孟庆慧
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
- 供职机构：苏州大学医学部放射医学与防护学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- B细胞易位基因2的表达水平对肿瘤细胞放射敏感性的影响被引量：4
- 2013年
- 目的研究B细胞易位基因2（BTG2）表达水平的改变对肿瘤细胞放射敏感性的影响。方法通过pcDNA3．BTG2脂质体转染的方法提高细胞的BTG2的表达水平，利用噻唑蓝和细胞克隆形成实验研究细胞放射敏感性的改变，应用Westernblot方法研究蛋白表达水平的变化。结果噻唑蓝和细胞克隆形成实验结果显示，在不同剂量的1射线照射后，提高BTG2的表达水平可明显提高乳腺癌MCF．7和MDA．MB．231细胞的放射敏感性。免疫共沉淀．Westernblot实验结果显示BTG2蛋白与DNA损伤修复和抗氧化蛋白乳腺癌易感基因1（BRCA1）相互作用，形成复合物。高表达的BRCAl明显地抑制了BTG2高表达对乳腺癌细胞放射敏感性的调节作用，而降低BRCA1的表达水平则提高了BTG2对乳腺癌细胞放射敏感性的调节作用。另外，肺癌细胞放射敏感性与其所含的BRCAl的表达水平成反比，而与BTG2的表达水平成正比。结论BTG2的高表达明显提高了肿瘤细胞的放射敏感性，其机制可能与其同BRCAl形成复合物有关。
- 李敏孟庆慧胡旭东焦旸徐加英樊赛军
- 关键词：肿瘤辐射耐受性基因BRCA1
- 辐射敏感性新基因UHRF1真核表达载体的构建及鉴定
- 2011年
- 目的构建UHRF1的真核表达载体,并验证其在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达。方法采用RT-PCR方法,从乳腺癌细胞MCF-7的总cDNA中扩增出2.3kb的UHRF1基因的cDNA片段,经限制性内切酶KpnⅠ与XhoⅠ双酶切,定向克隆到真核表达载体pcDNA3中,构建重组质粒pcDNA3(+)-UHRF1,利用限制性内切酶双酶切分析和DNA序列分析鉴定重组质粒;构建成功的重组质粒,经脂质体Lipofactamin2000介导转染MDA-MB-231细胞,G418筛选阳性克隆,以RT-PCR和Western blot检测UHRF1的mRNA和蛋白的表达。结果获得全长约为2.3kb的UHRF1基因片段;重组质粒经限制性内切酶XhoⅠ和KpnⅠ酶切、电泳后显示2.3kb的UHRF1目的片段和5.4kb的pcDNA3载体片段,即UHRF1基因的cDNA已正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中;UHRF1转染乳腺癌MDA-MB-231细胞后的RT-PCR和Western blot的结果显示:UHRF1的mRNA和蛋白水平均呈现高表达。结论成功构建UHRF1基因的真核表达载体,为进一步研究该基因的功能奠定基础。
- 李新莉孟庆慧朱然朱巍樊赛军
- 关键词：基因克隆真核表达载体脂质体
- UHRF1对人乳腺癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响及作用机制被引量：1
- 2010年
- 目的 了解基因UHRF1的不同表达水平对乳腺癌细胞MDA-MB-231辐射敏感性的影响及潜在的作用机制.方法 利用克隆形成实验观察细胞存活;流式细胞术测定细胞周期;利用DNA片段分析和Annexin V试剂盒测定细胞凋亡;Western blot测定蛋白表达变化;利用经典的染色体分析,观察染色体畸变（着丝粒环和双着丝粒）.结果 与对照相比较,UHRF1转染可将D0值由2.08 Gy提高至3.17 Gy,即降低MDA-MB-231细胞对X射线的辐射敏感性.利用siRNA抑制UHRF1的表达,可将X射线照射后细胞的生存率由41%降低至17%,即增强了细胞的辐射敏感性.UHRF1的高表达,可诱导G2/M期阻滞,抑制细胞凋亡,下调促凋亡蛋白Bax,上调DNA损伤修复蛋白Ku70和Ku80的表达水平,而且,抑制X射线诱导的染色体畸变.结论 UHRF1的高表达可以抑制细胞凋亡,促进DNA损伤修复.因此,通过抑制UHRF1的表达,可作为临床提高乳腺癌放疗疗效的新靶标.
- 李新莉孟庆慧Eliot M Rosen樊赛军
- 关键词：乳癌
- BTG2作为一种新的电离辐射诱导基因的研究
- 2014年
- 目的 研究γ射线照射对肿瘤细胞的B细胞易位基因2（BTG2）表达水平的影响.方法 应用RT-PCR方法研究电离辐射对肿瘤细胞BTG2 mRNA水平的影响;应用Western blot方法测定电离辐射对肿瘤细胞BTG2蛋白表达水平的影响.结果 与未照射对照细胞相比,3 Gyγ射线单次剂量照射明显提高了人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231和人宫颈癌细胞系C33A、HeLa中的BTG2蛋白的表达水平.γ射线照射人乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231导致了照射剂量和时间依赖性的BTG2表达水平的升高,而且这种改变既表现在BTG2 mRNA水平上,也反映在BTG2蛋白水平上.结论 BTG2是一种新的辐射诱导DNA损伤的反应基因,进一步研究将为BTG2作为肿瘤放射治疗的疗效和预后评价指标提供实验基础和依据.
- 李敏贺欣周则卫孟庆慧樊赛军
- 关键词：肿瘤
- 环巴胺选择性增加肺癌细胞放射增敏的研究被引量：1
- 2012年
- 目的研究环巴胺对肺癌细胞和正常肺上皮细胞的放射敏感性的影响。方法采用MTT测定细胞的生长和存活率;采用克隆形成实验观察环巴胺对肺癌细胞放射敏感性的影响;蛋白免疫印迹法检测Shh蛋白的表达;siRNA转染NIH-H226细胞观察降低Shh的表达对放射敏感性的影响。结果 MTT结果显示2.5μmol/L环巴胺24 h处理对本实验研究的所有肺癌细胞系和正常肺上皮细胞系的生长和增殖未见明显的影响。采用2.5μmol/L剂量的环巴胺预处理明显增加了NIH-H520、NIH-H1437、NIH-H1975、A549和NIH-H226 5种人肺癌细胞的放射敏感性,而并不影响IMR90、CCD-16Lu和BEAS-2B 3种正常肺上皮细胞的放射敏感性。在5种肺癌细胞系中可以检测到Shh蛋白不同程度的表达,而3种正常肺上皮细胞无Shh蛋白表达。Shh-siRNA转染的NIH-H226细胞的放射敏感性明显提高。结论环巴胺可以降低肺癌细胞中的Shh蛋白表达水平。采用Shh-siRNA明显降低肺癌细胞中Shh蛋白表达,增加了细胞的放射敏感性,但抑制了环巴胺的放射增敏疗效。本实验结果证实环巴胺可以选择性提高肺癌细胞的放射治疗敏感性,调节Shh表达可能是其重要的机制之一。
- 杜函洋孟庆慧车俊徐加英张福正樊赛军
- 关键词：环巴胺肺癌HEDGEHOG信号通路
