孙艳玲
- 作品数：28 被引量：47H指数：4
- 供职机构：大连医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”辽宁省医学高峰建设工程项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 急性肾损伤大鼠肾脏TGF-β受体亚型表达的变化
- 沈楠林洪丽王伟东谢华孙艳玲王大鹏邢伟
- 基质金属蛋白酶1组织抑制剂短发夹式RNA对肾小球系膜细胞凋亡及细胞外基质的影响被引量：6
- 2006年
- 目的构建靶向基质金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)的短发夹RNA(shRNA) 表达载体,并观察其对大鼠肾小球系膜细胞的凋亡和细胞外基质分泌的影响。方法构建携带绿色荧光蛋白(EGFP)基因的RNA干扰真核表达载体pEGFP-1／TIMP-1 shRNA,利用该载体介导两个TIMP-1 shRNA,分别为TIMP-1 shRNA1和TIMP-1 shRNA2。用荧光显微镜观察EGFP的表达。采用RT-PCR和Western印迹测定宿主细胞TIMP-1在基因和蛋白水平的沉默效果。用 ELISA检测细胞外基质成份的表达。以流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果(1)测序证实成功构建了针对TIMP-1的shRNA表达载体pEGFP-1／TIMP-1 shRNA;(2)荧光显微镜下,转染组细胞内均见绿色荧光;未转染组未见绿色荧光;(3)基因和蛋白水平的检测显示,与阴性对照组相比,TIMP-1 shRNA1组的TIMP-1明显受抑制(P<0．05),TIMP-1 shRNA2组抑制效果不明显;(4)ELISA结果显示,正常对照组FN、Ⅳ型胶原蛋白和LN的表达不随时间的延长而变化; 未转染组和阴性对照组在高糖诱导下,FN、Ⅳ型胶原蛋白和LN的表达随时间的延长而增加; 48、72 h的shRNA1组、抗体组和反义组对FN、Ⅳ型胶原蛋白、LN表达明显低于阴性对照组,以 shRNA1组最明显;(5)流式细胞仪结果显示,高糖诱导的各组细胞凋亡率随时间的延长而升高。在同一时间点shRNA1组细胞的凋亡率最高,反义组细胞的凋亡率次之,48 h和72 h的shRNA1 组细胞的凋亡率与其他各组比较,差异有统计学意义(P<0．05)。结论pEGFP-1介导的TIMP-1 shRNA1能更加有效的抑制大鼠肾小球系膜细胞中TIMP-1的表达,促进肾小球系膜细胞的凋亡并使细胞外基质的成份表达下降。
- 孙艳玲林洪丽吴泰华王楠于长青李龙凯王静
- 关键词：金属蛋白酶1组织抑制剂RNA干扰细胞外基质肾小球系膜细胞
- 阻断核心岩藻糖基化修饰抑制肾小管上皮细胞的间充质转化被引量：2
- 2011年
- 目的:探讨阻抑核心岩藻糖基化修饰对肾小管上皮细胞间充质转化(EMT)过程的影响。方法:利用转化生长因子β1(TGF-β1)建立肾小管上皮HK-2细胞EMT的模型,应用RNAi技术沉默HK-2细胞的α-1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)基因表达,光镜下观察FUT8基因沉默后细胞形态变化,免疫印迹及免疫细胞化学方法测定细胞表型标记物蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1)的表达变化,流式细胞仪测定细胞凋亡。结果:TGF-β1孵育48 h后,HK-2细胞失去原有的上皮细胞形态,呈现纤维细胞形态,纤维细胞表型标记蛋白α-SMA、FSP-1及N-cad-herin表达明显升高,而上皮细胞表型标记蛋白E-cadherin表达明显下降,同时伴有FUT8基因表达上调,细胞凋亡增加,而提前转染FUT8 siRNA能明显减弱上述这些反应。结论:FUT8催化的核心岩藻糖基化修饰参与HK-2细胞的EMT过程;阻断核心岩藻糖基化修饰,能有效阻断肾小管上皮细胞的EMT过程。
- 王大鹏林洪丽沈楠董毳孙艳玲谢华于长青王楠单路娟
- 关键词：HK-2细胞
- 促纤溶治疗对IgA肾病患者肾脏保护的回顾性队列研究被引量：6
- 2014年
- 目的:观察尿激酶或纤溶酶冲击治疗对IgA肾病患者的肾脏保护作用。方法:对84例IgA肾病患者资料进行回顾性分析,并根据是否使用促纤溶药物及使用药物的种类将患者分为对照组(n=23)、尿激酶组(n=32)和纤溶酶组(n=29),比较分析治疗6个月、1年3组患者的24 h尿蛋白定量、血生化、肾小球滤过率、凝血像。结果:3组患者24 h尿蛋白定量在治疗6个月和1年均较治疗前有统计学差异(P<0.01);组间比较:尿激酶组在治疗6个月及治疗1年时较对照组有统计学差异(P<0.01);纤溶酶组和对照组在治疗1年时有统计学差异(P<0.05)。在治疗1年时,尿激酶组肾小球滤过率改善,较对照组有统计学差异(P<0.05)。结论:在中重度IgA肾病患者,促纤溶治疗有独立于激素和免疫抑制剂之外的减少蛋白尿和肾脏保护作用。
- 方明林洪丽谢华陈吉林孙艳玲刘盼盼
- 关键词：IGA肾病纤溶酶
- JAK／STAT通路在金属蛋白酶1组织抑制剂抑制肾小球系膜细胞凋亡中的作用被引量：3
- 2008年
- 目的探讨金属蛋白酶1组织抑制剂（TIMP-1）抑制大鼠肾小球系膜细胞（RMC）凋亡与Janus激酶／信号转导和转录激活子（JAK／STAT）通路的关系。方法用无血清培养基体外培养pcDNA3空载体、人正义、反义TIMP-1基因重组真核表达载体转染RMC。根据是否加JAK2特异性抑制剂AG490刺激24h，将细胞分为未转染组、未转染＋AG490组、空载体组、空载体＋AG490组、正义组、正义＋AG490组、反义组和反义＋AG490组。另外设正常培养条件下的RMC作为正常对照组。应用流式细胞技术检测各组RMC的凋亡率。RT-PCR检测TIMP-1、bcl—xl、cyclin D1、p27^kip1和JAK2 mRNA的表达。Western印迹检测胞质中JAK2、STAT3、STAT5及其相应磷酸化蛋白（p-JAK2、p-STAT3、p-STAT5）的表达。结果未转染组、正义组及反义组RMC凋亡率分别为（10．59±0．96）％、（7．08±0．43）％和（21．91±0．25）％，各组间差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。在未加AG490的各组RMC中，bcl-xl和cyclin D1 mRNA在正义组中表达最高，反义组中最低，p27^kip1 mRNA在反义组中表达最高。加入AG490后，各组细胞的凋亡率均显著增加（P〈0．01）；TIMP-1、bcl-xl和cyclin D1 mRNA表达均减少；p27^pik1 mRNA表达均增加。在未加AG490的各组细胞中，p-JAK2、p-STAT3和p-STAT5在正义组中表达最高，反义组中最低。加入AG490后上述蛋白表达均减少，且正义＋AG490组最高，反义＋AG490组最低。结论TIMP-1表达受JAK／STAT信号通路调控，后者可通过上调前者的表达抑制RMC凋亡；TIMP-1通过JAK／STAT信号通路抑制RMC凋亡。bcl—xl、cyclin D1和p27^kip1参与了上述过程。
- 温文斌林洪丽吴泰华孙艳玲马艳梅夏丽华
- 关键词：金属蛋白酶1组织抑制剂系膜细胞JAKSTAT
- ERK1/2 MAPK通路在TIMP-1抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡中的作用被引量：11
- 2006年
- 目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK1/2)丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)通路在基质金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡中的作用。方法将人正义、反义TIMP-1用脂质体法转染大鼠肾小球系膜细胞,并将细胞分为正常对照组、未转染组、空载体组、正义转染组和反义转染组。各组细胞分别用高糖(25 mmol/L)和(或) MEK(ERK1/2通路中的MAPK激酶)特异性抑制剂PD98059(50μmol/L)刺激24 h。应用透射电镜观察细胞内部结构变化。Western印迹观察磷酸化(p)的ERK1/2、P90rsk、Bad及总的P90rsk、Bad、Bcl-2蛋白的表达。结果加入PD98059后,各组细胞内可见凋亡小体形成、细胞皱缩、核固缩、染色体边集及膜泡样突变等现象,与未转染组比较,以反义转染组最明显,凋亡细胞数目最多;正义转染组细胞形态改变不十分明显,凋亡细胞数目相对较少。此外,加入PD98059后, ERK1/2、P90rsk、Bcl-2及Bad的磷酸化明显减少(P<0．05),ERK1/2和P90rsk的磷酸化以正义转染组最明显(P<0．01);总P90rsk、总Bad表达量在各组之间无显著差异。结论ERK1/2通路在TIMP-1抑制高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞凋亡过程中起重要作用。
- 孙艳玲林洪丽吴泰华王楠谢华刘越坚
- 关键词：细胞外信号调节MAP激酶类间质胶原酶丝裂原激活蛋白激酶类肾小球系膜细胞
- 杂合式血液净化方式治疗急性毒草中毒临床观察
- 孙艳玲林洪丽李平李晶
- 阻断核心岩藻糖基化下调TGF-β受体功能、减轻肾小管上皮细胞间充质转分化
- 林洪丽王大鹏董毳沈楠孙艳玲谢华王楠单路娟
- 骨化三醇及帕立骨化醇注射液治疗血液透析患者继发性甲状旁腺功能亢进的疗效比较
- 目的:比较骨化三醇口服及帕立骨化醇注射液治疗血液透析患者继发性甲状旁腺功能亢进的疗效.方法:随机选择在我院维持性血液透析患者,主要入选标准需满足:年龄18-80岁之间,维持性血液透析至少2个月,透析频率每周3次;PTH≥...
- 刘颖林洪丽方明孙艳玲周娜
- 14例难治性肾病综合征的临床病理特点及间歇性高容量血液滤过
- 谢华林洪丽陈吉林康喆王伟东黄静孙艳玲
