原核和真核中的多酶合成途径出发,针对番茄红素合成途径的各种优化策略,首先介绍了多酶合成中的常规调控方法,包括多基因共表达质粒构建、基因顺序调控、启动子与核糖体结合位点调控及基因敲除和替换等方法。之后介绍了一些新型的多酶调控方法,包括多片段组装技术、人工支架自组装方法等。最后重点介绍了这些多酶调控方法在番茄红素合成中的应用。这些多酶合成调控方法为构建高产番茄红素菌株提供了极大的启发和研究基础。
- 徐加莉左思仪谢承佳江凌李霜黄和徐娴
- 关键词：番茄红素基因工程
- 一种利用全细胞催化合成海藻糖的方法
- 本发明涉及一种利用全细胞催化合成海藻糖的方法。发酵培养能大量生产海藻糖合酶的重组大肠杆菌细胞，通过使用生物表面活性剂对重组细胞进行通透性处理，经处理的细胞以麦芽糖为底物子啊磷酸盐缓冲体系中合成海藻糖。经透性化处理的大肠杆...
- 黄和江凌崔怀言唐飞李霜徐娴
- 文献传递
- 枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的克隆及高效表达被引量：13
- 2007年
- 扩增了枯草芽孢杆菌中的葡萄糖脱氢酶基因(gdh),构建了诱导型表达载体pET-gdh,导入E.coliBL21(DE3)后获得了高效表达葡萄糖脱氢酶基因的重组菌BL21/pET-gdh。经过诱导时间、诱导温度参数的优化,IPTG诱导后重组菌BL21/pET-gdh的葡萄糖脱氢酶比酶活高达9.65 U/mg蛋白,SDS-PAGE电泳分析表明,重组蛋白质表达量占全菌胞内可溶性蛋白的53%,实现了葡萄糖脱氢酶基因的高效表达,为氧化还原酶催化系统提供高效率的NADP+与NADPH循环奠定了基础。
- 徐娴谢承佳何冰芳
- 关键词：葡萄糖脱氢酶辅酶再生
- 采用可视化方法通透性处理大肠杆菌细胞生产海藻糖合成酶被引量：3
- 2014年
- 采用一种新的工业过程操作优化方法——可视化优化方法,对利用生物表面活性剂硫酸粘杆菌素通透性处理重组大肠杆菌BL21生产海藻糖合成酶的工艺条件进行优化。结果表明:以1.40 g/L的硫酸粘杆菌素为渗透剂,35℃渗透处理72 min,即得透性化细胞海藻糖合酶,酶活是传统超声破碎法制得的2.09倍。所得透性化细胞间歇反应时,以30%麦芽糖为底物进行海藻糖转化实验,转化率可达70%,重复使用16批(12 h/批),转化率可保持在65%以上。
- 崔怀言江凌张文婧唐飞徐娴李霜黄和
- 关键词：海藻糖合成酶硫酸粘杆菌素
- 甲酸脱氢酶基因在大肠杆菌Rosetta中的高效表达被引量：14
- 2007年
- 甲酸脱氢酶是氧化还原酶辅酶NAD(P)^+和NAD(P)H再生循环体系中的关键酶。实验中,用PCR方法扩增了假丝酵母Candida boidinii中甲酸脱氢酶基因(fdh),分别构建了诱导型表达载体pUC-dh和pET- fdh,以E.coli Rosetta为表达宿主,获得了能够高效表达甲酸脱氢酶的重组菌。经诱导后重组菌Rosetta/pET- fdh的FDH比酶活为0.399U/mg(蛋白),Rosetta/pUC-fdh的FDH比酶活为0.163U/mg(蛋白)。经SDS- PAGE分析,Rosetta/pET-fdh和Rosetta/pUC-fdh表达的FDH蛋白分别占菌体可溶性总蛋白的17%和10%,实现了fdh基因在Rosetta中的高效表达。研究中所构建的重组菌为氧化还原反应中的辅酶再生奠定了良好的基础。
- 徐娴贾红华何冰芳韦萍
- 关键词：辅酶再生甲酸脱氢酶
- 一种耐重金属汞的真菌菌株及其应用
- 本发明公开了一株出芽短梗霉菌菌株<I>Aureobasidium pullulans </I>F134M，该菌株经分离、筛选、鉴定、诱变获得，已保藏于广东省微生物菌种保藏中心保藏，保藏编号为：GDMCC No：60070...
- 黄和唐苏苏江凌俞亚东徐晴徐娴
- 酶催化反应生产过氧乙酸的方法
- 本发明公开了一种酶法生产过氧乙酸的方法，本方法以短链乙酸酯和过氧化氢为底物，由乙酰木聚糖酯酶过水解催化反应生成过氧乙酸。
- 李霜陶惟一黄和徐娴江凌
- 文献传递
- 灰产色链霉菌海藻糖合成酶的自诱导表达及两阶段温度控制发酵的优化被引量：4
- 2015年
- 克隆灰产色链霉菌海藻糖合成酶基因(tres),导入大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并对重组菌自诱导发酵条件进行优化。采用简并PCR的方法扩增灰产色链霉菌海藻糖合成酶基因(tres),将tres基因和表达载体p ET28a连接,构建重组质粒p ET28a-tres,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,筛选重组子进行自诱导表达。利用HPLC法测定酶活研究温度对自诱导发酵海藻糖合成酶催化酶活的影响。该研究成功构建了重组大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌自诱导表达最优发酵条件:采用两阶段温度控制,37℃培养2.5 h,25℃继续培养14 h,并添加3%乙醇,酶活达到1.29×104U/m L,与传统IPTG恒温培养方式相比酶活提高了55.25%,海藻糖得率达71%。
- 杨鑫吴茜崔怀言徐娴朱丽英江凌
- 关键词：海藻糖合成酶
- 酶法再生辅酶NAD(P)H循环体系的构建及其应用初步研究
- 氧化还原酶广泛应用于催化制备手性醇、羟基酸、氨基酸等方面。大多数的氧化还原酶催化反应都需要辅酶，在其所需辅酶中，NAD(P)+-NAD(P)H体系占90％左右。但这些辅酶价格昂贵，限制了氧化还原酶的应用。采用基因工程技术...
- 徐娴
