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鱼源植物乳杆菌表达IPNV VP2-VP3重组蛋白及其口服免疫程序被引量：4: 2017年; 为比较鱼源乳酸菌表达系统口服疫苗在不同免疫程序下诱导鱼免疫应答水平的差异,确定鱼源乳酸菌表达系统口服免疫虹鳟幼鱼的免疫程序。本研究构建了重组表达IPNV VP2-VP3蛋白的鱼源植物乳杆菌L1212,将重组菌pPG612-VP2-VP3/L1212包裹颗粒饲料,口服免疫虹鳟幼鱼。免疫程序分为连续免疫组、免疫1 d后间隔1 d再免疫1 d组、连续免疫4 d后32 d加强免疫1次组和间隔免疫后32 d加强免疫1次组。免疫后进行尾动脉采血,间接ELISA方法检测各组血清抗体效价,免疫接种66 d后,腹腔注射IPNV,计算各组相对免疫保护率。确定颗粒饲料按照1 mL/g比例与108 CFU/mL重组菌pPG612-VP2-VP3/L1212和2.5%海藻酸钠混合,于20℃烘干制备口服疫苗。间隔免疫组血清抗体效价和攻毒保护率均显著高于其他组,并且免疫2次的间隔免疫组的血清抗体效价和攻毒保护率均显著高于免疫1次间隔免疫组。采用重组菌包被颗粒饲料饲喂虹鳟幼鱼,间隔免疫的免疫程序和免疫保护率优于连续免疫的免疫程序,对IPNV的入侵起到保护作用。; 刘佳琪高帅段可馨郭梦婷杜航康海燕张英唐立杰李一经刘敏; 关键词：植物乳杆菌 IPNV 口服疫苗免疫程序

虹鳟肠道植物乳杆菌的分离及特性研究被引量：4: 2014年; 为筛选一株乳杆菌用于鱼类口服疫苗的活载体,研究从健康养殖的虹鳟肠道分离出58株形态特征不同的菌株,通过革兰氏染色、氧化酶、触酶反应筛选出18株革兰氏阳性杆菌,再通过生化反应筛选出5株表型不同的菌株。经16S r RNA序列同源性分析,5株均为植物乳杆菌。在8%Na Cl,0.5%胆盐,p H 3.0,7 g·L-1胰蛋白酶,10 g·L-1胃蛋白酶,60℃处理10 min时,几乎不影响菌体存活。5株菌对多种抗生素敏感,对革兰氏阳性及阴性细菌均有抑菌活性。通过荧光分子探针c FDA-SE标记细菌,分离株L1212在15 d的检测期内能在虹鳟肠粘膜定植,并有继续繁殖倾向。因此,植物乳杆菌L1212可作为益生菌应用于虹鳟口服疫苗载体及鱼类饲料添加剂开发。; 刘敏张英张琳琳蒋烨崔文姜艳萍乔薪瑗唐丽杰李一经; 关键词：植物乳杆菌药物敏感性抑菌活性虹鳟

乳酸杆菌表达传染性胰腺坏死病毒VP2和VP3蛋白对虹鳟的免疫原性: 传染性胰腺坏死病毒(Infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)感染鲑科鱼类死亡率高,给鲑鳟养殖业造成巨大经济损失.乳酸杆菌具有多种益生特性,其中作为免疫接种的疫苗载体诱导黏膜免疫...; 刘敏赵丽丽张琳琳张英唐立杰葛俊伟李一经

鱼源植物乳杆菌表达IPNV VP2-VP3重组蛋白及其口服免疫程序: 为比较鱼源乳酸菌表达系统口服疫苗在不同免疫程序下诱导鱼免疫应答水平的差异,确定鱼源乳酸菌表达系统口服免疫虹鳟幼鱼的免疫程序.本研究构建了重组表达IPNV VP2-VP3蛋白的鱼源植物乳杆菌L1212,将重组菌pPG612...; 段可馨郭梦婷高帅花晓静张英刘佳琪施文刘敏; 关键词：植物乳杆菌口服疫苗免疫程序

虹鳟肠道植物乳杆菌的分离及特性研究: 乳酸杆菌是一类革兰氏阳性、不运动、无芽孢、发酵产生乳酸、过氧化氢酶阴性的细菌。通常存在于哺乳动物的胃肠道，奶制品和海鲜，以及某些植物表面。; 刘敏张英李一经唐立杰刘佳琪康海燕; 关键词：植物乳杆菌药物敏感性抑菌活性虹鳟

传染性胰坏死病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：4: 2014年; 以纯化的兔抗传染性胰坏死病病毒(IPNV)VP2重组蛋白多克隆抗体为包被抗体,抗IPNV VP2单克隆抗体为检测抗体建立了IPNV双抗体夹心ELISA方法。优化反应条件为:兔抗IPNV VP2重组蛋白多克隆抗体包被浓度为1.28μg/mL,抗IPNV VP2单克隆抗体的工作浓度为1.34μg/mL,酶标二抗稀释比例为1∶2 000,以P/N>2,且OD490 nm>0.101 494作为阳性判定标准。该方法的重复性变异系数均小于10%,与传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、病毒性出血败血症病毒(VHSV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、轮状病毒(HRV)无交叉反应。对41份虹鳟肝脏样品分别进行双抗体夹心ELISA和RT-PCR检测,结果双抗体夹心法与RT-PCR法检测符合率为97%,表明本实验建立的双抗体夹心ELISA检测方法检测IPNV具有较高的敏感性和特异性,可用于IPNV的病原学检测。; 张琳琳连科迅张英蒋烨姜艳萍崔文乔薪瑗唐丽杰李一经刘敏; 关键词：单克隆抗体

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张英