康小燕
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
- 供职机构:扬州大学兽医学院更多>>
- 发文基金:江苏省属高校自然科学基础研究项目国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 重组质粒pACYC184-hok/sok的构建及稳定性研究被引量:2
- 2011年
- 以低拷贝质粒pACYC184为载体,将hok/sok基因插入到载体BamHⅠ位点,构建重组质粒pACYC184-hok/sok稳定系统,同时构建hok/sok基因缺失突变重组质粒pACYC184-hok/sok(M)。通过对构建的重组菌进行连续传代和对不同代次的重组质粒进行SphⅠ酶切,分析hok/sok基因的引入对宿主细胞生长的影响。结果表明,重组质粒pACYC184-hok/sok在无抗生素筛选压力下连续传代,传至第135代时质粒稳定率仍是100%,且传代前后的质粒SphⅠ酶切图谱没有发生变化,DNA序列测定表明,插入的hok/sok基因没有发生任何突变。突变重组质粒pACYC184-hok/sok(M)传代前后的质粒SphⅠ酶切结果虽没有发生变化,但其相应的重组菌传至第15代,质粒几乎完全丢失。生长曲线的测定结果表明,与含pACYC184重组菌生长曲线相似,pACYC184-hok/sok重组菌生长较快,而pACYC184-hok/sok(M)重组菌生长缓慢。以上结果表明,含hok/sok稳定系统,其稳定性明显高于无hok/sok稳定系统的质粒pACYC184以及突变质粒pACYC184-hok/sok(M)。重组质粒pACYC184-hok/sok具有良好的结构稳定性和分离稳定性。
- 康小燕蒋志伟郁磊羊扬舒燕姚丰华朱国强
- 关键词:PSK
- 细菌hok/sok解离后致死系统研究进展
- 2011年
- 由于编码特定基因的重组质粒增加了细胞本身的代谢负担,因此,含有质粒的重组菌通常不稳定。质粒不稳定性(Plasnid instability),包括分离不稳定性(Segregational instability)和结构不稳定性(Structural instability)两个方面,其中质粒的分离不稳定性是质粒不稳定性的主要因素。一旦丢失外源质粒,细胞将迅速增长,
- 蒋志伟康小燕郁磊朱国强
- 关键词:重组质粒解离细菌重组菌细胞