张愫
- 作品数：8 被引量：13H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 真核翻译延伸因子1A2及真核延长因子1A2在肿瘤中的作用被引量：1
- 2008年
- 癌基因一般是信号传导通路中重要的基因或细胞表面受体激酶，以往的研究主要集中在这些调节基因，相对忽略了管家基因（翻译因子、转录因子和一些维持细胞最基本功能的酶等）可能具有的致癌作用。通常认为管家基因蛋白水平和功能相对稳定保守，主要维持细胞基本结构和功能。
- 张愫诸琦
- 关键词：真核肿瘤细胞表面信号传导通路受体激酶
- 人类真核翻译延长因子1A2在胰腺癌中抑制凋亡致癌机制研究被引量：4
- 2007年
- 目的探讨人类真核翻译延长因子1A2(Homo sapiens eukaryotic translation elongation factor 1 alpha 2,EEF1A2)可能的致癌机制。方法培养人胰腺导管细胞腺癌细胞株BxPC-3;采用EEF1A2 siRNA干扰EEF1A2高表达的胰腺癌细胞株BxPC-3,另设空白对照组和阴性对照组。采用Western印迹检测各组EEF1A2蛋白水平变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞增殖抑制率;分别应用流式细胞仪、透射电镜以及末端脱氧核苷酰转移酶原位标记(TUNEL)法检测细胞凋亡。结果靶向EEF1A2的序列特异性的siRNA可以高效地抑制BxPC-3细胞EEF1A2基因表达。EEF1A2 siRNA干扰细胞24、48 h后,与阴性对照组相比,实验组细胞的细胞增殖被显著抑制(23.51%比37.67%和11.53%比48.89%,P<0.05),凋亡明显增加[(2.820±0.240)%比(8.505±2.454)%和(2.850±1.117)%比(4.075±1.068)%。P<0.05].TUNEL标记分析和透射电镜均发现典型凋亡特征。结论EEF1A2可能是胰腺癌的一个癌基因。EEF1A2可能通过抑制细胞凋亡途径促进胰腺癌细胞生长。
- 诸琦张愫曹海霞蔡驹高耀博章永平徐凯齐充
- 关键词：胰腺癌RNA干扰细胞凋亡
- 人类真核延伸因子1A2对胰腺癌细胞侵袭、转移能力的影响被引量：3
- 2008年
- 目的探讨外源性人类真核延伸因子（EEF）1A2基因导入人胰腺癌SW1990细胞株后，细胞侵袭转移能力的改变。方法应用腺病毒载体将EEFlA2基因导入人胰腺癌SW1990细胞中，采用划痕实验、Transwell小室、细胞粘附实验检测转染前后细胞运动、侵袭、转移及粘附能力的改变。结果Ad5／F35-EEF1A2转染后继续培养48h的SW1990细胞，可见预期大小的特异性条带。实验组24h后细胞迁移率为（74．43±2．12）％，与阴性对照组和空白对照组比较差异有统计学意义[（44．08±5．92）％和（48．09±3．54）％，P〈0．05]。实验组48h后穿膜细胞数为（65．42±8．24）个，与阴性对照组和空白对照组相比差异有统计学意义[（20．10±5．82）个和（23．25±5．23）个，P〈0．05]。实验组48h后穿膜细胞数为（61．30士5．68）个，与阴性对照组和空白对照组相比差异有统计学意义[（32．04±3．60）个和（32．33±2．51）个，P〈0．05]，且对Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅳ型胶原、纤维结合蛋白、粘蛋白的粘附力增强（P〈0．05）。结论腺病毒介导的EEF1A2高表达能明显增强胰腺癌SW1990细胞的运动、侵袭、转移及粘附能力。提示EEF1A2可能通过改变胰腺癌细胞的生物学特性影响胰腺癌的发生发展。
- 诸琦曹海霞黄佳丁健青张愫李百文姚玮艳章永平
- 关键词：胰腺肿瘤细胞株肿瘤
- EEF1A2基因对胰腺癌细胞生长和增殖的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨EEF1A2转基因对胰腺癌细胞SW1990生长和增殖的作用。方法应用腺病毒载体将EEFIA2基因转染人胰腺癌细胞SW1990，采用MTY法检测细胞的增殖，软琼脂克隆形成试验检测细胞的生长，应用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果带EEFIA2的腺病毒感染SW1990细胞后，EEF1A2mRNA表达增加，72h的A750值为1．2996±0．2091，培养6d的细胞数为81250±1767，14d的克隆形成率为82％，均较空载体腺病毒组和PBS组显著增加（P〈0．05）；G．期细胞比例为28．5％，S期细胞比例为60．9％，前者较空载体腺病毒组和PBS组显著减少，后者较空载体腺病毒组和PBS组显著增加（P〈0．05）。结论EEF1A2基因可以显著促进人胰腺癌细胞SW1990的生长和增殖。
- 曹海霞诸琦丁健青张愫姚玮艳钱爱华周琳章永平
- 关键词：胰腺肿瘤细胞增殖
- EEF1A2嵌合型重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的:克隆人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)基因全长,构建其重组腺病毒载体。方法:应用RT-PCR方法从人胰腺癌组织中扩增人EEF1A2基因全长,经T-A克隆后,亚克隆到腺病毒穿梭质粒pDC316,构建穿梭质粒pDC316-EEF1A2。利用同源重组的方法将腺病毒骨架质粒pBHG35和穿梭质粒pDC316-EEF1A2共转染293细胞,获得腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2,经过在293细胞中包装和扩增之后,获得高滴度的腺病毒重组质粒Ad5/F35-EEF1A2。PCR、WesternBlot检测EEF1A2基因的表达。结果:用RT-PCR方法,从人胰腺癌组织中扩增出1400bp的cDNA片段,经测序证实为人EEF1A2基因。构建及包装出高滴度的重组腺病毒载体Ad5/F35-EEF1A2。结论:成功地克隆了人EEF1A2基因全长,并构建其表达的重组腺病毒载体,为进一步研究人EEF1A2基因在相关疾病中的作用奠定了基础。
- 曹海霞诸琦章永平黄佳张愫姚玮艳
- 关键词：腺病毒科腺病毒载体基因克隆
- 人类真核翻译延长因子1A2在胰腺癌的表达及其抑制凋亡致癌机制研究
- 目的人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2),位于人类20q13,编码延长因子eEF1A2。传统认为它是管家基因,而新近研究提出它可能同时还是一个重要的癌基因。已有研究证实 EEF1A2在正常胰腺无表达,而20q13位...
- 诸琦张愫曹海霞蔡驹高耀博章永平徐凯
- 文献传递
- 三元复合因子Net对人胰腺癌细胞株BxPC3增殖的影响被引量：1
- 2009年
- 目的研究三元复合因子Net转染人胰腺癌细胞株BxPC后的表达状态及对原癌基因c—fos表达的影响。方法采用脂质体2000将重组人pEGFP—Net质粒和空质粒pEGFP转染人胰腺癌BxPC3细胞株，建立稳定高表达Net的细胞系。应用MTT、流式细胞仪等方法检测胰腺癌细胞的增殖，应用实时定量PCR和Western blotting检测Net及c—fos mRNA和蛋白的表达。结果BxPC3细胞低表达Net，转染pEGFP-Net后稳定高表达Net，并抑制c-fos的表达。转染pEGFP—Net的细胞生长缓慢，转染后第3、5、7天的抑制率分别为38．8％、55．3％、56．9％，显著高于空质粒转染组的5．1％、12．4％、8．6％（P〈0．05）；G0／G1期细胞占（61．8±5．7）％，显著高于空质粒转染组的（45．1±3．4）％。结论三元复合因子Net能抑制人胰腺癌BxPC3细胞的增殖，其机制可能与抑制c—fos表达有关。
- 诸琦李百文倪培华曹海峡黄佳张愫
- 关键词：胰腺肿瘤NET细胞增殖
- 人类真核翻译延长因子1A2在胰腺癌的表达研究被引量：7
- 2007年
- 目的 研究人类真核翻译延长因子1A2（EEF1A2）及其表达产物eEF1A2蛋白在人胰腺癌细胞株和组织标本中的表达。方法 收集人胰腺导管腺癌病理标本15例，人正常胰腺组织标本8例。运用RT—PCR、Realtime—PCR、Westernblot以及免疫组化等技术检测人胰腺癌细胞株SW1990、BxPC3、PaTu8988和胰腺癌组织标本中EEF1A2的表达水平。结果 人胰腺腺癌细胞株PaTu8988、SW1990和BxPC3中，EEF1A2 mRNA和eEF1A2蛋白表达水平与正常胰腺组织相比．均明显上调。8例癌旁正常胰腺组织标本中仅1例胰腺导管细胞内eEF1A2呈弱阳性表达，而15例胰腺导管腺癌病理标本中．胰腺导管腺癌细胞内eEF1A2均呈中至强阳性表达，两者比较有显著差异（P〈0．05）。结论 EEF1A2在胰腺癌中呈异常高表达。EEF1A2的致癌机制可能与加速蛋白质翻译速度、抑制凋亡以及改变细胞骨架有关。EEF1A2有可能成为胰腺癌一个有效的诊断标志物和基因治疗靶点。
- 张愫诸琦曹海霞蔡驹高亚博章永平徐凯齐充
- 关键词：胰腺肿瘤实时定量PCR免疫组织化学
