宁启兰
- 作品数：41 被引量：122H指数：7
- 供职机构：西安交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金陕西省国际科技合作计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 小反应体积实时定量PCR的可行性评价被引量：4
- 2010年
- 目的从扩增稳定性、扩增效率以及可靠性等多方面评估实时定量PCR（RtPCR）反应小体积的可行性,同时确定适合小体积体系的模板量。方法将实验分为10、15、20μL 3个体积组,每组分别采用0.1、0.2、0.3、0.4μL的大鼠cDNA为模板,进行大鼠-βactin mRNA的RtPCR扩增。通过扩增曲线和熔解曲线考察反应的稳定性,以梯度模板拟合标准曲线获得反应的扩增效率,其线性相关程度反映模板量是否合适。另外,构建大鼠降植烷诱导的关节炎（pristane-induced arthritis,PIA）模型,采用选定的反应体系,分别对模型组和正常组大鼠脾脏TNF-αmRNA进行扩增,通过TNF-α的相对表达趋势反映小体积扩增的可靠性。结果在大鼠-βactin mRNA的RtPCR扩增中,10、15、20μL 3个体积组均能特异稳定地进行扩增,并保证高扩增效率。而且每个体积组中的模板梯度表现出很好的线性相关趋势。同时选用10μL和20μL反应体积、0.2μL模板对关节炎大鼠脾脏进行TNF-αmRNA扩增,结果一致表现出了预期的显著性上调。结论实验证实10μL、15μL等小反应体积应用于RtPCR扩增中是可行的,具有较好的稳定性和可靠性,同时0.10.4μL cDNA模板在3种体系的合适模板范围内。这种较小的PCR反应体积,不仅节省了试剂和实验材料,对一些来之不易的临床标本尤为重要,也利于高通量大规模的RtPCR检测的实现。
- 韩燕朱文华何晓静蒋丛姗宁启兰吕社民孟列素
- 关键词：实时定量PCR稳定性可靠性
- 靶向巨噬细胞膜蛋白Vsig4特异性纳米抗体的构建和筛选被引量：2
- 2017年
- 目的构建V-set and immunoglobulin domain containing 4(Vsig4)特异性纳米抗体,以期作为巨噬细胞的分子探针。方法用Vsig4重组蛋白对羊驼进行免疫,分离血液中的淋巴细胞,利用噬菌体展示技术,构建噬菌体展示文库,经过连续3次生物淘筛获得与Vsig4蛋白结合的噬菌体,经测序和基因比对所得VHH序列,用ELISA法筛选出抗Vsig4的高亲和力纳米抗体,并用Vsig4稳定表达细胞系验证纳米抗体的结合能力。结果成功构建了插入率为70%、库容量为7.27×107的噬菌体表达文库,经过克隆筛选获得136个Vsig4阳性单克隆,经测序获得15个不同的VHH基因,将这些基因克隆至原核表达体系,表达和纯化后获得了高纯度的Vsig4纳米抗体,其中Nb119的亲和力最高,并且可以与Vsig4稳定表达细胞系结合。结论成功构建并筛选了特异性、高亲和力的Vsig4纳米抗体,以期用于检测巨噬细胞表面Vsig4的表达和构建特异性分子探针。
- 郑芳罗思羽韩燕宁启兰温玉荣
- 蛋白精氨酸甲基转移酶在E3大鼠哮喘模型中表达变化的研究被引量：2
- 2010年
- 目的观察1～6型蛋白精氨酸甲基转移酶(PRMTs)在E3大鼠急性哮喘模型肺脏和脾脏中的表达变化。方法构建卵清蛋白诱导的E3大鼠急性哮喘模型,分为对照组和哮喘组,每组各10只大鼠,病理及生化检测评估模型构建情况,半定量PCR检测1～6型PRMTs的表达差异。结果和对照组相比,哮喘组大鼠肺脏组织中PRMT1(P<0.01)、PRMT2(P<0.01)、PRMT3(P<0.05)、PRMT5(P<0.05)的表达有显著性升高,而PRMT4(P<0.05)的表达显著性降低;哮喘组大鼠脾脏组织中PRMT2(P<0.05)、PRMT5(P<0.05)的表达也出现显著性升高。结论蛋白精氨酸甲基转移酶在E3大鼠急性哮喘模型肺脏和脾脏中有差异性表达,这可能在哮喘发病的基因转录后调节过程中发挥着重要的作用。
- 孙青竹焦芳芳杨旭东钟波蒋梅花李国良吕彬韩燕宁启兰张富军孙健吕社民
- 关键词：哮喘
- NDRG2在中枢神经系统疾病中的作用被引量：1
- 2020年
- N-myc下游调控基因2(N-myc down-stream regulated gene 2, NDRG2)属于NDRG家族成员,是一种与细胞增殖和应激相关的肿瘤抑制基因。NDRG2分布广泛且在全身多种组织器官中表达,有自己特有的转录方式和化学修饰。NDRG2在神经系统中含量丰富,在脑和脊髓中均有表达,能调控星形胶质细胞的增殖,并且参与神经元的发育和神经递质转运。NDRG2的表达水平和化学修饰与神经退行性疾病、缺血性脑卒中、神经系统肿瘤和精神疾病的发生发展有密切关系。但是目前NDRG2发挥生物学功能的分子机制尚未完全明了,有待进一步探索。
- 陈涛熊业城邓春雷宁启兰李孟星俞小瑞
- 关键词：NDRG2神经系统退行性变卒中精神疾病
- 改革《生物化学与分子生物学》教学方法培养创新性医学人才被引量：12
- 2008年
- 生物化学与分子生物学不但是促进整个生命科学发展的前沿学科，也是医学生的重要基础课。近代医学的发展要求高等医学院校培养的学生，必须具备扎实的生物化学与分子生物学理论知识、以及运用其技术解决医学实际问题的能力和科研创新能力。为此，我们通过夯实学生《生物化学与分子生物学》的基础理论知识、开展多层次的实践训练（基本实验、综合试验及开放性实验）、科学管理的开放性实验室等多种途径，不断提高教学水平，努力培养医学创新性人才。
- 李冬民吕社民杨旭东俞小瑞孟列素王淑红韩燕宁启兰张富军
- 关键词：生物化学分子生物学实践教学
- KCNE2蛋白在自发性高血压大鼠心脏组织中的分布和表达
- 2008年
- 目的研究KCNE2蛋白在自发性高血压大鼠(SHR)心脏不同部位的分布和表达差异,及鼠龄对其表达水平的影响。方法提取幼龄和高龄SHR心肌不同部位(心室、室隔膜和心房)组织的膜蛋白,利用Western印迹技术和图象分析方法,比较KCNE2蛋白在样品之间免疫强度差异。结果SHR心肌不同部位组织中均有KCNE2蛋白的分布;同龄大鼠心肌不同部位组织中KCNE2蛋白的表达均无显著性差异;但在高龄大鼠的右心室和室隔膜组织中,KCNE2蛋白的表达显著高于其在幼龄大鼠相同组织中的表达。结论KCNE2蛋白在SHR心脏不同部位均有分布;在高龄大鼠右心室和室隔膜组织中,KCNE2蛋白的表达水平均高于其在幼龄大鼠同一组织中的表达。
- 王慧莲吕社民宁启兰韩燕杨旭东钟波Tseng GN
- 关键词：自发性高血压大鼠WESTERN印迹法
- 一种简单易行的大鼠肺组织切片前处理方法
- 2008年
- 目的探讨一种改善肺组织切片质量的方法。方法在E3大鼠哮喘模型肺组织切片前进行抽气处理,将抽过气的肺组织常规包埋、切片,观察后摄像。结果大鼠肺组织经抽气处理后,浸蜡完全,切片完整,镜下观察组织清晰、结构完整,切片质量明显改善。结论肺组织切片前经抽气处理的切片质量优于未经抽气处理的切片。
- 张富军任娟宁启兰韩燕王淑红
- 关键词：肺组织抽气切片
- 中国汉族女性中G72基因与精神分裂症的关系被引量：2
- 2010年
- 目的研究在中国汉族女性中NMDA受体途径重要基因G72与精神分裂症的关系。方法在545名中国汉族女性(精神分裂症患者260例,正常对照285例)中对位于G72基因的3个单核苷酸多态性位点(rs3916965、rs3916967和rs2391191)进行基因分型和连锁不平衡分析。结果遗传标记rs3916967的等位基因G(P=0.0386)和rs2391191的等位基因A(P=0.0096)均与精神分裂症相关。此外,由3个单核苷酸多态性位点构建的单倍型分析表明,单倍型GAG在病例-对照组中表现出统计学差异(P=0.0024)。结论在中国汉族女性中,G72基因是精神分裂症的一个重要易感基因,在后续的研究中有必要对本结果进行进一步的验证。
- 韩燕张欢宁启兰钟波孙青竹温玉荣高成阁马捷
- 关键词：精神分裂症单核苷酸多态性汉族
- 慢性肾功能不全大鼠下丘脑、胃肠道ghrelin及其受体表达变化被引量：10
- 2011年
- 目的观察慢性肾功能不全(CRF)大鼠下丘脑、胃底和十二指肠组织脑肠肽ghrelin及其生长激素促分泌素受体(GHS-R)在蛋白和mRNA水平上的表达变化。方法 SD大鼠随机分为假手术组和CRF组,其中采用5/6肾切除制作CRF大鼠模型,造模成功后采用免疫组织化学法和实时定量-PCR法检测两组大鼠下丘脑、胃底和十二指肠组织ghrelin基因及其受体GHS-R在蛋白和mRNA水平上的表达变化。结果与假手术组相比较,下丘脑、胃底、十二指肠ghrelin和GHS-R的表达变化在mRNA和蛋白水平表现分别为:下丘脑组织ghrelin和GHS-R的表达减少,其中ghrelin表达减少更明显;胃底组织ghrelin和GHS-R的表达显著增加,P<0.01;而在十二指肠组织,ghrelin的表达无明显变化,但GHS-R的产生却明显减少。结论 ghrelin及其受体GHS-R在胃肠中枢及外周组织不同部位的表达差异可能是CRF大鼠出现胃肠动力障碍的病理学基础之一。
- 付荣国袁浩铮王莉葛蘅张军宁启兰张富军
- 关键词：慢性肾功能不全下丘脑胃肠道GHRELIN
- 医学分子生物学实验教学改革的初步探索与实践被引量：12
- 2006年
- 根据医学分子生物学学科特点，结合多年的实验教学经验，对医学分子生物学实验教学进行了一系列的探索与实践，取得了初步成效。本文着重总结了近年来在更新尖验教学内容、提高教师自身素质、规范实验教学过程、应用多媒体技术等方面所做的一些尝试。
- 孟照俊俞小瑞韩燕王淑红宁启兰孙健
- 关键词：医学分子生物学实验教学教学改革
