岳川
- 作品数：47 被引量：353H指数：11
- 供职机构：福建农林大学园艺学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家茶叶产业技术体系建设项目浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 茶树胆碱单加氧酶CsCMO的克隆及甜菜碱合成关键基因的表达分析被引量：15
- 2013年
- 【目的】从茶树中克隆甜菜碱(GB)合成途径中的关键酶——胆碱单加氧酶CsCMO,研究不同逆境胁迫和不同抗寒茶树品种间GB合成中关键基因的表达模式,并分析茶树体内GB的含量,为茶树抗性育种奠定基础。【方法】采用反转录PCR结合RACE技术,从茶树中克隆CsCMO的全长cDNA序列,并对其进行生物信息学分析,结合前期克隆得到的茶树甜菜碱醛脱氢酶CsBADH,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析这2个基因的表达模式,紫外分光光度计测定GB含量。【结果】克隆得到茶树CsCMO(GenBank登录号:JX050146)的cDNA全长1 558 bp,包含1 305 bp的完整开放阅读框(ORF),编码434个氨基酸,并被定位在叶绿体上。氨基酸序列分析表明,CsCMO含有CMO中保守的Rieske型2Fe-2S结构域和单分子非血红素Fe结合位点,与其它植物CMO序列相似性在50%以上;进化树分析显示,它与枸杞的关系最近。qRT-PCR分析表明,4℃低温、NaCl盐和ABA处理均能诱导CsCMO和CsBADH表达,96 h内随着处理时间的增加,表达量呈增加趋势,但2个基因的表达模式有差异,盐胁迫诱导基因表达更显著;在不同抗寒品种中,2个基因的表达在抗性强的品种中表达量总体要高于抗性弱的品种,且CsBADH的变化比CsCMO的显著。3种胁迫处理48 h后,叶片中的GB含量均增加;低温处理后抗寒性强的品种中GB含量比抗寒性弱的高。【结论】克隆了茶树CsCMO,在低温、NaCl盐以及ABA处理下,GB积累,CsBADH和CsCMO上调表达,且盐胁迫下的表达更明显,表明GB与茶树抵御这3种胁迫关系密切。
- 曹红利岳川郝心愿王新超杨亚军
- 关键词：茶树实时荧光定量PCR非生物胁迫
- 茶籽的综合利用现状被引量：3
- 2018年
- 从茶籽油、茶皂素、茶籽粕和茶籽壳等方面对茶籽的综合开发利用现状进行论述,提出茶籽资源未来发展的方向,有利于促进我国茶籽资源的综合利用开发。
- 黄仪鹏金心怡岳川
- 关键词：茶籽油茶皂素茶籽壳综合利用
- 茉莉花芳樟醇生物合成关键基因的克隆与表达分析被引量：10
- 2019年
- 芳樟醇是芳香植物的重要挥发性化合物之一,橙花叔醇/芳樟醇合酶基因(NES/LINS)是芳樟醇化合物生物合成的重要调控基因。该研究以茉莉花花瓣为材料,基于茉莉花花瓣转录组测序结果,分别采用RT-PCR和染色体步移技术,克隆获得NES/LINS基因的全长cDNA序列及其启动子序列,并应用SPEC-GC-MS和qRT-PCR技术检测茉莉花开放过程中芳樟醇化合物的相对含量及JsNES/LINS基因的表达水平,并分析JsNES/LINS在植物激素处理后的表达水平,为进一步揭示JsNES/LINS基因在茉莉花芳樟醇的生物合成调控中的作用提供理论依据。结果表明:(1)获得的JsNES/LINS基因(登录号为:MH513857.1)cDNA全长为1 843 bp,开放阅读框(ORF)全长为1 755 bp,编码584个氨基酸,为亲水性稳定蛋白;NCBI-BLAST分析显示,JsNES/LINS与油橄榄OeNES、金鱼草AmNES/LINS1和AmNES/LINS 2以及山茶花CsLINS的相似性分别为56%、54%、54%和50%。(2)亚细胞定位结果显示JsNES/LINS定位于细胞质中;获得了JsNES/LINS起始密码子上游1 141 bp启动子序列,PlantCare预测结果显示,该序列包含多种与植物激素和光照等响应相关的顺式作用元件。(3)GC-MS分析显示,芳樟醇化合物的相对含量在茉莉花未开放18:00时最低,半开放22:00时达到最大,随后呈下降趋势。(4)qRT-PCR结果显示,JsNES/LINS的相对表达量变化与芳樟醇化合物的相对含量变化趋势一致;经IAA、GA、ABA及MeJA处理后JsNES/LINS的表达量受到不同程度的诱导表达,其中MeJA的诱导作用最为明显,诱导作用由大至小分别为:MeJA>GA>ABA>IAA。研究推测,JsNES/LINS在芳樟醇化合物的生物合成过程中具有重要调节作用,且受植物激素调控表达。
- 陈笛陈雪津郭永春王鹏杰岳川陈桂信叶乃兴
- 关键词：茉莉花芳樟醇启动子
- 茶树赤霉素受体基因CsGID1a的克隆与表达分析被引量：17
- 2013年
- GID1作为赤霉素信号转导的受体,在赤霉素作用中具有重要作用。采用同源克隆方法,利用RT-PCR和RACE技术在茶树中克隆到赤霉素受体基因GID1的cDNA全长,命名为CsGID1a(GenBank登录号为JX235369)。该基因全长1411bp,开放阅读框1023bp,编码341个氨基酸。生物信息学分析显示,CsGID1a编码的蛋白分子量为38.53kD,理论等电点为5.62;无信号肽位点,是非分泌性蛋白,具有1个跨膜区,基因被定位于细胞核内;CsGID1a氨基酸序列具有激素敏感性脂肪酶(HSL)家族蛋白的HGG、GXSXG功能域以及羧酸酯酶典型的三级结构;与其他物种的GID1相似性均在60%以上,与葡萄的相似性最大达87%、进化关系最近。荧光定量PCR结果显示,高浓度(1.0×10-5molL-1)GA3能够下调CsGID1a的表达,5h内的表达呈下降趋势;随着越冬茶芽萌动进程,CsGID1a表达量逐渐降低,特别在3月初萌发以后变化较大,推测赤霉素及其受体基因可能与茶树越冬芽解休眠相关。
- 岳川曾建明曹红利郝心愿章志芳王新超杨亚军
- 关键词：茶树赤霉素
- 茶树甜菜碱醛脱氢酶基因(CsBADH1)的全长cDNA克隆与表达分析被引量：5
- 2013年
- 甜菜碱是一种能在逆境下大量积累的无毒性渗透相溶物质,而甜菜碱醛脱氢酶(BADH)是甜菜碱合成途径中的关键酶之一。本实验采用SMART-RACE技术获得了茶树甜菜碱醛脱氢酶基因的全长cDNA序列,命名为CsBADH1(GenBank登陆号:JX050145),并对其进行相关的生物信息学分析。结果表明:CsBADH1的cDNA序列全长1 972 bp,其开放阅读框(ORF)为1 518 bp,编码505个氨基酸,预测分子量为54.8 kD,理论等电点(PI)为5.652,是疏水性很强的蛋白,且具有BADH基因典型的高度保守十肽基序(VTLELGGKSP)和与醛脱氢酶(ALDHs)功能有关的半胱氨酸残基(C)。系统进化树分析表明,茶树BADH氨基酸序列与人参(Panax ginseng)的亲缘关系最近,相似度达87%,其余相似性也大部分在80%以上。实时荧光定量PCR分析结果显示:该基因在经历一定时间的冷驯化后表达量升高,说明CsBADH1基因可能参与茶树的冷驯化作用。
- 曹红利郝心愿岳川马春雷王新超杨亚军
- 关键词：茶树冷驯化
- 茶树硫酸盐转运蛋白基因CsSUL3.5的克隆与表达分析被引量：8
- 2015年
- 采用电子克隆与RT-PCR相结合的方法获得茶树硫酸盐转运蛋白(CsSUL3.5)的cDNA序列,并进行了相关生物信息学分析。克隆到茶树CsSUL3.5 cDNA序列2 017 bp(GenBank登录号KP984500),包含完整的开放阅读框(ORF)1914 bp,编码637个氨基酸。生物信息学分析显示,CsSUL3.5编码的蛋白分子量为70.38 kD,无信号肽,是疏水性的非分泌蛋白,有11个跨膜区;与其他物种相似性均在60%以上,与烟草的相似性最高(74%),具有硫酸盐转运蛋白家族典型的保守结构域和空间结构,属于硫酸盐转运蛋白家族。系统进化分析表明茶树的CsSUL3.5属于第3亚家族,与芝麻的关系比较近。荧光定量PCR表明该基因在茶树幼苗根与成熟叶中均有表达;Na_2SO_4与Na_2SeO_4处理均能显著诱导CsSUL3.5的表达。
- 胡玉荣岳川周超黄玉婷曹红利郝心愿王新超曾建明
- 关键词：茶树硒克隆
- 茶树β-淀粉酶基因CsBAM3的克隆及其响应低温的表达模式被引量：7
- 2017年
- β-淀粉酶(BAM)是植物中参与淀粉水解的关键酶类,在应对非生物胁迫中发挥重要作用。从前期茶树冷驯化转录组分析中分离到1个参与淀粉代谢的差异表达基因,cDNA全长克隆及序列分析鉴定该基因为拟南芥BAM3同源基因,命名为CsBAM3。该基因编码548个氨基酸残基,与拟南芥的BAM1和BAM3一起归为第Ⅱ亚家族,推测为叶绿体定位、具有淀粉水解活性的β-淀粉酶编码基因。启动子克隆及序列分析显示该基因可能受生理节律、光、低温及多种激素等信号共同调控。CsBAM3在叶片中表达量最高,茎和花中表达量较低,根中基本不表达。CsBAM3在冷驯化初期被显著上调且一直保持相对较高的水平。成熟叶片及嫩芽(一芽二叶)中的CsBAM3均可以被4℃及0℃低温显著上调,且嫩芽中基因的表达量上调幅度明显高于成熟叶。模拟倒春寒低温条件下,检测不同萌发阶段新梢中CsBAM3的表达情况表明,CsBAM3在鲜叶初展的嫩芽中即可快速受低温诱导。以上结果表明,CsBAM3是茶树中调控淀粉水解的一个重要β淀粉酶编码基因,在茶树成熟叶和嫩芽受到不同低温胁迫时其表达可被快速诱导。
- 郝心愿岳川唐湖钱文俊王玉春王璐王新超杨亚军
- 关键词：茶树基因克隆低温胁迫
- 茶树CsWRKY6、CsWRKY31和CsWRKY48基因的分离及表达分析被引量：10
- 2019年
- 以茶树品种‘铁观音’的芽叶为供试材料,采用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)技术克隆获得3个WRKY基因CsWRKY6(GenBank登录号:MG298953)、CsWRKY31(MG298958)和CsWRKY48(MG298961)。它们的开放阅读框长度分别为1 734、1 299和960 bp,分别编码577、432和319个氨基酸。系统发育树及蛋白结构域分析表明,3个茶树WRKY基因均属于第Ⅱ类WRKY蛋白,都含有高度保守的DNA结合域(WRKYGQK)和锌指结构组成的WRKY结构域,其中Ⅱb亚类的CsWRKY6和CsWRKY31锌指结构模式为C-X_5-C-X_(23)-H-X-H,Ⅱc亚类的CsWRKY48锌指结构模式为C-X_4-C-X_(23)-H-X-H。3个基因在茶树不同组织中均有表达且具有明显的组织特异性,CsWRKY6在老叶中的表达量显著高于其他组织,CsWRKY31在花中的表达量最高,CsWRKY48在根和茎中的表达量显著高于叶、茶花和茶果。蛋白互作预测表明3个基因可能通过与多个基因互作来响应逆境胁迫,荧光定量表达分析显示低温处理能显著上调茶树叶片中3个基因的表达;在干旱处理下CsWRKY31和CsWRKY48表达均显著上调且在12 h后达到最大,外源脱落酸处理后CsWRKY48表达迅速上调,而CsWRKY6和CsWRKY31表达下调。推测这3个基因与茶树抗逆响应密切相关。
- 王鹏杰岳川陈笛郑玉成郑知临林浥杨江帆叶乃兴
- 关键词：茶树WRKY转录因子逆境胁迫
- 茶树CsIDM的鉴定、表达分析及互作验证
- 2023年
- 以不同茶树(Camellia sinensis)基因组为参考,通过序列同源性分析,在‘龙井43’中鉴定并克隆到3个CsIDM基因。CsIDM1属于组蛋白乙酰转移酶家族,具有典型的HAT保守结构域,定位于细胞核中。CsIDM2、CsIDM3均属于热激蛋白家族,具有典型的ACD保守结构域,均定位于细胞核、细胞膜及细胞质中。CsIDM启动子区域含有多种响应环境信号的顺式作用元件,主要为光响应、植物激素响应、胁迫响应和植物生长发育相关。CsIDM在花蕾、腋芽、茎中表达量较高,在盛花组织中较低。在干旱、高温及生物胁迫下,CsIDM均出现不同程度的差异表达。茶树越冬芽休眠形成与解除过程中,CsIDM1的表达丰度在休眠形成、深休眠和休眠解除3个阶段存在高—低—高的表达模式。通过双分子荧光互补试验证实,CsIDM2和CsIDM3之间可形成异源二聚体;CsIDM2与Cs MBD5、CsIDM3与CsMBD16存在相互作用。综上所述,CsIDM在茶树的胁迫应答和芽休眠解除中发挥作用,可能通过形成蛋白复合体参与甲基化调控。
- 李宇腾陈瑶任恒泽李聪聪王浩乾曹红利岳川郝心愿王新超
- 关键词：茶树去甲基化亚细胞定位
- 植物激素对茶树春季新梢生长发育的调控作用研究
- 2023年
- 激素在植物生长发育调控中发挥重要作用,为明确不同激素对茶树新梢生长发育的影响,挖掘参与调控这一过程的主要通路和关键基因,以龙井43为试材,在茶树处于萌动期时分别进行100μmol·L^(-1)脱落酸(ABA)、100μmol·L^(-1)赤霉素(GA_(3))和100μmol·L^(-1)吲哚-3-乙酸(IAA)喷施处理,观察新梢萌发表型,并对处理后第7天的新梢进行转录组测序分析。结果显示,外源ABA处理抑制新梢生长,处理7 d后芽长极显著短于对照;GA_(3)和IAA处理则具有促进作用,GA_(3)处理7 d芽长极显著长于对照,IAA处理14 d芽长极显著长于对照。转录组分析表明,ABA处理新梢中的氨基酸生物合成通路、GA_(3)处理的氧化磷酸化通路和光合作用通路及IAA处理的类黄酮生物合成通路是差异基因富集的主要通路;植物激素通路、光合作用通路相关的GAI、PSBO2、PSBQ-2和PSBP-1可能是参与新梢生长发育的关键基因。对部分候选基因的表达模式进行实时荧光定量验证,表明转录组分析结果可靠。以上研究明确了激素影响茶树新梢生长发育的主要通路和关键基因,将为全面揭示茶树新梢生长发育调控机制提供理论依据。
- 李聪聪王浩乾叶玙璠陈瑶任恒泽李宇腾郝心愿王新超曹红利岳川
- 关键词：茶树脱落酸赤霉素吲哚-3-乙酸转录组
