张晓宁
- 作品数:11 被引量:136H指数:8
- 供职机构:复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金:上海市科学技术委员会资助项目上海市教育发展基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- HVA1基因转化番茄及转基因番茄耐盐性的初步鉴定被引量:13
- 2006年
- 本研究将含有HVA1基因的质粒pBY520与pCAMBIA2200构建成双元载体pH22,又在pBY520上加上MAR元件RB7后,再与pCAMBIA2200构建成双元载体pHR22。并将上述两个载体通过农杆菌介导转入番茄,获得24株转化植株,并经过PCR-Southern检测证明其中11株为转基因阳性,且均表现出一定的耐盐性,表明HVA1基因已被转入这些植株中。
- 陈火英庄天明张晓宁刘杨张英夏聪美
- 关键词:基因工程番茄耐盐
- 盐胁迫下盐藻特异表达基因片段的克隆被引量:11
- 2001年
- 盐碱、干旱、极端温度等逆境条件是影响植物生长的重要因素.以抑制消减杂交及差式库的筛选对盐藻(Dunaliella salina)在高渗胁迫下特异表达基因片段进行了克隆.比较长期(1周,LS)及短期(16 h,SS)NaCI胁迫条件下基因表达情况,前者克隆到2个特异表达片段,后者也为2个.通过测序及GeneBank中进行同源搜索,均未有可靠的同源性结果.可以初步认为,以上得到的4个。DNA可能是新基因或此片段不在保守区内.
- 张晓宁万由衷林长发张亚兰李彦舫沈大棱
- 关键词:盐藻盐胁迫抑制消减杂交特异表达基因
- 芦荟离体快速高效增殖技术的研究被引量:2
- 2002年
- 以美国大叶芦荟为材料 ,就激素配比和接种方式进行芦荟离体快速增殖技术的研究 ,结果表明 :细胞分裂素配合低浓度的生长素可使芦荟的增殖系数净增约 60 % ,最佳增殖培养基为 MS+4.0 mg/ L BA+0 .2 mg/ L IAA;研究采用的 4种接种方式增殖系数跨度在 1 1 .2~ 1 7.5之间 ,其中方式 3和方式 4为理想的接种方式 ,增殖系数是已有报道水平的 3~ 4倍 ;最佳的生根培养基为 1 / 2 MS+0 .5~ 1 .0 mg/ L NAA或 1 / 2 MS+0 .5~ 1 .0 mg/ L IAA。另外 。
- 张建华陈火英庄天明张晓宁
- 关键词:芦荟接种方式激素配比离体培养
- 利用花粉管通道技术培育番茄耐盐新种质被引量:29
- 2004年
- 利用自花授粉后形成的花粉管通道分别将番茄耐盐野生近缘种LycopersiconperuvianumLA111、Lycoper-siconcheesmaniiLA166、LycopersiconpennelliiLA716、LycopersiconpimpinellifoliumLA2184的总DNA及含来源于大麦LEA基因家族的HVA1基因的pBY520质粒DNA导入栽培番茄 鲜丰 及 矮黄 ,获得了较为广泛的变异,经过对后代的选择培育获得了一批农艺性状优良的耐盐新种质,并已培育耐盐新品系1个;传统的叶色遗传与现代的PCR检测表明番茄通过花粉管通道导入外源DNA是可行的.
- 陈火英张建华庄天明张晓宁
- 关键词:番茄花粉管通道PCR检测
- 盐藻启动子活性片段的克隆及序列分析被引量:14
- 2002年
- 报道了以启动子探测质粒 pECE7为载体克隆盐藻 (Dunaliellasalina)中具有启动子活性DNA片段的研究 .经限制性内切酶EcoRⅠ分别消化盐藻基因组DNA和质粒pECE7,并进行体外重组及转化筛选 ,得到一具有启动子活性的DNA片段Ped .经进一步氯霉素抗性筛选 ,证明此启动子具有较高的活性 .测序结果显示Ped长 2 4 3bp .对其序列分析表明它具有启动子初级结构的基本特征 .Southern杂交显示此启动子片段确实来自于盐藻基因组 ,且其广泛存在于整个基因组中启动盐藻基因的表达 .经推测 ,Ped中含有多种转录因子结合位点的同源序列 。
- 张晓宁王昊陈火英沈大棱
- 关键词:克隆盐藻启动子
- NaCl诱导表达的盐藻果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因克隆及原核表达被引量:12
- 2002年
- 通过RACE技术克隆到盐藻(DunaliellasalinaTeod.)果糖 1,6 二磷酸醛缩酶(DsALDP)的全长cDNA.对其序列分析及在GeneBank中进行同源搜索,发现DsALDP基因属于果糖 1,6 二磷酸醛缩酶基因家族,其与植物叶绿体果糖 1,6 二磷酸醛缩酶(AldP)基因的一致性为73%~66%.Northern杂交结果及醛缩酶活性分析均表明它确为在盐诱导下特异表达.将DsALDPcDNA构建到pET32a载体上,转入E.coliBL21进行表达分析.IPTG诱导后可以检测到一62ku基因产物大量表达.经不同浓度NaCl处理,表达DsALDP基因产物的细菌耐盐性明显高于对照组.
- 张晓宁王昊曲志才陈火英叶鸣明沈大棱
- 关键词:NACL盐藻盐胁迫果糖-1,6-二磷酸醛缩酶耐盐机制
- 利用噬菌体展示筛选结合水稻条叶枯病毒S蛋白的短肽被引量:8
- 2001年
- 利用噬菌体展示技术在随机 7肽库中筛选到结合水稻条叶枯病毒 (ricestripevirus ,RSV)病害特异蛋白(stripedisease specificprotein ,S蛋白 )的 6个短肽 ,并进行了序列测定 .ELISA结果表明 ,6个短肽和S蛋白具有一定的亲和能力 .筛选到的短肽对今后S蛋白功能分析、转基因抗RSV和水稻条叶枯病的诊断提供了条件 .
- 张宏伟万由衷曲志才张晓宁叶鸣明沈大棱
- 关键词:噬菌体展示S蛋白水稻条叶枯病毒
- 盐藻耐盐相关基因的克隆、功能分析与高效启动子的分离鉴定
- 为了研究藻类耐盐相关基因及其表达,利用抑制消减杂交法建立了盐生杜氏藻(Dunaliella salina,简称盐藻)在NaCl长期(7d)及短期(16hr)胁近下的差减文库(L,S)经筛选,L中得到2个独立克隆,插入片段...
- 张晓宁
- 关键词:光能传递启动子耐盐性盐藻
- 文献传递
- 栽培番茄耐盐突变体的离体筛选(英文)被引量:17
- 2002年
- 栽培番茄品种“矮黄”的子叶作为外植体诱导愈伤组织 ,用 Na Cl进行直接高盐胁迫筛选。结果表明 ,2 2 5 mmol/LNa Cl直接高盐胁迫获得了耐盐突变体 ,1 0株完整的再生耐盐植株 ,在 1 5 0 mmol/L Na Cl的盐胁迫下 ,成活率可达 70 % ,而未经胁迫筛选过的原始株成活率则为零。其中 ,1株耐盐突变株能正常开花、结果。对其后代离体培养的茎尖和下胚轴外植体耐盐性进行比较 。
- 陈火英张建华张晓宁
- 关键词:番茄耐盐突变体离体筛选愈伤组织氯化钠盐胁迫
- 非洲菊叶片离体诱导成株的激素调控被引量:13
- 2002年
- 以Sangria品种为试验材料 ,叶片为外植体 ,进行离体快繁激素调控技术的研究 ,结果表明 :35个激素组合配比中 ,都能形成愈伤组织 ,愈伤组织的诱导率为 10 0 % ;不定芽诱导的最佳培养基为MS +4.0mg/L(毫克 /升 )BA +0 .2mg/L(毫克 /升 )IAA ,不定芽的诱导率可达 10 0 % ;从增殖系数、试管苗的质量综合评判得出的最佳增殖培养基也为MS +4.0mg/L(毫克 /升 )BA +0 .2mg/L(毫克 /升 )IAA ,繁殖系数可达 14 ;MS附加IAA0 .2mg/L(毫克 /升 )~ 0 .5mg/L(毫克 /升 )的培养基的生根率可达 80 %以上 ,且随着培养时间延长 ,生根率会不断提高。培养 30d(天 )时 ,生根率可达 90
- 张建华陈火英庄天明张晓宁
- 关键词:非洲菊叶片激素调控