姜容
- 作品数:4 被引量:23H指数:3
- 供职机构:南方医科大学公共卫生与热带医学学院更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金广州市科技计划项目广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 肠出血性大肠埃希菌O157:H7 LAMP检测方法的建立及嗜酸乳杆菌食品级表达系统的构建
- 一、研究背景和目的
肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157∶H7是一种新型的食源性致病菌,主要经食品传播,引起食物中毒,临床主要表现为出血性肠炎...
- 姜容
- 关键词:肠出血性大肠埃希菌嗜酸乳杆菌分离培养法出血性肠炎
- 文献传递
- 高效表达幽门螺杆菌黏附素Hp0410的嗜酸乳杆菌重组菌株的构建被引量:4
- 2010年
- 目的构建高效表达幽门螺杆菌黏附素Hp0410的嗜酸乳杆菌重组菌株。方法从幽门螺杆菌标准株NCTC11639中扩增出幽门螺杆菌黏附素基因Hp0410,克隆入穿梭质粒pMG36e中,通过电穿孔将重组质粒转入嗜酸乳杆菌,表达的目的蛋白经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳与硝酸银染色及Western blotting鉴定,并检测重组质粒的稳定性。结果扩增的黏附素Hp0410基因与基因库公布的一致,构建的重组质粒成功转入嗜酸乳杆菌中,表达出分子量约34kD的目的蛋白,Western blotting证实该蛋白可被幽门螺杆菌感染患者血清所识别。重组质粒pMG36e-Hp0410在含有红霉素和不含有红霉素的环境下均稳定。结论成功构建了高效组成型表达幽门螺杆菌黏附素Hp0410的重组嗜酸乳杆菌菌株。
- 朱丽芳龙北国罗军姜容范宏英
- 关键词:幽门螺杆菌嗜酸乳杆菌活载体疫苗
- 检测肠出血性大肠埃希菌O157:H7的环介导等温扩增和PCR法比较被引量:7
- 2012年
- 目的建立基于环介导等温扩增(LAMP)技术的肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157:H7快速简便检测方法,并与PCR进行比较。方法针对EHEC O157:H7保守的rfbE基因序列,设计特异性引物,建立LAMP和PCR检测技术并优化其反应条件,比较这两种检测方法的灵敏度、特异性和对实际样品的检测结果。结果成功建立了LAMP和PCR检测体系,灵敏度检测结果显示,LAMP检测限低至10 cfu/ml,PCR检测限为102cfu/ml,LAMP检测灵敏度高于PCR;对39株近源菌进行检测,结果显示,LAMP法仅7株EHEC O157:H7得到阳性结果,非EHEC O157:H7菌株均为阴性,PCR产物则出现非特异性条带,LAMP法特异性比PCR法高。对于32份猪肉样品的检测,LAMP和PCR与常规检测结果一致,3份样品检测阳性。结论 LAMP检测技术的特异性和灵敏度较PCR高,并且操作简便、检测成本低,耗时短,更有望发展成为快速准确检测EHEC O157:H7的有效手段。
- 姜容龙北国曾桂芬王丹范宏英吴娴波
- 关键词:肠出血性大肠埃希菌O157:H7环介导等温扩增技术PCR技术
- LAMP和PCR法检测痢疾志贺菌的特异性和灵敏性比较被引量:15
- 2012年
- 目的建立环介导等温扩增技术(LAMP)快速检测痢疾志贺菌,并对其特异性、灵敏度与传统PCR进行比较。方法以痢疾志贺菌侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)为靶序列,设计6条特异性引物(内引物、外引物和环引物各2条),优化LAMP反应体系及反应条件,检测LAMP反应的灵敏度、特异性及模拟样品,同步与PCR进行比较。结果 LAMP法和PCR均能特异性地扩增出志贺菌靶DNA,而其他非志贺菌均未扩增出特有条带。检测细菌纯培养物和模拟食品的灵敏度LAMP法分别为5.3×101cfu/ml、6.8×101cfu/ml,PCR法分别为5.3×102cfu/ml和6.8×102cfu/ml。结论利用LAMP技术,可快速、灵敏、简便地检测痢疾志贺菌,与PCR方法比较,特异性强、操作简便、检测成本低、耗时短,有望发展成为快速检测痢疾志贺菌的有效手段。
- 曾桂芬龙北国姜容刘行超廖韫婕范宏英
- 关键词:环介导等温扩增技术痢疾志贺菌IPAH基因