孔惠敏
- 作品数：12 被引量：14H指数：2
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省研究生科研创新项目更多>>
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- IL-1β通过NF-κB促进大鼠内侧颞叶癫痫慢性进展
- 2013年
- 目的探讨白介素1-beta(IL-1β)在大鼠内侧颞叶癫痫(MTLE)模型病情进展中的作用,并探讨其与核因子-κB(NF-κB)的作用关系。方法利用匹罗卡品诱导SD鼠发作癫痫制成MTLE模型,并于制模成功后0.5h侧脑室注射IL-1β,于慢性期(8w),利用行为学观察、脑电图检测观察模型鼠自发癫痫的情况,利用Nissl染色和Timm染色观察模型鼠海马神经元脱失和苔藓纤维增生情况;利用凝胶迁移电泳(EMSA)和免疫组化(IHC)观察海马内NF-κB和NF-κB p65的表达。结果 IL-1β可以提高匹罗卡品诱导的MTLE模型鼠慢性期自发癫痫的发生率,且加重海马内神经元脱失和苔藓样纤维增生,并且NF-κB表达增加,与对照组和单纯匹罗卡品诱导组比较均有统计学差异(P<0.05)。结论 IL-1β通过NF-κB促进匹罗卡品诱导的MTLE模型鼠癫痫慢性自发发作,是导致MTLE进展的机制之一。
- 甘娜孔惠敏马玉平彭镜吴丽文尹飞
- 关键词：核因子-ΚB内侧颞叶癫痫
- miR-132和miR-146a在内侧颞叶癫痫患儿和幼年大鼠海马组织中的表达变化
- 2014年
- 目的:观察miR-132、miR-146a在内侧颞叶癫痫(mesial temporal lobe epilepsy,MTLE)患儿及幼年大鼠模型海马组织中的表达变化。方法:收集MTLE患儿海马标本及正常对照人海马标本,Real-time PCR方法检测两组人海马组织中miR-132、miR-146a的表达改变。利用匹罗卡品诱导建立幼年大鼠MTLE模型,收集急性期(造模后2 h)、潜伏期(造模后3周)、慢性期(造模后8周)海马组织标本及相应时间点对照组大鼠海马标本,Real-time PCR方法检测各实验组大鼠海马组织中miR-132、miR-146a的表达改变。结果:miR-132、miR-146a在患儿MTLE海马组织中表达明显升高,分别为2.2±0.1和3.0±0.2,与正常对照组(1.0±0.2)比较差异有统计学意义(P<0.05)。miR-132在MTLE大鼠模型急性期、潜伏期及慢性期表达均明显增加,分别为5.2±0.5,2.5±0.2和3.6±0.2,较正常对照组大鼠(1.0±0.1)差异有显著性(P<0.05);miR-146a在MTLE大鼠急性期改变不明显,在潜伏期及慢性期表达明显增加(2.8±0.2,1.8±0.2),与对照组大鼠(1.0±0.1)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-132、miR-146a在MTLE患儿及幼年大鼠模型中存在差异表达,其可能与MTLE中脑组织炎症反应的异常调控有关。
- 孔惠敏尹飞吴丽文何芳彭镜
- 关键词：MIR-146A
- miR-132激动剂对幼年大鼠MTLE模型慢性期的影响
- 孔惠敏尹飞吴天慧李琳红彭镜
- PI3K-p85、Akt和S6k在MTLE模型鼠海马内的动态表达变化
- 目的：PI3K-p85、Akt和S6k在MTLE模型鼠海马内的动态表达变化,以期为MTLE慢性进展中神经元异常突触形成寻找原因,为MTLE的防治提供治疗思路.方法：利用匹罗卡品诱导SD鼠发作癫痫制成MTLE模型,于制模成...
- 甘娜尹飞孔惠敏马玉平吴丽文彭镜
- 关键词：内侧颞叶癫痫AKT蛋白
- 体外小胶质细胞活化及MRP8表达关系的研究被引量：1
- 2013年
- 目的建立体外小胶质细胞糖氧剥离活化模型,并探讨小胶质细胞活化与MRP8表达的关系。方法体外培养大鼠原代小胶质细胞,糖氧剥离(OGD)法建立小胶质细胞活化模型,通过形态学观察、MTT法检测不同OGD时间点小胶质细胞活力改变,实时荧光定量PCR法检测不同时间点小胶质细胞MRP8相对表达量。结果小胶质细胞OGD培养5min后细胞开始活化,活力较正常对照组明显增加(P<0.05),且在10min组细胞活力最大,OGD培养15min、30min、60min后细胞活力明显下降(P<0.05)。MRP8在小胶质细胞中表达随着OGD时间延长先增加后降低,在10min组达高峰(P<0.05)。结论首次在体外证实活化的小胶质细胞表达MRP8增加,这可能是其参与多种中枢神经系统疾病发病的机制之一。
- 孔惠敏甘娜马玉平彭镜吴丽文尹飞
- 关键词：小胶质细胞
- 蛋白激酶Cα对T细胞生物学功能影响的研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨蛋白激酶Cα(PKCα)对T细胞增殖、凋亡、分化、细胞因子的生成、诱导性调节性T细胞(iTreg)生成的影响。方法分离野生型(PKCα+/+组)或PKCα基因敲除(PKCα-/-组)小鼠T细胞,体外培养,在T细胞表面受体(TCR)信号刺激下,利用3H胸腺嘧啶掺入法、CSFE/Annexin V染色结合流式细胞技术检测T细胞增殖及凋亡情况;收集细胞培养上清,用ELISA方法检测细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ和IL-17的生成。分离PKCα+/+组或PKCα-/-组小鼠CD4+T细胞,在TCR信号刺激下,按Th17细胞、iTreg分化条件进行体外诱导,用流式细胞技术检测细胞分化结果。结果与PKCα+/+组相比,PKCα缺失时,在TCR信号刺激下,T细胞的增殖降低,IL-2生成增多,IL-4和IL-17生成减少,Th17细胞分化减少,iTreg生成增加(均P<0.05)。结论 PKCα具有促炎作用。
- 杨丽芬孔惠敏张小清尹飞
- 关键词：蛋白激酶CΑT细胞TH17细胞
- 一种改良的新生大鼠小胶质细胞原代培养方法被引量：3
- 2013年
- 目的:改良现有的小胶质细胞纯化分离培养方法,建立稳定、高产的培养模型。方法:选用新生1～2d SD大鼠进行混合胶质细胞培养,然后结合营养剥离法及震摇法纯化分离小胶质细胞;利用CD11b/c(OX42)免疫细胞化学的方法对分离的小胶质细胞纯度进行鉴定。结果:改良的方法可稳定的获得5×104个/培养瓶(25cm2)的小胶质细胞,纯度达到95%,荧光倒置显微镜下观察细胞形态,分离第1 d小胶质细胞呈不规则圆形,折光不均匀,继续培养3-5 d,小胶质细胞逐渐出现单极或多极突起,7 d时部分细胞转为静止状态,呈分枝状。结论:改良的小胶质细胞培养方法产量多,纯度高,为小胶质细胞在中枢神经系统疾病相关研究提供了新的基础。
- 孔惠敏甘娜彭镜何芳马玉平尹飞
- 关键词：小胶质细胞原代培养新生大鼠
- MicroRNA-132拮抗剂对匹罗卡品诱导的幼年大鼠癫癎持续状态的影响
- 2016年
- 目的探讨micro RNA-132拮抗剂对氯化锂-匹罗卡品诱导的幼年Sprague-Dawley(SD)大鼠癫癎持续状态(SE)的影响。方法将3周龄SD大鼠分为癫癎模型组、micro RNA-132拮抗剂组和micro RNA-132拮抗剂阴性对照组,每组15只。Micro RNA-132拮抗剂及其阴性对照预处理在造模前24 h进行,利用氯化锂-匹罗卡品建立幼年SD大鼠SE模型。通过行为学观察各组大鼠SE发作潜伏期及SE诱导成功率;Lado幼鼠癫癎评分观察各组大鼠抽搐发作的严重程度;脑电图监测各组大鼠癫癎样放电的频率及波幅,并统计各组死亡率。结果在实验各组中,SE诱导成功率差异无统计学意义(P>0.05);与micro RNA-132拮抗剂阴性对照组和癫癎模型组比较,micro RNA-132拮抗剂组大鼠造模以后达到SE的潜伏期明显延长(P<0.05),Lado幼鼠癫癎评分下降(P<0.05),脑电图显示癎样放电的幅度及频率显著下降(P<0.05),死亡率稍降低。结论 micro RNA-132拮抗剂预处理对氯化锂-匹罗卡品诱导的幼年SD大鼠SE发生和发展具有抑制作用,抑制micro RNA-132有可能成为SE药物治疗的潜在靶点和新方向。
- 吴天慧尹飞彭镜孔惠敏李琳红
- 关键词：拮抗剂
- MicroRNA-132拮抗剂两种不同注射方式在匹罗卡品诱导的幼年大鼠癫痫急性期的差异被引量：2
- 2016年
- 目的探讨microRNA-132拮抗剂对氯化锂-匹罗卡品诱导的幼年SD大鼠内侧颞叶癫痫(mesial temporal lobe epilepsy,MTLE)模型急性期的影响。方法实验分为4组:microRNA-132拮抗剂侧脑室置管组;microRNA-132拮抗剂阴性对照置管组;microRNA-132拮抗剂直接注射组;microRNA-132拮抗剂阴性对照直接侧脑室注射组;实验各组药物干预在造模前24 h进行。利用氯化锂-匹罗卡品建立SD大鼠MTLE模型,通过行为学观察各组大鼠癫痫持续状态发作潜伏时长,Racine评分观察各组大鼠抽搐发作的严重程度,脑电图监测癫痫样放电的频率及波幅,并统计实验各组大鼠诱导SE的成功率及24 h后的死亡率。结果在实验各组中,建模成功率无显著性差异,microRNA-132拮抗剂直接注射组幼年SD大鼠造模以后达到SE的潜伏时较其阴性对照组明显延长、癫痫发作的Racine评分明显下降、脑电图结果显示痫样放电的幅度及频率显著下降,死亡率降低,结果有统计学意义(P<0.05)。MicroRNA-132拮抗剂侧脑室置管注射组与microRNA-132拮抗剂侧脑室直接注射组结果无统计学差异(P>0.05)。结论 microRNA-132拮抗剂预处理SD大鼠能明显延长氯化锂-匹罗卡品诱导的SD幼年大鼠癫痫发作的潜伏期,减轻急性期抽搐严重程度及大脑样痫放电,降低大鼠癫痫持续状态后的死亡率。提示microRNA-132拮抗剂对氯化锂-匹罗卡品诱导的幼年SD大鼠MTLE的发生具有抑制作用,抑制microRNA-132有可能成为癫痫持续状态药物治疗的潜在靶点和新方向。
- 吴天慧尹飞彭镜孔惠敏李琳红
- 关键词：拮抗剂匹罗卡品癫痫
- 体外小胶质细胞活化及MRP8表达关系的研究
- 目的：建立体外小胶质细胞糖氧剥离活化模型,并探讨小胶质细胞活化与MRP8表达的关系.方法：体外培养大鼠原代小胶质细胞,糖氧剥离(OGD)法建立小胶质细胞活化模型,通过形态学观察,MTT法检测不同OGD时间点小胶质细胞活力...
- 孔惠敏甘娜马玉平彭镜吴丽文何芳尹飞
- 关键词：中枢神经系统疾病发病机制小胶质细胞
