宋瑱
- 作品数：18 被引量：62H指数：5
- 供职机构：成都中医药大学更多>>
- 发文基金：四川省卫生厅科研基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学理学生物学更多>>
- 氧化石墨烯对聚合酶链式反应扩增效率、灵敏度和特异性的影响
- 2017年
- 以人类基因组DNA和志贺氏菌粗制裂解菌液为模板,扩增115 bp的Alu基因片段和402 bp的ipaH基因片段.通过设置氧化石墨烯(Graphene Oxide,GO)和模板的浓度为变量,分别研究了氧化石墨烯对聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)扩增效率和灵敏度的影响;运用多轮PCR扩增方法研究了氧化石墨烯对聚合酶链式反应扩增特异性的影响.结果显示,氧化石墨烯有效提高PCR扩增效率的范围为9—14倍,提高PCR灵敏度一个数量级以及增加多轮PCR扩增中的两轮扩增反应.从原子力显微镜(Atomic force microscope,AFM)的结果可以看出,本文制备的氧化石墨烯片层厚度主要集中在0.5—0.8 nm,少数大于1 nm,总体具有较大的比表面积.除此之外,本文还发现当氧化石墨烯浓度到达μg·μL^(-1)后,引物二聚体与氧化石墨烯的浓度呈正比,说明氧化石墨烯优化PCR的主要影响因素是其与引物的相互作用.
- 蒋城杨中柱赵美莲宋瑱
- 关键词：氧化石墨烯聚合酶链式反应灵敏度特异性
- 项目教学法在分析化学教学中的应用被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨项目教学法在分析化学教学中的应用。方法:以我院四年制医学检验专业2013级5个班为研究对象,随机抽取产生实验组和对照组,比较项目教学法的教学效果。结果:实验组的理论、方案设计及技能操作考试的平均成绩均高于对照组,有显著性差异(P<0.05)。结论:项目教学法比传统教学法优越,有利于学生职业素养和创新能力的培养。
- 蔡竞春陈小军宋瑱罗莎杰
- 关键词：项目教学法分析化学
- 一种提高实时荧光定量PCR特异性的方法
- 本发明公开了一种基于氧化石墨烯量子点提高实时荧光定量PCR特异性的方法：它是使用氧化石墨烯量子点对实时荧光定量PCR引物预处理后，再将引物应用于实时荧光定量PCR。本发明的优点在于：利用氧化石墨烯量子点优化实时荧光定量P...
- 何洋杨中柱宋瑱胡晨妍
- 表皮葡萄球菌luxS基因敲除重组质粒的构建
- 2013年
- 目的构建1个含有luxS基因上、下游片段、抗卡那霉素基因的重组克隆质粒,用以敲除表皮葡萄球菌luxS基因。方法检索GenBank获得luxS基因序列以设计引物,以生物膜阳性表皮葡萄球菌基因组DNA为模板,采用高保真PCR扩增得到包含luxS基因上游片段、完整的luxS基因和luxS基因下游片段的长片段DNA;以pEASY-T4质粒为模板扩增得到抗卡那霉素基因,再用内侧引物分别扩增luxS基因上、下游序列,按luxS基因上游片段+抗卡那霉素基因+luxS基因下游片段的顺序重组连接,转化JM109感受态细胞,通过卡那霉素筛选、酶切分析和PCR-测序验证luxS基因敲除的重组克隆载体。结果经酶切后电泳验证重组质粒中各目的片段插入无误,PCR检测结果证明重组质粒luxS基因缺失,测序结果显示碱基无错配,含目的基因的重组质粒菌株在含卡那霉素培养平板内正常生长,证明插入的抗卡那霉素基因表达良好。结论表皮葡萄球菌luxS基因敲除重组质粒构建成功,为后续luxS基因缺陷株的构建奠定了基础。
- 宋瑱王凤苹米娇李燕
- 关键词：表皮葡萄球菌LUXS基因生物膜
- 高校实验课程教学多元化评价的实践与探索被引量：9
- 2017年
- 中国高校实验课程的教学质量引起了越来越多的重视和关注,但目前单一的教学评价不能满足高校教育评价实践发展的需求,多元化的教学评价模式已成为实验课程教学评价的发展方向,因而它值得进一步研究和探索。
- 何洋宋瑱李东梅
- 关键词：实验课程教学质量
- 盐酸小檗碱对白假丝酵母生物膜形成抑制作用的研究被引量：2
- 2019年
- 目的探讨盐酸小檗碱对白假丝酵母生物膜表型的抑制作用及其机制。方法采用甲基四氮盐(XTT)减低法、激光共聚焦显微镜和实时定量PCR(RT-qPCR)分别检测不同浓度盐酸小檗碱作用下白假丝酵母生物膜膜内细胞代谢活性、微观形态结构、厚度和生物膜形成关键基因efg1、hwp1、ece1、als1表达水平的变化。结果128μg/ml和32μg/ml盐酸小檗碱对白假丝酵母标准菌株ATCC 10231生物膜膜内细胞活性的抑制率分别为:88.4%和34.3%(4 h),96.3%和47.6%(6 h),对白假丝酵母临床菌株CA 2119的抑制率分别为:77.2%和29.8%(4 h),72.8%和43.2%(6 h);对ATCC 10231生物膜厚度的抑制率分别为:61.4%和41.03%(4 h),53.49%和39.53%(6 h),对CA 2119的抑制率分别为:45.45%和27.27%(4 h),45%和25%(6 h);而8μg/ml盐酸小檗碱抑制效果较差。128μg/ml盐酸小檗碱抑制作用优于4μg/ml氟康唑(P<0.05),但对CA 2119生物膜的抑制效果不及ATCC 10231;RT-qPCR结果表明高浓度和中浓度盐酸小檗碱均能明显抑制ATCC 10231生物膜形成关键基因efg1、hwp1、ece1、als1的表达(P<0.05),但对CA 2119生物膜形成关键基因表达的抑制作用较差。结论盐酸小檗碱通过杀死生物膜中的细胞并破坏其结构来抑制白假丝酵母ATCC 10231和CA 2119早期生物膜的形成,其抑制作用与浓度呈正相关;其机制可能是通过下调菌丝形成关键基因efg1、hwp1、ece1、als1的表达,从而延缓白假丝酵母的形态转化。
- 黄筱雪宋瑱易玉玲雍江堰李燕
- 关键词：盐酸小檗碱白假丝酵母生物膜
- 盐酸小檗碱对白色念珠菌菌态转换的影响研究被引量：6
- 2019年
- 为探讨盐酸小檗碱对白色念珠菌酵母相向菌丝相转换的抑制作用和分子机制,采用微量稀释法测定盐酸小檗碱抑制白色念珠菌生长的MIC值,倒置荧光显微镜观察菌丝动态形成过程;hochest染色法观察不同浓度盐酸小檗碱对菌丝形成的影响;RT-PCR检测在不同浓度盐酸小檗碱作用下白色念珠菌菌丝形成关键基因EFG1、HWP1、ECE1、ALS1表达水平的变化。结果显示,盐酸小檗碱对白色念珠菌的MIC值为32μg/mL,同时白色念珠菌在4h芽管形成明显,8h转化为菌丝;hochest染色结果显示:128和32μg/mL的盐酸小檗碱可以通过抑制菌丝的形成以及降低细胞密度,从而达到抑制白色念珠菌发生菌态转换的目的,并且128μg/mL盐酸小檗碱的抑制作用明显优于32μg/mL盐酸小檗碱和4μg/mL氟康唑,而8μg/mL盐酸小檗碱抑制作用不明显;RT-PCR结果表明,128μg/mL盐酸小檗碱可以抑制白色念珠菌4h干预组菌丝形成关键基因HWP1和ECE1的表达、6h干预组HWP1、ECE1和ALS1的表达,差异有统计学意义(P<0.05);32μg/mL盐酸小檗碱可以抑制白色念珠菌4h干预组菌丝形成关键基因EFG1和ALS1的表达,6h干预组EFG1、HWP1和ALS1的表达,差异具有统计学意义(P<0.05),但8μg/mL盐酸小檗碱无明显抑制作用。结果表明,盐酸小檗碱可以明显抑制白色念珠菌的菌态转换,其作用机制可能与菌丝形成关键基因EFG1、HWP1、ECE1、ALS1的表达下调相关。
- 易玉玲宋瑱雍江堰黄筱雪李燕
- 关键词：白色念珠菌盐酸小檗碱
- 表皮葡萄球菌luxS基因敲除重组质粒的构建
- 目的用重组DNA技术构建一个含有1uxS基因上游片段、抗卡那霉素基因和1uxS基因下游片段的重组克隆质粒,将重组质粒转化表皮葡萄球菌,为后续的同源重组1uxS基因敲除实验奠定基础。方法第一步:获取包含完整luxS基因及其...
- 宋瑱王凤苹李燕
- 4种方法检测表皮葡萄球菌生物膜形成能力的应用价值探讨被引量：13
- 2011年
- 目的比较4种方法检测表皮葡萄球菌体外生物膜形成能力的应用价值,帮助临床选择检测生物膜形成能力的可靠方法。方法用刚果红实验、半定量粘附实验、扫描电镜实验、PCR扩增icaA分别检测临床分离的45株表皮葡萄球菌生物膜的形成能力,经行×列表χ2检验比较阳性检出率,并以扫描电镜检测法为"金标准"计算其他3种方法的灵敏度和特异性。结果 4种方法检出表皮葡萄球菌生物膜形成的阳性率分别为31.1%、40.0%、40.0%、28.9%,无统计学差异(χ2=1.80,P>0.05)。刚果红实验、半定量粘附实验、PCR扩增icaA检测生物膜形成能力的灵敏度分别为77.8%、100%、77.2%,而特异性均为100%。结论 4种方法均可用于体外生物膜检测。
- 李燕李冬冬宋瑱陶传敏
- 关键词：表皮葡萄球菌生物膜扫描电镜
- 一种提高实时荧光定量PCR特异性的方法
- 本发明公开了一种基于氧化石墨烯量子点提高实时荧光定量PCR特异性的方法：它是使用氧化石墨烯量子点对实时荧光定量PCR引物预处理后，再将引物应用于实时荧光定量PCR。本发明的优点在于：利用氧化石墨烯量子点优化实时荧光定量P...
- 何洋杨中柱宋瑱胡晨妍
- 文献传递
